外加电场对实验性大鼠脊髓损伤作用的研究

目的:探讨脊髓损伤后外加电场(electric fields,EF)对脊髓血流量(spinal cord blod flow,SCBF)及神经功能的影响。方法:Wistar大鼠20只,随机分为对照组(CON组)和EF治疗组(EF组)。Allen's打击法50 gcm(5 g×10 m)致伤大鼠L1～L2段脊髓,给予EF治疗,于伤前、伤后即刻、1、3、6、24 h分别记录T12段脊髓血流量、脊髓感觉诱发电位。术后7、14天行联合行为评分(CBS)。结果:与盐水对照组比较,应用EF后,大鼠SCBF、SEP明显优于CON组(P<0.05)。结论:EF能有效改善损伤早期脊髓微循环,保护脊髓神经功能。     

联合抑制PI3K和MEK的活性可协同抑制顺铂耐药卵巢癌细胞的增殖

目的研究磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂LY294002联合丝裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)特异性抑制剂AZD6244对顺铂耐药卵巢癌细胞株(SKOV3/DDP)增殖的影响。方法 (5、10、20、40、80)μmol/L LY294002、(1、2、4、8、16)μmol/L AZD6244单独及联合作用于SKOV3/DDP细胞,MTT法检测对细胞增殖的影响,计算半数抑制浓度(IC50)及合用指数(CI);根据结果确定联合用药的浓度,将实验分为对照组、LY294002组(5μmol/L)、AZD6244组(7μmol/L)及联合组(LY294002 5μmol/L+AZD6244 7μmol/L);作用48 h后,采用MTT法确定细胞生长曲线,计算细胞倍增时间;平板克隆检测集落形成能力;annexinⅤ-PE/7-ADD染色结合流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,并测定细胞周期;Western blot法检测细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化的ERK1/2(p-ERK1/2)、AKT、磷酸化的AKT(p-AKT)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)及激活型caspase-3蛋白的水平。结果 LY294002及AZD6244均可抑制SKOV3/DDP细胞增殖,两药联合作用IC50明显降低,此时CI1,具有协同作用;联合组细胞的生长速度较单独作用组及对照组慢;倍增时间延长;集落形成数减少(P0.01);FCM显示联合组凋亡率增高,阻滞于G1期的细胞增多,S期明显减少(P0.05);Western blot结果显示,AKT、ERK1/2蛋白表达水平在各组间无明显差异(P0.05);LY294002组p-AKT水平降低,p-ERK水平增高;AZD6244组p-ERK水平降低,p-AKT水平增高;联合组p-AKT、p-ERK水平均降低,cyclin D1表达较其余各组低,激活型caspase-3较其余各组高。结论 PI3K抑制剂LY294002联合MEK抑制剂AZD6244通过促进细胞凋亡及阻滞细胞周期进展协同抑制SKOV3/DDP细胞生长。     

塞来昔布联合替吉奥对胃癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 研究选择性环氧化酶-2抑制剂塞来昔布联合替吉奥对胃癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及可能机制.方法 建立胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,成瘤后将裸鼠随机分为阴性对照组、塞来昔布组、替吉奥组、塞来昔布联合替吉奥组,连续给药21 d后,取材,测量肿瘤体积、计算抑瘤率,TUNEL检测肿瘤组织的凋亡率,免疫组化检测各组PCNA、Bcl-2、caspase-3的表达情况.结果 塞来昔布组、替吉奥组、联合给药组的抑瘤率分别为30.8％、50.1％、78.8％.各干预组较对照组凋亡率明显增加(P＜0.01),联合给药组较单药组凋亡率明显增加(P＜0.01).各干预组PCNA、Bcl-2的表达较对照组明显降低(P＜0.01),联合给药组较单药组明显降低(P＜0.05).各干预组caspase-3的表达较对照组明显升高(P＜0.05),联合给药组表达较单药组明显升高(P＜0.01).结论 塞来昔布、替吉奥均有明显的抗肿瘤作用,二者联合表现为协同作用,可能是抑制肿瘤细胞的增殖、促进凋亡所致.     

AMC及 ALC与侵袭性B细胞淋巴瘤低危患者的预后关系分析

目的：探讨外周血单核细胞绝对计数（AMC）及淋巴细胞绝对计数（ALC）与侵袭性B细胞淋巴瘤低危患者预后的相关性。方法回顾性分析了2003～2013年42例初发侵袭性B细胞淋巴瘤低危患者的AMC、ALC及淋巴细胞／单核细胞比值（LMR）与患者各项临床指标、无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）的相关性。结果据ROC曲线划分AMC、ALC、LMR对5年OS影响的界限值分别为475／mm3、1005／mm3和2．1。AMC≥475／mm3、ALC＜1005／mm3是 PFS的独立不良因素（RR＝4．271、3．023;P＝0．01、0．39）;AMC≥475／mm3是OS的独立不良因素（RR＝4．680;P＜0．01）。结论初发时高AMC、低ALC患者预后较差。推测外周血AMC、ALC可能成为侵袭性B细胞淋巴瘤低危患者进一步分层的预后指标。     

缺锌对大鼠肠粘膜抗体产生影响的实验研究

缺锌对大鼠肠粘膜抗体产生影响的实验研究罗治彬，吴嘉惠锌是机体必需微量元素之一，严重锌缺乏可导致生长发育不良和免疫力下降，甚至发生反复感染，临床上缺锌儿童胃肠功能紊乱、反复感染且经久不愈的实例较为常见［１］，但其机制尚不明确。本文对大鼠肠道粘膜ＩｇＡ的...     

