星点设计-效应面法优化毛冬青分散片处方工艺

目的:优选毛冬青分散片的处方工艺,为毛冬青的临床应用提供新选择。方法:选择毛冬青醇提物为原料,采用单因素试验筛选填充剂、崩解剂及润湿剂;以崩解时限为因变量,采用星点设计-效应面法考察微晶纤维素(MCC)、交联聚维酮(PVPP)及羧甲基淀粉钠(CMS-Na)用量对毛冬青分散片处方工艺的影响。结果:最佳工艺条件为毛冬青醇提物40%,磷酸氢钙27%,18%MCC,9%PVPP,5%CMS-Na,0.2%三氯蔗糖,3%聚维酮,0.8%硬脂酸镁。崩解时限84.7 s,与预测值的偏差3.3%。结论:毛冬青分散片制备工艺简单、崩解时限短、制剂稳定性好,适合工业化生产。     

1型糖尿病患者甘精胰岛素治疗时空腹血清胰岛素水平的个体内变异度

对注射固定剂量甘精胰岛素的11例1型糖尿病患者，每个受试者连续3d清晨6：00空腹采血测定血清胰岛素水平，平均胰岛素浓度的变异度3．3％～41．5％（均值15．4％），变异度与甘精胰岛素剂量无显著相关。     

叠氮胸苷诱导人类慢性粒细胞白血病细胞株K562凋亡的研究

目的观察叠氮胸苷（AZT）对人类慢性粒细胞白血病细胞株K562增殖的抑制作用,探讨其治疗白血病的可行性。方法以不同浓度AZT处理K562细胞,用四氮甲唑蓝实验测定AZT作用于细胞株48 h的IC50,瑞氏染色观察细胞凋亡形态学变化,流式细胞仪检测细胞周期变化,Annexin-V/PI双染法分析细胞凋亡比例。结果AZT对K562细胞株有明显增殖抑制作用,且抑制作用呈时间与浓度依赖性增长;AZT处理48 h后可见细胞凋亡形态学变化及白血病细胞株S期比例增大;Annexin V/PI双染法显示早期凋亡细胞比例增大。结论AZT有诱导白血病细胞凋亡的作用。     

干扰素用于80例小儿手足口病效果观察

2007年1月～2009年5月,我们对80例手足口病患儿采用干扰索肌注治疗,效果满意。现报告如下。     

局部注射与静脉自控镇痛对DHS术后镇痛效果的比较

目的研究股骨粗隆间骨折DHS术中向切口周围注射混合镇痛液的疗效。方法60例行股骨粗隆间骨折DHS术的患者随机分成两组各30例,注射组术中切口周围注射混合镇痛药,对照组术中不注射任何药物,两组均在术后48h内使用自控静脉镇痛,术后于不同时间点分别记录自控静脉镇痛的用岢,采用视觉模拟疼痛量表评估患者疼痛程度。结果注射组在术后各时段自控静脉镇痛使用量和48h内自控静脉镇痛使用总量比对照组明显少（P〈O．05）。与对照组相比,注射组在术后2、6、10、12、24、36、48h的静息状态视觉模拟疼痛量表评分和24、36、48h活动状态下的视觉模拟评分量表评分明显低（P〈O．05）;两组患者在术后3、7、15d静息和活动状态下的视觉模拟疼痛量表评分没有统计学差异。结论股骨粗隆间骨折患者在DHS术中向切口周围注射混合镇痛液,术后早期可有效缓解疼痛并减少阿片类药物的用量。     

葡萄糖激酶基因E339K突变的功能学研究

Objective To explore the molecular mechanisms of glucokinase (GCK) E339K mutation resulting in maturity-onset diabetes of the young-2 (MODY2).Methods Fasting plasma glucose (FPG), oral glucose tolerance test (OGTT) overload 2 h glucose (2hPG), glycosylated hemoglobin Alc (HbAlc) and fasting insulin (FIns) level were measured, respectively.Mutant glutathione S-transferase (GST)-GCK-cDNA was constructed with site-directed mutagenesis.Wild type and mutant GCK protein expressed in E.Coli were purified with affinity chromatography.Enzymatic kinetics and thermal stability were tested with enzyme-coupled analysis.Results Compared with non-mutants, mutants had higher FPG [(6.92 ± 0.95) mmol/L vs (4.70 ± 0.35) mmol/L, P＜0.001], 2hPG [(9.00 ± 1.49 ) mmol/L vs (5.51 ± 0.86) mmol/L,P＜0.001],HbAlc[(6.46 ± 0.69)% vs(4.83 ± 0.30)%,P＜0.01],and lower FIns level [(6.15 ± 1.97 ) mIU/L vs ( 10.79 ± 4.93 ) mIU/L, P ＜ 0.01], HOMA-β (34.16 ±3.62 vs 172.53 ± 76.58, P ＜ 0.001 ).This mutation induced lower protein yield [( 12.7 ±1.72) mg/L vs ( 16.2 ± 2.65 ) mg/L, P ＜ 0.01], lower appetency for glucose [S0.5: ( 13.96 ± 1.89)mmol/L vs (5.92±0.99)mmol/L, P＜0.001] and ATP [Km:(3.27 ±1.14) mmol/L vs (0.30±0.09)mmol/L, P＜0.001], lower catalytic ability [Kcat:(1.62 ±0.35)/s vs (25.18 ±2.10)/s, P＜0.001].It also showed protein thermal instability.Conclusion Glucokinase gene E339K mutation promotes the development of MODY2 by affecting protein yield and protein stability as well as the enzymatic kinetics of GCK.     

