靶向S1P2基因的siRNA有效片段慢病毒载体的筛选

目的:筛选能显著抑制原代培养的自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)阴茎海绵体平滑肌细胞内1-磷酸鞘氨醇受体2(sphingosine-1-phosphate receptor 2,S1P2)基因表达的siRNA慢病毒载体。方法:SHR及SD大鼠各5只用于原代培养阴茎海绵体平滑肌细胞并分成6组,每组5个样本,每个样本约1.0×105个细胞,分别为携带靶向S1P2基因的siRNA-1~3号靶点的SHR慢病毒转染组(SHR siRNA-1、SHR siRNA-2和SHR siRNA-3组)、携带慢病毒空载体的SHR转染组(SHR GFP组)、SHR未转染对照组(SHR control组)和SD大鼠对照组(SD control组)。将靶向S1P2的siRNA片段的慢病毒载体,以感染复数(MOI)=60转染各组SHR阴茎海绵体平滑肌细胞,于转染72 h后荧光显微镜下观察细胞荧光表达情况,用Western blot分析各组S1P2、ROCK1、ROCK2和eNOS在阴茎海绵体平滑肌细胞内的表达变化,RT-PCR检测各组阴茎海绵体平滑肌细胞S1P2、ROCK1和ROCK2的mRNA的表达。结果:荧光显微镜下观察SHR siRNA-1、SHR siRNA-2、SHR siRNA-3和SHR GFP组细胞转染效率均80%;SHR GFP组与SHR control组相比,S1P2、ROCK1和ROCK2的mRNA和蛋白表达无明显差异,SHR siRNA-1、SHR siRNA-2、SHR siRNA-3和SD control组均显著低于SHR control组(P0.05)。而SHR siRNA-1、SHR siRNA-2、SHR siRNA-3和SHR GFP组eNOS蛋白表达与SHR control组相比均无显著差别,但SD control组显著高于SHR control组(P0.05)。结论:3组针对S1P2的siRNA慢病毒载体均能显著抑制SHR阴茎海绵体平滑肌细胞内S1P2的表达,下调ROCK1和ROCK2表达,其中靶向S1P2的siRNA-1抑制效率最高。     

反思性学习法提高新上岗护士中医护理能力的作用分析

目的探讨反思性学习法提高新上岗护士中医护理能力的作用。方法选择护士200名,采用随机数字表法分为对照组和实验组各100名,对照组采用常规新上岗学习法,实验组在此基础上进行反思性学习训练。6个月后比较两组护士的评判性思维力和中医护理能力。结果培训后除系统化能力外实验组护士评判性思维能力其他6个维度及总分明显优于培训前和培训后的对照组(P<0.01);培训后实验组护士中医护理能力的6个维度及总分明显优于培训前和培训后的对照组(P<0.01)。结论反思性学习法能有效提高新上岗护士的评判性思维力和中医护理能力。     

经皮肾输尿管镜取石术治疗肾结石临床效果分析

目的探讨经皮肾输尿管镜取石术治疗肾结石的手术疗效与安全性。方法从医院收治的肾结石患者中选取70例,其中男性有39例,女性有31例,他们的年龄在19～50岁之间。其临床表现为腰痛、血尿、恶心呕吐、贫血、肾功能衰竭以及中毒性休克等。经过肾脏CT检查与B超检查以及病理学的研究,这些患者中右肾结石的有26例,左肾结石的有20例,双侧结石的有24例。并发肾积水的有35例,孤肾结石的有4例,铸型结石的有8例。结石的直径为2.4～4.9cm。采取经皮肾输尿管镜取石术对70例肾结石患者进行治疗。结果 70例肾结石患者在进行手术治疗的过程中先进行经皮肾穿刺造瘘的手术,再经皮肾输尿管镜取石术的治疗。经过一段时间的治疗与护理,70例肾结石患者的病情得到有效控制,没有出现十分严重的术后并发症,临床治疗效果较好。结论利用经皮肾输尿管镜取石术的方式治疗肾结石疾病,具有安全高效、恢复快、创伤小、可反复操作的优势,具有极强的临床研究与应用价值。     