过量锌对大鼠小肠粘膜sIgA免疫的影响

锌是机体必需的微量元素之一。研究表明，严重高锌可引起机体生物合成、中枢免疫系统的结构和功能严重受损，导致机体生长发育不良和免疫力下降，甚至发生反复感染［１］。本文通过建立常锌（ＺＮ）与过量锌（ＺＥ）大鼠模型，对大鼠肠道粘膜ｓＩｇＡ的表达做了定位和定量...     

麦冬皂苷D对小鼠放射性肺损伤的防护作用及机制

目的探索麦冬皂苷D对小鼠放射性肺损伤的防护作用及其机制。方法 60只C57BL/6雌性小鼠按随机抽样法分为4组:健康对照组、单纯照射组、照射+麦冬皂苷D组、照射+地塞米松组, 每组15只。用6 MV X射线15 Gy单次照射小鼠。于照射前3 d开始, 照射+麦冬皂苷D组给予10 mg/kg麦冬皂苷D溶液腹腔注射, 照射+地塞米松组给予10 mg/kg地塞米松溶液腹腔注射, 健康对照组和单纯照射组给予生理盐水腹腔注射, 每日1次, 至照后1周。于照射后3 d、1周、6周取材, 苏木精-伊红(HE)染色法和Masson染色法观察肺组织病理学变化, 免疫组织化学法观察8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、p53、p53上调凋亡因子(PUMA)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、Ⅰ型胶原纤维(Collagen Ⅰ)、Ⅲ型胶原纤维(Collagen Ⅲ)表达, 蛋白提取及免疫印迹实验(Western blot)法进一步验证凋亡相关蛋白p53、PUMA、Caspase-3的表达, 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测转化生长因子β1(TGF-β1)和白介素6(IL-6)的表达。结果照后...     

幽门螺杆菌工程疫苗研究进展

幽门螺杆菌 (Ｈ .ｐｙｌｏｒｉ)是慢性胃炎、消化性溃疡及胃肠道淋巴瘤的主要致病因素 ,并与胃癌发生密切相关 ,ＷＨＯ将其列为第一级致癌物质。流行病学调查表明 ,我国是胃癌的高发区及Ｈ .ｐｙｌｏｒｉ高感染区 (2 1%～ 93% ) ,已对人民健康造成重大危害。尽管抗生素治疗在Ｈ .ｐｙｌｏｒｉ相关性疾病治疗方面取得了较大进展 ,但其毒副作用明显 ,疗效不稳定 ,费用高昂 ,难以解决其复发问题。人类与病原微生物长期斗争的历史表明 ,有效控制和彻底消灭某种传染病的最佳途径是疫苗接种 ,Ｈ .ｐｙｌｏｒｉ疫苗接种将是预防Ｈ .ｐｙｌｏｒｉ感…     

miR-451对结肠癌细胞系SW620生物学行为的影响

目的探讨miR-451对结直肠癌细胞SW620增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法将SW620细胞分为4组:miR-451模拟物(miR-451 mi mics)转染组(细胞转染miR-451 mi mics,终浓度100nmol/L),NC组(细胞转染miRNA阴性对照,终浓度100nmol/L),空白转染组(加入与前2组等量的Lipofectamine 2000,无miRNA片段),对照组(细胞常规培养,不加入Lipofectamine 2000和miR-NA片段)。应用荧光定量RT-PCR检测转染24h后miR-451表达量的改变,采用CCK-8试剂盒检测转染24、48、72h后细胞的增殖能力,流式细胞仪检测转染48h后细胞凋亡情况,Transwell侵袭实验检测转染24h后细胞侵袭能力的改变,细胞免疫荧光和Westernblotting检测转染48h后巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)的表达情况。结果转染后24h,荧光定量RT-PCR检测结果显示,miR-451mi mics转染组的miR-451表达量(67.96±13.33)较NC组(以其miR-451表达量作为1)显著上调(P<0.01)。与另外3组比较,miR-451 mi mics转染组细胞增殖能力在转染后48、72h明显受抑(P<0.01),但转染后48h其细胞凋亡率无明显改变(P>0.05)。转染后48h,miR-451 mi mics转染组、NC组、空白转染组、对照组中MIF蛋白表达阳性细胞的比例分别为23.9%±14.9%、53.5%±14.1%、45.2%±19.8%、59.3%±22.2%,统计学分析显示miR-451 mi mics转染组与其他3组比较差异显著(F=7.356,P<0.01)。Transwell侵袭实验显示,miR-451 mi mics转染组侵袭细胞数(37.4±6.1个/视野)明显低于对照组(61.6±8.6个/视野)、NC组(55.6±3.6个/视野)、空白转染组(60.8±7.4个/视野,P均<0.01)。结论上调miR-451表达可抑制结直肠癌细胞的生物活性,该作用可能与抑制MIF表达有关。