中药质量控制与评价创新方法研究进展及应用

中药质量是保证中药功效稳定性及应用安全性的基础,其规范化、标准化、现代化,是推动中药走向国际化的重要前提。近年来,围绕中药质量控制和评价体系建设及模式创新取得了突破,中药整合质量观、中药质量标志物等新思路、新模式的提出,引领了中药质控发展的新方向,涌现出了一系列中药质量评价创新技术与创新方法。拟从化学基准、化学基准与药理效应基准相结合、化学基准与生物效应基准相结合3个角度,从中药评价方面梳理近年来中药质控方法方面最新研究,系统阐述中药质量评价创新方法及其应用现状,探讨其未来发展趋势,以期为建立符合中药特色理论的质量控制体系提供拓展思路。     

烟碱预处理对全身炎症反应综合征大鼠血浆细胞因子的影响研究

目的通过复制＂两次打击＂SIRS大鼠模型,探讨迷走神经切断及烟碱预处理对大鼠SIRS的作用,为临床治疗SIRS提供新思路。方法选择雄性健康SD大鼠40只,随机将40只实验动物分为4组,每组10只,对照组未予处理;单侧迷走神经切断组：在诱导SIRS模型前7d,行右侧颈部迷走神经切断;烟碱预处理组：在诱导SIRS模型前7d,开始每天给予烟碱液5mg.kg-1ip;联合迷走神经切断＋烟碱预处理组：在诱导SIRS模型前7d,联合迷走神经切断＋烟碱预处理。造模前晚禁食,不禁水,术日采用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,无菌条件采用腹颈正中切口显露右侧颈部迷走神经主干。比较4组大鼠TNF-a、IL-6含量。结果迷走神经切断后能提高炎症反应,烟碱预处理后能降低炎症反应,联合二者处理后炎症反应介于两者之间,且与未行迷走神经切断和烟碱预处理时炎症反应应答能力亦存在差别。结论中枢神经能够通过副交感神经途径调节炎症反应;烟碱具有较强的抗炎作用,其可不依赖于迷走神经的完整性而独立发挥作用。     

内质网应激在肝病性别差异形成中的影响及机制

目的探讨内质网应激在肝病性别差异形成中的影响及机制。方法首先回顾性分析遵义医科大学附属医院2018年肝病门诊23 043例肝病患者及肝病科1110例肝病患者的性别分布情况;然后通过腹腔注射CCl4诱导急性肝损伤小鼠模型,验证肝损伤的性别差异,并进一步探讨内质网应激在肝损伤性别差异形成过程中的作用机制。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。计数资料多组间比较采用χ2检验。结果肝病门诊及肝病病房男性患者发病率明显高于女性患者,肝病门诊男女之比为1. 56∶1,肝病病房男女患者之比为1. 86∶1,差异有统计学意义(χ2=7. 517,P=0. 003);在动物模型研究中,CCl4诱导小鼠急性肝损伤,雄性模型小鼠死亡率明显高于雌性模型小鼠(50%vs 30%,P 0. 05),雄性模型小鼠血清ALT、TBil水平均明显高于雌性模型小鼠[(5767. 8±518. 8) U/L vs (4749. 5±378. 0) U/L,(6. 20±0. 88) mmol/L vs (4. 83±0. 57)mmol/L,P值均0. 05],雄性模型小鼠肝坏死面积亦高于雌性模型小鼠[(47. 50±4. 65)%vs (38. 80±5. 00)%,P=0. 043],雄性模型小鼠肝细胞凋亡标志裂解型胱天蛋白酶-3蛋白相对表达量明显高于雌性模型小鼠[(26. 00±2. 11) vs (18. 40±1. 54),P=0. 042]。模型小鼠肝脏磷酸化蛋白激酶R样激酶(p-PERK)、剪接型X盒结合蛋白1(XBP1s)、P58IPK及C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白水平相比对照组均明显升高(P值均0. 05)。雄性模型小鼠肝脏XBP1s、P58IPK及CHOP蛋白相对表达量均较雌性模型小鼠升高[(25. 92±2. 11) vs (15. 54±1. 21),P=0. 033;(28. 60±2. 43) vs (13. 56±1. 13),P=0. 026;(27. 15±2. 61) vs (18. 18±1. 81),P=0. 038],p-PERK蛋白水平相对降低[(16. 82±0. 11) vs (22. 84±0. 03),P=0. 043];免疫组化检测CHOP蛋白表达,雄性小鼠明显高于雌性小鼠[(1. 00±0. 11) vs (0. 62±0. 03),P=0. 032]。结论内质网应激信号通路的不协调激活可能参与肝病性别差异的形成过程。     

全基因组关联研究进展及应用前景

全基因组关联研究(genome-wide association study,GWAs)是指通过收集对照组和患者组样本(组织、血样等),提取DNA,进行全基因组单核苷酸多态(single nucleotide polymorphism,SNP)芯片扫描并获得数据信息,采用关联分析,筛选与疾病关联的序列变异的研究方法.该方法试图通过测定疾病的变异基因和单核苷酸多态性,研究确定疾病发病易感区域和相关基因,寻找疾病的标记物,进行早期诊断和有效的个体化治疗,开发新药物和新的特异性防治措施.     

