色谱技术在中药白芷研究中的应用进展

中药白芷具有广泛的药理作用,其主要有效成分香豆素类化合物的分离提取和结构鉴定已有了长足发展。现代色谱技术在中药白芷研究中的广泛运用,使白芷的定量分析方法体系、质量指标体系和提取工艺优化等研究有了新的进展,文章对近5年的有关文献作了综述。     

福尔马林皮下注入引起大鼠脊髓背角表层神经元Fos蛋白和蛋白激酶Cβ亚型的共同表达：免疫细胞化学双标法研究

目的：研究慢性伤害性模型大鼠脊髓背角表层神经元中Fos蛋白和蛋白激酶Cβ亚型的表达间的关系。方法：用免疫细胞化学双标技术，观察了大鼠一侧后脚掌注射福尔马林1h后，脊髓腰段背角神经元中Fos蛋白和蛋白激酶Cβ亚型(PKCβ)的表达及二者的共存情况。结果：1)注射侧背角表层中有大量Fos蛋白样免疫组化染色阳性神经元出现，且其中一半以上同时有PKCβ样免疫反应的增强，而背角表层中有PKCβ样免疫反应增强的神经元中，只有l／5同时有Fos蛋白样阳性反应出现；2)在注射侧背角V-Ⅶ层中也有少量Fos蛋白样阳性反应神经元出现，但它们都不出现PKCβ—LI反应的增强。结论：背角表层中的双标免疫阳性神经元可能与慢性伤害性输人引起的脊髓过敏状态的形成有关。     

浅谈中药资源的开发与可持续利用

根据目前中药材生产中最突出的资源利用与生态环境恶的矛盾，提出中药资源的开发和持续利用与生态环境保护的几点建议，以期实现中药产业与环境保护的协调发展。     

白芷挥发油的急性毒性及对PGE2和血糖的影响

目的研究白芷挥发油的急性毒性及对PGE2、血糖的影响.方法采用白芷的水蒸气蒸馏所得的油状物,测定其及水煎液的急性毒性,以紫外法测定PGE2含量,GOD-POD法测定血糖含量.结果白芷挥发油(EOAD)的LD50为5.86kg生药.kg-1,白芷水煎液的最大耐受量为人用剂量的1600倍.结论EOAD的毒性低,安全范围广,对外周PGE2的影响不大,对血糖有一定影响.     

建立非均衡竞争叶酸定量测定的化学发光免疫分析法

目的 制备抗人叶酸(FA)抗血清并应用异硫氰酸荧光素(FITC)系统开发新型非均衡竞争技术,建立可常规应用的定量检测血清FA的化学发光免疫分析(CLIA)法.方法 FITC-FA类似物、FA抗体-HRP依次加入包被有抗FITC抗体的化学发光板,形成FITC抗体-FITC-FA类似物-FA抗体-HRP的免疫反应复合物;并进行方法学评价,同时与非FITC检测系统及罗氏化学发光免疫分析系统检测结果进行比较.结果 成功制备FA抗血清并建立基于FITC系统的非均衡竞争CLIA;经方法学评价,自研法的线性相关系数绝对值大于0.990 0,灵敏度1.21 nmol/L,线性范围1.21～38.80 nmol/L,批内变异系数小于5％,自研法定量检测性能优于非FITC系统;与罗氏检测系统结果有较好相关性(R=0.908 1).结论 建立的非均衡竞争定量检测血清FA的CLIA法,具有良好的检测灵敏度与特异性,可应用于常规检测.     

c-fos基因的反义寡聚脱氧核苷酸鞘内注入减弱福尔马林引起的大鼠伤害性行为反应及脊髓背角Fos蛋白和强啡肽 A表达的研究(英文)

本研究通过鞘内注射 c-fos反义寡聚脱氧核苷酸 (antisense oligodeoxynucleotide,AS-ODN)封闭背角中 F os蛋白的表达 ,观察了 Fos蛋白合成和慢痛反应的关系 ,并分析 Fos蛋白合成和强啡肽 A(Dyn A)表达之间的关系。实验组动物 (n=5 )鞘内预先注射 c-fos的 AS-ODN(5 0μg,5μl) ,另两个对照组 (每组 n=5 )分别注射等量生理盐水和 AS-ODN的反序核苷酸 (reverseoligodeoxynucleotides,RS-ODN,5 0μg,5μl) ;4h后 ,各组动物均在一侧后肢脚掌皮下注射 formalin(5 % ,5 0μl) ,并立即用计算动物舔拭注射侧后脚掌累计时间的方法 ,检测大鼠的伤害性行为反应 ,行为检测后 1h处死动物 ,用免疫组化方法检查脊髓背角中 Fos蛋白阳性神经元的数量和强啡肽 A(1～ 8)的表达量。结果发现 ,和两个对照组相比 ,实验组动物 Formalin诱发的伤害性行为反应的第二相明显减弱 ,同时 Form alin注射侧背角 F os蛋白样免疫阳性细胞的数量和 Dyn A含量的灰度值明显减少。本研究结果提示 ,外周伤害性刺激引起的长期持续的痛反应是以 c-fos基因表达增加及受其调控的 Dyn A表达上调为基础的 ,由此推测在脊髓背角神经元中 Fos蛋白和 Dyn A表达的增强可能是出现慢性痛行为反应和痛过敏状态的基础     

