小鼠结肠癌RNA转染mIL12修饰的树突状细胞诱发抗肿瘤活性

目的:构建肿瘤组织特异的噬菌体呈现型单链抗体库,用噬菌体体内筛选与肿瘤血管特异性结合的单链抗体,为癌症的诊断和治疗奠定基础。方法:取食道癌、胃癌、脑癌、肺癌、脊髓瘤患者肿瘤组织,提取各肿瘤组织膜蛋白混合后免疫BALB/c小鼠,取鼠脾脏淋巴细胞提取总RNA,用RT-PCR分别扩增抗体重、轻链可变区基因(VH和VL),经Linker连接形成ScFv基因片段,将ScFv基因片段与噬菌粒载体pCANTAB5E的连接产物转化大肠杆菌TG1,在辅助噬菌体M13KO7的作用下,获得重组噬菌体单链抗体库。以人宫颈癌HeLa细胞致瘤裸鼠为实验模型,用所构建的单链抗体库进行了4轮特异抗体的体内筛选。挑取了24个PCR鉴定为阳性的单链抗体做免疫组化分析,将在HeLa致瘤的组织切片上呈阳性染色、而在对照的肾组织切片上没有阳性染色的单链抗体进行序列测定。结果:选用7株不同的肿瘤细胞系建立裸鼠致瘤模型,以HeLa细胞致瘤裸鼠成瘤效果最好。用所构建的库容量为1.6×106的单链抗体库对肿瘤血管特异结合抗体进行体内筛选,得到1株单链抗体ScFv(VH-linker-VL),命名为ScFvH1。结论:成功构建肿瘤特异单链抗体库,并用此抗体库筛选到与肿瘤血管结合特异性较好的单链抗体,为肿瘤的早期诊断和治疗提供了一条新的技术路线。     

成人膀胱横纹肌肉瘤1例

1资料 患者,女性,40岁.因肉眼血尿3天入院.查体无异常发现.静脉肾盂造影检查见膀胱内一巨大不规则充盈缺损,膀胱壁较光整.     

紫杉醇抗血管生成作用的实验研究

 目的　探讨紫杉醇的抗血管生成作用。方法　以人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)原代培养模型 ,MTT法测定紫杉醇对HUVEC增殖的影响 ;采用鸡胚尿囊膜血管形成模型 (CAM模型 ) ,观察紫杉醇对鸡胚尿囊膜新生血管的抑制作用。结果　紫杉醇在非细胞毒浓度下可在体外抑制HUVEC的增殖 ,在体内抑制鸡胚尿囊膜新生血管形成。结论　紫杉醇在非细胞毒浓度下具有抗血管生成作用。     

人参皂甙Rg3抑制肿瘤新生血管形成的研究

目的 :探讨人参皂甙 Rg3抗肿瘤生长的作用机制。方法 :利用鸡胚绒毛尿囊膜 (CAM)观察 Rg3作用后肿瘤新生血管的生长情况 ,并采用 L ewis肺癌模型进一步探讨 Rg3在体内对肿瘤生长及肿瘤新生血管形成的影响。结果 :Rg3浓度为 0 .1和 0 .5 mm ol/L时 ,CAM血管生长抑制指数分别达 (6 2 .4± 9.3) %和 (4 5 .6± 5 .7) % ,与对照组相比差异非常显著 (P<0 .0 1)。对 L ewis肺癌荷瘤小鼠分别以 5、10、2 0 mg/kg的剂量隔日灌胃一次给予 Rg3,连续 10次 ,2 0 d后观察到 3组的肿瘤瘤质量分别为 (1.77± 0 .2 1)、(1.5 8± 0 .17)及 (1.2 2± 0 .2 9) g,与对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 1) ,生长抑制率分别为 2 3.0 4%、31.30 %和 47.10 % ,同时观察到 Rg3组的新生血管数也明显减少。 结论 :人参皂甙 Rg3可明显抑制 L ewis肺癌的生长 ,其抑瘤作用部分是因为抑制了肿瘤诱导的新生血管形成     

经皮穿刺微波凝固活体肺的实验研究

目的:探讨经皮微波凝固动物活体肺组织的范围、病理变化及安全性,为进一步应用于临床治疗提供依据。方法:CT引导下将微波辐射天线插入猪肺的不同位置,采用不同的辐射功率／时间组合进行凝固,观察凝同后CT表现。术后1周处死动物,取出肺组织,测量凝固灶的范围(最大径×垂直径),光镜下观察凝固灶病理变化。结果:60 W／5 min凝固灶均值为31．2 mm×22．3 mm,60 W／10 min为35．4 mm×25．2 mm;80 W／5 min为40．2 mm× 32．4mm,80W／10min为45．2mm×40．5mm。光镜下见凝固区出血性坏死,坏死区外围有水肿带、炎性细胞浸润等改变;术后CT扫描及处死动物中未见有气胸、血胸等并发症。结论:微波加热可使活体肺组织凝固达一定范围, 并发症轻微,说明该方法可用于肺癌的临床治疗     