四乙酰葛根素在大鼠小肠中吸收特性的研究

中药新药与临床药理2010,(5):456-458目的:考察四乙酰葛根素(4ac)在大鼠小肠中的吸收情况。方法:采用大鼠在体小肠单向灌流模型,通过HPLC法测定出口处灌注液中4ac的浓度     

连续培养猪牙乳头细胞的免疫组化分析

目的探讨连续培养的牙乳头细胞的功能学特征。方法连续培养钟状期猪牙乳头细胞,应用间接法免疫组化检测各代细胞的牙本质涎蛋白（DSP）、核心结合因子1（Cbfa1）、Ⅰ型胶原（ColⅠ）、Ⅲ型胶原（ColⅢ）、骨桥蛋白（OPN）、骨粘蛋白（ON）、骨钙蛋白（OCN）等的表达情况,并以第4代猪骨髓基质细胞及人成纤维细胞作为对照组。结果免疫组化结果可见连续培养的各代猪牙乳头细胞均表达DSP、ColⅠ及ON,所有各代猪牙乳头细胞均未见OCN表达,ColⅢ只在第1代的少量细胞中有表达,Cbfa1及OPN在各代细胞中均有表达。结论体外培养的猪牙乳头细胞具有旺盛的分泌能力,可能具有形成钙化组织的潜能和形成牙本质样结构的可能性。     

Role of apoptosis and autophagy in the control of cell proliferation in dentate gyrus after hippocampal lesion

研究背景：很多病理情况下都可以引起神经发生（新的神经元产生）,新生细胞的命运和这些疾病的预后有着直接的关系。实验证明脑损伤往往导致海马齿状回神经发生区细胞增殖的增加,新生细胞的数量随着时间的推移逐渐减少,但是新生细胞减少的原因尚不知。阐明这些新生细胞的命运将增加对脑损伤病理过程和治疗手段的理解。 目的：本文研究凋亡和自噬这两种程序性细胞死亡在海马损伤诱导的海马齿状回细胞增殖后新生细胞减少中的作用。 设计、时间和设定：海马齿状回细胞增殖的动物实验于2008年2月至2009年3月在苏州大学医学部神经生物学系进行。 材料：成年雄性SD大鼠通过微量注射海人酸(购自美国Sigma公司)建立海马损伤模型。 方法：5-溴脱氧嘧啶核苷（BrdU）用于标记增殖细胞,海马损伤后齿状回的不同时间点BrdU阳性细胞用免疫组织化学方法鉴定,阳性细胞的数量采用无偏差体视学(Stereology)方法进行定量。凋亡相关蛋白caspase-3、Bcl-2、p53和自噬相关蛋白LC3、Beclin1通过免疫荧光和蛋白质印迹(Western blot）的方法进行检测。 主要结果检测：凋亡和自噬的检测,是在海马损伤后不同时间点,在激光共聚焦显微镜下观察BrdU阳性细胞共表达BrdU/caspase-3、BrdU/LC3和BrdU/Beclin 1。同时, 还用Western blot的方法检测齿状回凋亡相关蛋白和自噬相关蛋白的改变。 结果：定量分析显示海马损伤组在连续3天注射BrdU后的第1天有最多的BrdU阳性细胞,BrdU阳性细胞随着时间的推移逐渐减少。海马颗粒细胞层和门区发现BrdU/cleaved caspase-3双标细胞,海马损伤后的各个时间点未发现BrdU/LC3、BrdU/Beclin 1双标细胞。但Western blot结果显示海马损伤后LC3Ⅱ、Beclin 1、p53的表达上调,pro-caspase-3和Bcl-2的表达下调。 结论：成年大鼠海马损伤后能导致齿状回显著的细胞增殖,这些增殖细胞随着时间的推移逐渐减少,凋亡和自噬可能参与海马损伤后增殖细胞的减少。     

血清Cystatin C与乙型肝炎的关系

目的探讨血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cystatin C）与乙型肝炎的关系。方法用颗粒增强透射免疫比浊法检测97例乙型肝炎患者及25例健康志愿者的血清Cystatin C水平,同时测其血清HBV-DNA（定量）、ALT、AST、TBIL、PT以及透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PⅢP）、Ⅳ型胶原（CL-Ⅳ）、层粘连蛋白（LN）等。分析血清Cystatin C与临床类型及HBV-DNA、HBV-M、肝纤维化血清学指标间的关系。结果血清Cystatin C水平在不同临床类型的乙型肝炎间差异无统计学意义;Cystatin C与HBV-DNA（定量）、ALT、AST、TBIL、PT以及血清纤维化指标等不相关。结论血清Cystatin C与乙型肝炎的临床类型不相关。