人CYB5R2基因真核表达载体的构建

目的构建人CYB5R2基因真核表达载体,并观察其在人鼻咽癌细胞HONE1中的表达。方法根据表达载体pCMV-Tag3A上的多克隆位点和CYB5R2基因CDS序列设计引物,应用RT-PCR从人睾丸cDNA中克隆出CYB5R2的CDS,并进行TA克隆。对经PER、双酶切和双向测序验证正确的质粒,进行CDS目的片段的回收,将其连接于pCMV-Tag3A载体的多克隆位点内构建真核载体,然后进行PCR、双酶切和双向测序验证。脂质体法转染鼻咽癌细胞HONE1细胞,荧光显微镜观察和RT—PCR验证该基因的表达。结果PCR、双酶切和双向测序结果显示pCMV-Tag3-CYB5R2-CDS真核表达载体构建成功,荧光显微镜和RT—PER的结果显示该重组质粒在HONE1细胞中正确表达。结论成功构建了pCMV-Tag3-CYB5R2-CDS真核表达载体,并在鼻咽癌细胞HONE1中表达,为进一步验证其抑癌作用及探索其抑癌机制做准备。     

真武汤对肾纤维化大鼠尿蛋白含量及血生化指标的影响

目的:建立单侧肾梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)致肾纤维化模型,探讨真武汤对肾纤维化大鼠24h尿量、尿蛋白含量、血液生化等指标的影响。方法:将大鼠随机分为5组,除正常对照组外,大鼠采用结扎左侧输尿管的方法建立肾纤维化模型。造模大鼠随机分为4组:模型组、氯沙坦钾组(20 mg/kg.d)、真武汤治疗组(2.1、9.8 g生药.kg-1.d-1),检测0、14、28 d大鼠24 h尿量及其尿蛋白含量。给药结束后,取双侧肾,比较肾脏组织形态变化,并检测大鼠的两肾比重及14、28 d大鼠的血液生化指标。结果:真武汤可减少UUO大鼠的24 h尿量,降低其尿蛋白含量,调节肾纤维化大鼠血浆中肌酐及尿素氮水平,对白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、低密度及高密度脂蛋白含量影响不明显。结论:真武汤对肾纤维化大鼠蛋白尿及肾功能具有正相调节作用,对大鼠体内脂质代谢也具有一定的影响。     

院内急危重症转运途中意外死亡研究

院内转运各类急危重患者是急诊工作重要的组成部分,如何避免转运及不合理的治疗给患者带来伤害,减少不良事件的发生,值得广大医务人员重视.现就遵义医学院附属医院院内转运过程中出现心搏呼吸骤停抢救无效死亡的63例患者情况总结分析如下.     

人胰淀素类似物普兰林肽体外活性测定方法的建立

建立体外人胰淀素类似物普兰林肽活性测定的方法,为普兰林肽及其制剂的质量控制提供可靠的细胞检测方法。将L6细胞培养并分化成有明显肌管的成熟骨骼肌细胞,采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD)检测普兰林肽对高糖培养环境下骨骼肌细胞葡萄糖吸收的影响。结果显示,在1×10-9～1×10-5mol/L的浓度范围内,普兰林肽能显著增加分化后的L6细胞的糖吸收量,在16 h达到最大值。普兰林肽浓度的负对数(x)与细胞糖吸收增加量(y)间呈现出良好的线性关系(y=-4.750x+59.54,R2=0.991 9)。应用本实验建立的方法检测了市售普兰林肽醋酸盐注射剂的活性,结果显示1×10-6、1×10-7和1×10-8mol/L的普兰林肽注射剂作用于分化的L6细胞16 h,细胞的糖吸收增加率为(61.89±9.54)%,(43.68±10.06)%和(33.30±13.03)%(P<0.01);与单用胰岛素组对比,普兰林肽与胰岛素联合使用能显著提高分化后的L6细胞的糖吸收量(P<0.05),与普兰林肽注射剂的临床使用结果一致。本实验为普兰林肽的活性测定提供了一种稳定可靠的细胞替代模型。     

高血压与失眠相关性研究

高血压病是最常见的心血管疾病之一。其发病率逐年上升,根据临床观察,许多病人伴失眠症,加重了疾病的发展。高血压病可以导致失眠,失眠常使血压升高,高血压与失眠之间相互影响,并形成恶性循环。文章主要就高血压与失眠之间的关系及中医对高血压伴失眠的认识进行阐述。     

百草枯中毒致消化道出血死亡个案1例

患者,男,49岁,因"口服百草枯5h"入院。5h前口服"百草枯"量约10ml。非喷射性呕吐胃内容物1次,量约50g,无咖啡样物及鲜血,无口舌疼痛及咽痛,无心悸、气促及呼吸困难,无昏迷、抽搐及大小便失禁。既往无消化性溃疡等引起消化道出血病史,无长期服用非甾体类消炎药物病史,无烟酒嗜好。查体:T 36.4℃,P 95次/min,R 21次/min,BP 126/82mm Hg,SPO298%,神志清楚。双肺呼吸音清晰,未闻及干湿性啰音。腹平软,上腹部轻压痛,肠鸣音3~5次/min。实验室检查: