趋化因子CCL3、CCL4在儿童免疫性血小板减少症中的表达及临床意义

目的 探讨趋化因子CCL 3、CCL 4在儿童免疫性血小板减少症(ITP)中的表达及其临床意义.方法 选择2019年12月至2020年4月住院确诊的ITP患儿为研究对象,根据病程分为新诊断组(n=37,病程≤3个月)和非新诊断组(n=27,病程>3个月),根据采集标本时机(初诊及入院治疗7天时)分为治疗前组(n=29)...     

肾气丸联合厄贝沙坦治疗IgA肾病患者42例的临床报道

IgA肾病是我国最常见的慢性肾脏病和终末期肾病的主要疾病之一.在我国约占原发性肾小球疾病的35%～55%.IgA肾病多呈慢性进行性发展,每10年有5%~25%的患者进入终末期肾病[1,2].因此,采用有效的干预措施延缓IgA肾病进展到尿毒症具有重要的社会及经济意义,近年来我们采用肾气丸联合厄贝沙坦治疗IgA肾病取得了较好的效果,现报告如下.     

延迟脐带结扎对极早产儿临床结局影响的研究

目的:探讨出生延迟脐带结扎(delayed cord clamping,DCC)(娩出后60 s及以上结扎脐带)对极早产儿(孕周＜32周)疾病的影响分析.方法:回顾性分析2017至2019年100例极早产儿的病例临床资料,试验组为50例延迟脐带结扎的极早产儿,对照组为50例按照临床立即脐带结扎(immediate cord clamping,ICC)(娩出后15 s内结扎脐带)的极早产儿.比较2组极早产儿生后24h及2周的血红蛋白(hemoglobin,HB)及红细胞压积(hematocrit,HCT)水平,比较生后2周2组极早产儿的贫血发生率及在住院期间需要输血治疗的情况,2组在新生儿坏死性小肠结肠炎(neonatal necrotizing enterocolitis,NEC)、新生儿高胆红素血症、脑室周围-脑室内出血(periventricular-intraventricular hemorrhage,PVH-IVH)、新生儿红细胞增多症的发生率.结果:生后24h及2周,试验组HB高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).生后24 h HCT比较无统计学差异.但生后2周HCT比较,DCC组高于ICC组,且有统计学差异(P＜0.05).2组的贫血发生率、输血率及PVH-IVH发生率比较均有统计学差异(P＜0.05),但2组在新生儿红细胞增多症、NEC、新生儿高胆红素血症发生率上均无统计学差异.结论:DCC可以在住院期间降低早产儿贫血发生率、输血概率及新生儿颅内出血发生率.     

RNAi沉默EGFR基因在卵巢癌裸鼠移植瘤的成瘤抑制作用

目的:探讨应用RNA干扰技术沉默EGFR基因对卵巢癌SKOV3细胞成瘤力的抑制作用.方法:构建针对EGFR序列特异性dsRNA的表达载体,用脂质体转染SKOV3细胞及G418筛选阳性克隆.建立裸鼠移植瘤模型,分为阳性干扰组、阴性对照组、空白对照组.监测瘤体积,测量瘤质量,采用RT-PCR、Western Blot、免疫组化检测移植瘤EGFR基因的表达.结果:阳性干扰组成瘤力明显降低,EGFR mRNA和蛋白的抑制率分别为78.8%和76.4%.结论:动物实验证实RNAi沉默EGFR基因可明显抑制卵巢癌的成瘤力.     