可溶性Fas,可溶性Fas配体与细胞因子在1型糖尿病发病中的意义

目的　研究可溶性Fas(sFas)和可溶性Fas配体(sFasL)与细胞因子在1型糖尿病发病中的作用。方法　32名1型糖尿病患者和20名正常人的血清,采用夹心BAS-ELISA法分别检测sFas,sFasL,γ干扰素(IFN-γ)及白细胞介素-1(IL-1)含量。结果　1型糖尿病血清中sFas,IFN-γ及IL-1含量分别为(1　　546±685,1　　074±451与1　　406±721)ng/L,显著高于正常组;sFasL为(211±73)mg/L,低于正常组但差异无显著性。在1型糖尿病患者中高浓度sFas伴高IFN-γ者共12例,低浓度sFas伴低IFN-γ者共9例。结论　1型糖尿病患者血清中的sFas,IFN-γ及IL-1高于正常人,sFas与IFN-γ浓度呈正相关(r=0.79,P＜0.05)。对1型糖尿病患者血清进行sFas,IFN-γ及IL-1等检测可作为反映胰岛细胞病变的辅助指标,有助于对疾病的诊断与治疗。     

膜FasL的纯化与诱导凋亡功能的鉴定

本文用FasL单抗NOK 1与CNBr Sepharose4B偶联 ,制备亲和层析柱 ,从表达FasL的HEpG2细胞膜蛋白抽提液中分离纯化FasL分子。实验证明用本法纯化的FasL其相对分子质量为 3 10 0 0～ 3 3 0 0 0 ,SDS PAGE呈现单一条带 ,Westernblot表明具有一定的抗原性 ,能诱导表达Fas的细胞发生凋亡 ,在一定浓度范围内呈现量 效关系 ,为进一步研究FasL分子的结构功能及制备抗体提供了实验材料。     

LLDT-8对类风湿关节炎单核细胞向破骨样细胞转化的作用机制研究

目的:探讨LLDT-8对类风湿关节炎骨破坏的作用机制.方法:收集取类风湿关节炎患者的外周血和关节滑液,分离外周血单个核细胞(PBMC)和关节滑液单个核细胞(SFMC).PBMC用RANKL和M-CSF分别诱导后加入不同浓度LLDT-8干预,于24、48、72 h和14 d进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色,显微镜下对Trap(...     

(一)一表没食子儿茶素没食子酸酯对胶原诱导性关节炎小鼠免疫调节机制研究

目的 采用鸡Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠模型,观察(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的治疗作用,并探讨其作用机制.方法 给予CIA小鼠EGCG治疗,以磷酸盐缓冲液(PBS)作为阴性对照,观察各组小鼠发病情况.通过对CIA小鼠关节评分和关节病灶病理学检测[苏木素-伊红(HE)染色] 判断EGCG的疗效;通过,3H-胸腺嘧啶核苷(TdR)掺入实验、流式细胞术及Western-blot方法阐明EGCG的免疫学作用机制.结果 ①EGCG能够改善CIA的关节评分、减少病变关节组织炎性细胞浸润;② EGCG能抑制CIA小鼠C Ⅱ反应性脾细胞的增殖[EGCG组每分钟脉冲数(cpm)值3366±199;PBS组cpm值5342+112,P<0.05]和细胞因子白细胞介素(IL)-17的分泌(EGCG组IL-17阳性细胞数占CD4+T细胞0.41%;PBS组占4.05%);③EGCG能提高CIA小鼠淋巴结细胞中IKB的表达,降低磷酸化IKB蛋白水平的表达.结论 EGCG能显著减轻CIA严重程度.EGCG通过抑制CIA小鼠C Ⅱ反应性脾细胞的增殖和炎症因子IL-17的分泌;以及通过抑制CⅡ反应性淋巴结细胞中IKB的磷酸化,增强IKB的表达从而抑制核因子(NF)-κB的活性来治疗CIA.