5-Fu和α干扰素抗肿瘤血管形成协同效应的实验研究

目的: 研究fat-1基因在人乳腺癌细胞内的表达、功能及其对乳腺癌细胞增殖的影响.方法: 把fat-1 基因插入到腺病毒的穿梭载体中,与骨架载体同源重组,构建腺病毒重组载体 (Ad.GFP.fat1),将通过包装细胞系(293)产生的腺病毒感染人乳腺癌株QMR2细胞.提取细胞的总RNA,以fat-1的反义mRNA 作探针,用Northern Blot检测fat-1 基因在人乳腺癌株QMR2细胞内的表达.流式细胞仪分析n-3脂肪酸脱氢酶对人乳腺癌株QMR2细胞增殖的影响.气象色谱仪分析n-3脂肪酸脱氢酶对人乳腺癌株QMR2细胞的n-6 PUFAs/n-3 PUFAs含量影响.结果: fat-1 基因在人乳腺癌株QMR2细胞中能有效异源表达,2 d后检测到fat-1mRNA的条带.fat-1基因抑制了人乳腺癌株QMR2细胞的增殖,降低了20%(P<0.05);同时降低了人乳腺癌株QMR2细胞n-6 PUFAs/n-3 PUFAs含量降低.结论: 腺病毒介导的fat-1 基因能在人乳腺癌株QMR2细胞内有效异源表达,且抑制人乳腺癌株QMR2细胞的增殖.     

p27kip1高表达乳腺癌细胞株MCF-7基因表达谱的差异分析

目的:利用基因芯片技术筛选p27kip1转染乳腺癌MCF-7细胞的差异表达基因,探讨p27kip1调控肿瘤细胞增殖和细胞周期的分子机制。方法:将含p27cDNA的质粒在脂质体介导下体外转染乳腺癌MCF-7细胞,利用Affy-metrix公司的人类基因组基因芯片U133A分别检测表达p27kip1蛋白和空载体的乳腺癌细胞株的基因表达谱,用生物信息学软件进行比较分析,对差异表达基因进行功能分类。结果:在含22277个基因cDNA的芯片上差异表达的基因有1379条,其中表达谱发生明显变化(2倍以上)的基因173条,占总检测基因的0·78%。157条基因表达明显上升(SLR>1),占总检测基因的0·705%;16条基因表达明显下降(SLR<-1),占总检测基因的0·072%。基因表达差异主要集中在物质代谢、细胞增殖、细胞周期调控、细胞分化与凋亡、免疫反应、信号传导、蛋白转运、调节转录等方面。结论:多基因共同参与了p27kip1抑制肿瘤细胞过度增殖以及促进细胞凋亡的作用。对于p27kip1相关基因群的研究有助于认识p27kip1蛋白在细胞周期调控乃至整个细胞癌变过程中作用的分子机制。     

人参皂苷Rg3抗血管形成作用的实验研究

目的:探讨人参皂苷Rg3的抗血管形成作用.方法:原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测TNP-470(阳性对照)和人参皂苷Rg3对HUVEC增生的影响;采用改良鸡胚绒毛尿囊膜新生血管形成模型,将不同剂量人参皂苷Rg3和TNP-470(阳性对照)置于7天的鸡胚绒毛尿囊膜上,3天后观察新生血管形成是否被抑制.结果:TNP-470抑制HUVEC增生,人参皂苷Rg3对HUVEC增生无影响,二者都抑制鸡胚绒毛尿囊膜新生血管形成.结论:人参皂苷Rg3无细胞毒作用,但有抗血管形成作用.     

抗体介导的抗肿瘤血管治疗

肿瘤血管是实体肿瘤生长和转移的重要基础,是肿瘤治疗的新靶点。有研究表明,肿瘤血管内皮细胞异地表达一些抗原,这些抗原的抗体可介导针对肿瘤血管的靶向治疗。这种靶向治疗也针对肿瘤细胞本身抗原的靶向治疗相比有许多优势,动物实验研究表明,这种治疗对实体肿瘤有显著的破坏作用,且无严重毒副反应,有很好的临床应用前景。     

氟尿嘧啶抗血管生成作用的实验研究

目的：探讨氟尿嘧啶(5-FU)的抗血管生成作用。方法：以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)原代培养模型，MTT法测定5-FU对HUVEC增殖的影响；采用鸡胚尿囊膜血管形成模型(CAM模型)，观察5-FU对鸡胚尿囊膜新生血管的抑制作用。结果：5-FU在非细胞毒浓度下可在体外抑制HUVEC的增殖，在体内抑制鸡胚尿囊膜新生血管形成。结论：5-FU在非细胞毒浓度下具有抗血管生成作用。