二乙基亚硝胺所诱导大鼠肝癌表达上调的基因

目的:首次大范围地观察二乙基亚硝胺(DEN)诱导的大鼠肝癌组织基因表达的差异,探索DEN诱发肝癌的分子机制.方法:DEN诱导大鼠肝癌,常规抽提和纯化RNA,采用AffymetrixRat230AGeneChip及技术比较肝癌组织与正常大鼠肝组织基因表达的差异.结果:在芯片的15710个基因中,肝癌有84.54%的基因阳性表达,肝癌基因表达在正常肝脏5倍以上的有509个,其中325个为EST片段,已知基因184个,其中的168个基因可以检索到有关文献的报道.在这168个基因中,有100个基因被发现与肿瘤有关,其中有36个与肝癌有关;有4个基因与肝脏有关;另有64个基因与肿瘤和肝脏无关.结论:?DEN诱发大鼠肝癌的后基因组变化中168个基因值得优先关注.     

《中医学综合实验》PBL的设计与实施

目的:探索在《中医学综合实验》课程中开展PBL教学。方法:依据课程教学目的,确立PBL具体教学目标,选择我国常见病临床经验总结到动物实验相互衔接的3个案例,分4个单元小班PBL教学;在课程结束之际开展评价及学生无记名填写调查问卷。结果:连续3年开展了PBL教学,共计有232名学生参加,每年平行开设的4个PBL班均顺利完成教学任务。调查表明,学生对PBL教学的形式和内容给予了充分的肯定,赞同本课程PBL形式和内容者占90%、认为有助于培养知识交叉渗透和融会贯通者占95%、认为有助于激发好奇心和调动其主观能动性者占93%、认为有助于培养创造能力者占84%,达到了教学目的。结论:本课程PBL教学设计与实施是可行的,对于提高实验中医学课程体系的教学质量,加强中医药人才科研素质与能力等的培养是有益的。     

不同气虚证小鼠甲状腺G蛋白通路及相关基因转录特征

目的:观察不同气虚证小鼠甲状腺G蛋白信号通路及功能激素基因表达的特征。方法:采用小鼠计量化四诊和辨证方法,以及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,观察正常小鼠、肿瘤气虚证荷瘤小鼠甲状腺G蛋白信号通路及相关基因表达特征。结果:不同气虚小鼠垂体TSH与甲状腺TSH受体(TSHR)表达量均增加,但正常气虚证小鼠甲状腺G蛋白通路的腺苷酸环化酶(AC)和蛋白激酶A(PKA)未见相应的表达量增加;而肿瘤气虚证小鼠则相应增加、活跃,发生响应,Ras基因亦如是。结论:正常气虚小鼠甲状腺G蛋白通路中大多基因表达不活跃可能是其部分物质基础,而荷瘤小鼠气虚证系因实致虚,因此表现与正常气虚证不同,即甲状腺尚处于代偿状态。     

中医不同治法对相关Cyclins及CDK4在大鼠肝癌中表达的影响

目的：观察细胞周期相关蛋白（Cyclins）及周期蛋白依赖激酶4（CDK4）在二乙基亚硝胺（DEN）诱发大鼠肝癌组织中的表达,及不同中医治法对其表达的调节作用。方法：采用DEN诱发大鼠肝癌,随机分为正常组、模型组、喃氟啶组、抑癌扶正行气活血治法组、清热解毒治法组、行气活血治法组、健脾扶正治法组,应用Affynletrix Rat230A GeneChip及相关技术检测各组肝脏（含肝癌）细胞周期调控因子表达。结果：Rat230A芯片中有6个Cyclins（CyclinB1、CyclinB2、CyclinD1、CyclinD2、CyclinD3、CyclinE）和CDK4,与正常肝组织比较,6个Cyclins及CDK4在肝癌组织中过表达,不同中医治法对其有一定的下调作用。结论：Cyclins及CDK4基因在大鼠肝癌中的表达有一定意义;中医不同治法治疗大鼠肝癌的部分机制可能与抑制细胞周期调控基因过表达有关。     

