防治阿尔茨海默病多靶点药物研究进展

阿尔茨海默病(AD)是一种复杂的神经退行性疾病,临床上用于AD治疗的药物均为单靶点药物.但AD可引起全身性病理变化,其发病过程涉及多种调控因子和调控网络且囊括多种疾病假说.因此,对于AD的治疗策略目前更倾向于多靶点治疗.本文将近期报道的各类多靶点AD防治药物及化合物区分为单一化学实体多靶点药物、多组分药物和联合用药3类,分别对其研究进展进行综述.     

以β-分泌酶为靶标的阿尔采末病防治药物研发进展

β-分泌酶作为β-淀粉样蛋白产生的限速酶,被认为是治疗阿尔采末病的靶标之一。抑制β-分泌酶的活性可以降低阿尔采末病关键致病因素β-淀粉样蛋白的生成,阻止β-淀粉样蛋白有害级联反应,从而达到治疗阿尔采末病的目的。目前以β-分泌酶为靶标防治阿尔采末病的药物研发主要有以下几类:一是包括肽类、拟肽类和化学小分子在内的化学药,二是中药和天然产物,另外还有诸如抗体和核酸的生物制剂。该文对以β-分泌酶为靶标的药物研发进展进行了综述。     

细叶远志皂苷治疗痴呆的研究进展

细叶远志皂苷是远志的主要成分之一,常作为远志及其炮制品质量控制的重要指标。痴呆是一种较严重的、持续性的认知障碍,患病人数在全球不断攀升,给家庭和社会带来了巨大的经济痛苦和精神压力。目前上市的胆碱酯酶抑制剂等药物仅能缓解痴呆的症状,且存在一定的不良反应。研究发现,细叶远志皂苷有显著地改善认知障碍和学习记忆的功效,有望成为治疗痴呆的潜在药物。细叶远志皂苷可以通过多种机制有效对抗神经退行性病变产生的淀粉样β蛋白沉积、乙酰胆碱减少、神经炎症、细胞氧化损伤、神经细胞凋亡,对多种类型痴呆均有作用。另外,细叶远志皂苷可以迅速吸收入血,主要分布于肝脏和肾脏,且可以透过血脑屏障吸收入脑。同时也会在体内迅速消除,由于其较大的相对分子质量和较差的脂溶性,存在口服吸收利用度和血脑屏障透过率低等问题。因此,笔者总结了细叶远志皂苷化学质量控制、药效机制、药代动力学、毒理4个方面的内容,以期为细叶远志皂苷的深入研究和应用提供参考和思路。     

BACE1抑制剂分子水平高通量筛选体系的建立

目的 建立体外分子水平β?鄄分泌酶（BACE1）抑制剂高通量筛选体系。方法 采用均相时间分辨荧光法（HTRF）,通过优化反应时间、酶浓度、检测仪器等实验条件,建立BACE1抑制剂高通量筛选体系,根据待测样品对BACE1活性抑制程度筛选其抑制剂。结果 采用HTRF法建立了BACE1抑制剂高通量筛选体系,其中反应时间确定为6 h、BACE1浓度为670 U/L,采用VICTOR3酶标仪测得信噪比为649.6,信背比为44.6,Z′因子为0.91,变异系数小于10%,并筛选到一系列IC₅₀小于10^-6 mol/L的化合物。结论 采用HTRF法建立的BACE1抑制剂筛选体系灵敏度高、特异性和稳定性好,可用于BACE1抑制剂的高通量筛选。     