肝星状细胞具有向肝细胞样细胞分化的干细胞潜能

目的 探讨肝星状细胞是否能体外诱导分化为肝细胞样细胞以及在这过程中某些干细胞标记物的表达和变化.方法 采用标准胶原酶灌注联合percoll密度梯度离心法提取并纯化原代大鼠肝星状细胞,免疫荧光鉴定细胞表型;将原代肝星状细胞分为对照组和实验组进行体外培养,对照组肝星状细胞不加任何细胞因子培养24 h,实验组肝星状细胞加入bFGF 20 μg/L、FGF420 μg/L、HGF 20μg/L、IL-6 1μg/L细胞因子诱导7d;倒置相差显微镜下观察诱导细胞形态的变化,Real-time PCR和细胞免疫荧光技术检测肝星状细胞诱导前后肝细胞ALB、AFP mRNA和蛋白的表达情况,以及诱导前后干细胞标记物mRNA和蛋白水平的表达及变化.结果 ①通过胶原酶灌注联合percoll密度梯度离心法获得的大鼠肝星状细胞,其特异性蛋白Desmin和GFAP表达阳性率≥95％.②实验组大鼠肝星状细胞经过bFGF、FGF4、HGF、IL-6等细胞因子诱导7d后,与对照组细胞相比细胞形态由星形变为类圆形或多角形,转录水平出现肝细胞特异性标记物ALB的表达(P＜0.01)和AFP的表达(P＜0.05),同时实验组ALB和AFP蛋白表达呈阳性,而对照组则呈阴性.③实验组大鼠肝星状细胞经过bFGF、FGF4、HGF、IL-6等细胞因子诱导7d后,与对照组相比干细胞标记物P75NTR转录水平表达下降(P＜0.05),CD90、c-kit、sox-2、oct-4等转录水平表达显著下降(P＜0.01),并伴有干细胞标记物蛋白水平的表达下调或无表达.结论 初步证明肝星状细胞可能具有潜在的干细胞特性,在体外可诱导分化形成肝细胞样细胞,在诱导过程中肝星状细胞的干细胞标记物明显下调.     

RNA干扰技术在卵巢癌研究中的进展

恶性肿瘤是一种基因组疾病,其特征是原癌基因的启动、抑癌基因的失活、凋亡相关基因的异常表达及部分自分泌生长因子和受体的过量表达.随着肿瘤发病机制的不断深入研究,使治疗从手术、化疗以及放疗逐渐扩大到分子水平的基因治疗.基因治疗是利用生物或非生物的方法,将特定基因封闭抑制或启动来达到治疗目的.目前,RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)的研究已经取得了一些开拓性的进展,并有望在恶性肿瘤治疗中发挥独特的作用.本文对RNAi的作用机制、特征及其在卵巢癌治疗中的研究进行综述.     

Clusterin基因沉默对卵巢癌SKOV3细胞增殖与侵袭的影响

目的通过RNA干扰技术抑制卵巢癌SKOV3细胞分泌型clusterin(sCLU)基因的表达,研究其对卵巢癌细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法通过脂质体介导靶向sCLU基因的siRNA转染卵巢癌SKOV3细胞,实验分为4组:实验组(sCLU-siRNA+脂质体)、阴性对照组Ⅰ(negative control siRNA+脂质体)、阴性对照组Ⅱ(sCLU-siRNA)、空白对照组(等体积的完全培养液)。RT-PCR和蛋白质印迹分析法检测sCLU表达;利用MTT法、Transwell小室体外侵袭实验及流式细胞仪AnnexinⅤ/PI法检测评价sCLU基因抑制后对卵巢癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。结果靶向sCLU基因的siRNA明显、特异性地抑制了sCLU mRNA和蛋白的表达水平;MTT实验结果显示实验组细胞增殖能力较各对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪AnnexinⅤ/PI法检测结果显示实验组细胞凋亡率较各对照组明显升高,达到(15.84±1.53)%,较空白对照组升高了约9%,差异有统计学意义(P<0.01)。侵袭实验结果提示实验组细胞侵袭能力受到明显抑制,实验组穿膜细胞数量为(26.52±6.22)个/视野,较各对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 sCLU基因沉默明显抑制了卵巢癌SKOV3细胞的增殖、侵袭能力,并增加了其凋亡率,sCLU基因有望成为卵巢癌治疗的新靶点。     

舒胃汤对功能性消化不良大鼠胃排空、胃动素和P物质表达的影响

目的观察舒胃汤对功能性消化不良（FD）大鼠胃排空、胃动素（MTL）和P物质（SP）表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法采用不规则喂养配合夹尾刺激法制作大鼠FD模型,随机分成对照组、模型组、舒胃汤高剂量组、舒胃汤低剂量组、多潘立酮组、木香顺气组六组,连续给药14 d后,用放射免疫法检测血浆SP水平,免疫组化法检测胃窦MTL阳性表达,以酚红法观察胃排空。结果与对照组相比,模型组胃排空和血浆SP水平显著降低,胃窦组织MTL阳性表达显著降低,差异均有统计学意义（P〈0.05）;与模型组相比,舒胃汤高剂量组、木香顺气组及多潘立酮组胃排空和SP水平、MTL表达显著升高,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论舒胃汤可能通过提高MTL表达、SP水平来促进胃排空,是其治疗FD的作用机制之一。     

介绍一种呼气隔离消毒简易装置

在临床护理中,因呼吸道传染病人的飞沫及随呼气而带出的致病微生物对医务人员的危害日显严重.