气虚小鼠脾脏B细胞受体信号通路基因差异表达特征

目的：揭示昆明种气虚小鼠脾脏免疫相关通路基因差异转录的特征。方法：运用小鼠计量化四诊及辨证方法,采用Affymetrix GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,在正常昆明种小鼠中筛选气虚证者,与正常无气虚证小鼠对照,检测其脾脏B细胞受体信号传导通路基因表达差异。结果：气虚证小鼠脾脏B细胞受体信号传导通路相关基因出现了不同程度的紊乱与下调。结论：气虚证小鼠,B细胞受体信号传导通路相对表达量整体呈下调趋势,提示该通路总体处于机能低下的状态。     

细胞色素超家族基因在DEN诱发大鼠肝癌过程中的表达特征

[目的]探讨细胞色素基因在肝癌发生过程中表达的特征。[方法]对正常大鼠肝组织以及DEN诱癌后大鼠第4周、8周、16周、20周（肝癌形成）含肝癌组织Affymetrix Rat 230A GeneChip芯片所检测数据标准化处理后，进行差异分析。[结果]从芯片中共筛选出与细胞色素有关的基因81个，其中已知的细胞色素超家族成员58个，包括40个细胞色素P450（Cyp）基因家族成员和11个细胞色素C氧化酶（cytochrome c oxidase，Cox）基因家族成员，以及7个其它成员；其次，在整个DEN诱癌过程中，表达有显著性变化的细胞色素基因有19个，包括9个明显上调的基因和10个明显下调的基因。[结论]细胞色素、尤其是细胞色素P450家族成员可能在大鼠肝癌发生过程发挥重要作用，值得注意的是Cypla1、Cypla2、Cyp3a3、Cyp4bl和Cyp27bl等人类癌症相关基因．以及Cyp26al、Cyba和CoxVa等人类共有基因．变化显著．可能有助于对人类肝癌发生过程的研究及肝癌的诊治。     

动物证候模型四诊信息客观化与中药药性评价的相关性研究

中药的寒热温凉属性,主要是从药物作用于正常机体所直接产生的不同证候反应或对疾病证候的改变中总结出来的。由此可见,药物寒热温凉属性的研究,常常离不开对机体证候的观察。文章研究认为,由于在以往的药性评价过程中,未充分认识到证候客观化的重要性,从而导致药性客观性评价的困难。因此,加强动物证候模型四诊信息客观化与中药药性评价的相关性研究,对于推动中药药性的客观化研究,以及拓展和丰富以辨证论治为特色的中医药基础理论与方法,具有一定的理论价值和应用前景。     

清热、活血、健脾等不同中医治法对癌基因ras转录调节的实验研究

目的:研究原发性肝癌中清热解毒、活血化瘀、健脾理气等常用不同中医治法对大鼠肝癌的作用机理及其差异.方法:采用二乙基亚硝胺(DEN)水溶液诱发大鼠肝癌模型,分别观察这些不同治法对肝癌大鼠肝组织AFP及三个Ras基因的转录调节作用.结果:(1)不同治法能够针对性地调节癌基因Ras的转录水平,其中清热解毒法和活血化瘀法对N-ras基因、健脾理气法对H-ras和K-ras基因的转录水平都有显著的下调作用;(2)不同治法对大鼠肝组织AFP基因转录有不同程度的下调作用,其中,清热解毒法作用最强.结论:不同中医治法能够不同程度地调节肝癌发生发展过程中一些重要癌基因的转录,并且这些治法有着明显的作用选择性,其中清热解毒法、活血化瘀法对肿瘤的直接抑制作用较好,而健脾理气法可能对肿瘤的转移与复发有效.     

补肾定喘汤对哮喘大鼠血CORT、下丘脑CRHmRNA表达的影响

目的：探讨哮喘大鼠CRHmRNA(促肾上腺皮质激素释放激素信使核糖核酸)、血浆CORT(皮质酮)变化及补肾定喘汤(鹿角、肉苁蓉、巴戟天、熟地等)对它们的作用。方法：采用放射免疫、半定量RT—PCR(逆转录-聚合酶链反应)技术，分别观察血浆CORT、下丘脑CRHmRNA水平的变化。结果：哮喘大鼠血浆CORT水平降低(P＜0．01)，下丘脑CRHmRNA水平明显降低。补肾定喘汤治疗能明显促进CRH基因表达，升高血浆CORT水平。结论：哮喘模型大鼠存在着HPA轴抑制，补肾定喘汤能有效地保护和提高受抑的HPA轴的功能。结果：初步探讨了补肾定喘汤的作用机制。