异噻唑酮取代的间苯二甲酸衍生物的设计、合成 及其抑制β–分泌酶活性

目的：发现新结构的β-分泌酶抑制剂。方法：基于对β-分泌酶与其典型的抑制剂结合位点的分析,辅以分子对接实验,设计并合成异噻唑酮取代的间苯二间羧酸衍生物;采用时间分辨荧光法（time-resolved fluorescence,TRF）检测化合物对β-分泌酶的抑制活性。结果：合成了10个异噻唑酮取代的苯二羧酸衍生物,其结构经MS和1H-NMR确证,其纯度经HPLC测定;时间分辨荧光法（TRF）检测结果显示有4个化合物对β-分泌酶具有显著的抑制活性,其中化合物22a抑制β-分泌酶的IC50值为13.7 nmol&;#8226;L-1。结论：发现了新的β-分泌酶抑制剂,得出了初步的构效关系,为进一步的结构优化奠定了基础。     

快速老化小鼠海马抑制消减cDNA文库的构建

目的：构建快速老化小鼠(senescence-accelerated mouse，SAM)海马抑制消减cDNA文库。方法：以SAM快速老化亚系SAM-prone/8(SAMP8)海马作为实验组，抗快速老化小鼠亚系SAM—resistance/1(SAMR1)海马作为对照组，应用抑制消减杂交(SSH)技术，构建海马特异表达cDNA抑制消减文库；用蓝白斑筛选，以鉴定文库质量。结果：构建文库的阳性克隆率为96.18％，克隆中cDNA片段介于250-2000bp之间。结论：成功构建了SAMP8海马抑制消减文库。     

SOD 模拟物AEOL-10150 延长SAMR1 小鼠平均寿命并抑制衰老相关分泌表型

目的：观察SOD 模拟剂AEOL-10150 在抗快速老化小鼠（SAMR1）上的抗衰老作用及其作用机制。方法：18 月龄SAMR1 小鼠,雌雄各半,每周皮下注射AEOL-10150（2 mg·kg-1）1 次,连续给药直到动物死亡。采用Morris 水迷宫,新物体识别,筑巢实验和强迫游泳实验观察动物的行为变化。通过免疫荧光观察脑组织中DCX+ 神经元的数量。流式细胞术检测造血干细胞、淋巴细胞亚群和ROS 水平。细胞因子水平用Luminex 法测定。结果：AEOL-10150 能延长SAMR1 小鼠的平均寿命,但对最大寿命没有明显影响。此外,AEOL-10150 能显着提高老年小鼠空间学习记忆能力,但不能增加下丘脑MBH 区和海马DG 区DCX+ 神经元的数量。我们进一步观察了AEOL-10150 对外周血造血干细胞和淋巴细胞亚群和细胞因子的影响。结果显示,AEOL-10150 能显著延缓造血干细胞的消耗,调节淋巴细胞亚群和细胞因子的释放。其中,AEOL-10150 能够剂量依赖性地抑制血浆中衰老相关分泌表型（senescence-associated secretory phenotype,SASP）相关炎性细胞因子TNF-α和IL-17 的水平。结论：AEOL-10150 具有抗衰老作用,其抗衰老作用可能与调节免疫力及抑制SASP 产生密切相关。     

BACE1抑制剂分子水平高通量筛选体系的建立

目的建立体外分子水平β-分泌酶（BACE1）抑制剂高通量筛选体系。方法采用均相时间分辨荧光法（HTRF）,通过优化反应时间、酶浓度、检测仪器等实验条件,建立BACE1抑制剂高通量筛选体系,根据待测样品对BACE1活性抑制程度筛选其抑制剂。结果采用HTRF法建立了BACE1抑制剂高通量筛选体系,其中反应时间确定为6h、BACE1浓度为670U/L,采用VICTOR3酶标仪测得信噪比为649.6,信背比为44.6,Z′因子为0.91,变异系数小于10%,并筛选到一系列IC50小于10-6mol/L的化合物。结论采用HTRF法建立的BACE1抑制剂筛选体系灵敏度高、特异性和稳定性好,可用于BACE1抑制剂的高通量筛选。     

国外针灸治病作用机制研究概况

对国外近年来针灸效应机制和针灸治疗疼痛、恶心和呕吐、神经退行性疾病以及心脑血管疾病等病的机制实验研究进展进行了概述,对比国内同类研究现状,为国内同行提供借鉴.