脐血间充质干细胞移植治疗多系统萎缩20例

目的：观察脐血间充质干细胞移植治疗帕金森病患者神经功能的效果。 方法：选择2008-01/12北京和众华信治疗中心收治的帕金森病患者30例,均经过英国皇家医师学会帕金森病诊断与管理指南的帕金森病诊断标准确诊,男19例,女11例,年龄45~66岁,平均年龄58岁,Hoehn-Yahr分级为Ⅱ~Ⅳ级,患者对治疗均签署知情同意书,治疗方案经医院医学伦理委员会批准。所有患者均住院治疗,第1周进行常规检查,30例患者血、尿、便常规、肝肾功能、多项肿瘤标记物、胸片等均正常。自第2周起患者应用脐带血间充质干细胞进行鞘内注射移植治疗,以第3,4腰椎间隙为穿刺点,缓慢注入地塞米松2 mg,取脐血间充质干细胞注射液5 mL(干细胞数500万),在10 min内缓慢注入蛛网膜下腔,1次/周,4次为1个疗程,共治疗1个疗程。采用帕金森病统一评分量表对患者移植前后神经功能进行评定,分值越高表示神经功能缺损越严重。 结果：30例患者均进入结果分析,中途无脱落。与移植前比较,30例患者移植后3个月帕金森病统一评分量表分值均明显降低(P < 0.01),患者震颤、强直、运动迟缓、姿势不稳等临床症状均得到明显改善,均未出现移植物抗宿主病。 结论：脐血间充质干细胞移植可以一定程度地改善帕金森病患者的临床症状,提高患者生活质量。     

EFG1和HGC1基因在白念珠菌菌丝相和酵母相的表达差异

目的比较白念珠菌双形态性的两个调控基因,即增强菌丝生长基因(Enhanced Filamentous Growth,EFG1)和菌丝G1细胞周期蛋白基因(hyphal G protein cycle1,HGC1)在菌丝相和酵母相中的表达情况,寻找调控菌丝表达的关键基因。方法分别提取白念珠菌菌丝相和酵母相的RNA,行半定量RT-PCR检测,比较EFG1和HGC1两个基因的RNA表达差异。结果EFG1在菌丝相和酵母相都有表达,差异无显著性意义,而HGC1在菌丝相有表达,在酵母相无表达。结论HGC1为菌丝特异基因。     

针刺治疗海洛因依赖者稽延性戒断症状疗效观察(英文)

目的:通过针刺不同穴位,观察和分析其对海洛因依赖者稽延性戒断症状的干预效果,为筛选针刺治疗本症的特异穴位提供临床依据。方法:将符合纳入标准的60例男性海洛因依赖者随机分为3组,即内关组、神门组和对照组,分别在治疗前、治疗过程中及治疗3星期后采用稽延性戒断症状评分量表和汉密尔顿焦虑量表(Hamilton Anxiety Scale,HAMA)进行测定,观察其变化。结果:在控制稽延性戒断症状上,内关组、神门组与对照组相比有统计学差异(P<0.01, P<0.05);但内关组、神门组之间差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:针刺可缓解海洛因依赖者稽延期戒断症状和精神焦虑症状,内关穴与神门穴具有同样显著疗效,但神门穴对于心神的异常具有更快更好的显效趋势。     

控制性低中心静脉压对兔肝缺血再灌注损伤的影响

目的 评价控制性低CVP对兔肝缺血再灌注损伤的影响.方法 新西兰大白兔32只,随机分为4组(n=8):假手术组(S组)、控制性低CVP组(L组)、肝缺血再灌注组(IR组)和控制性低CVP下肝缺血再灌注组(LIR组).L组静脉输注硝酸甘油10～30μg·kg~(-1)·min~(-1)和多巴胺30～40μg·kg~(-1)·min~(-1),在5 min内使CVP降至4～5 cm H_2O且维持MAP≥90 mm Hg,持续至再灌注6 h.IR组采用夹闭肝门30 min后再开放的方法建立肝缺血再灌注模型.LIR组在控制性低CVP模型制备成功后立即进行肝缺血再灌注.分别于实施控制性低CVP前(T_0,基础状态)、再灌注即刻(T_1)、30 min(T_2)、1 h(T_3)、2 h(T_4)、4 h(T_5)、6 h(T_6)时采用彩色超声多普勒诊断仪测定门静脉、肝动脉和肝静脉的血流速度,同时采集动脉血样,测定血浆AST和ALT的活性.于再灌注6 h时,取肝组织,电镜下观察细胞超微结构.结果 与S组比较,L组各时点门静脉、肝动脉、肝静脉的血流速度、血浆AST和ALT的活性差异无统计学意义(P＞0.05),IR组T_(1～5)时肝动脉血流速度减慢,T_(5,6)时肝静脉血流速度增快,血浆AST和ALT的活性升高,LIR组T_(1～6)时肝静脉血流速度度增快,T_(1～6)时血浆AST和ALT的活性升高(P＜0.05);与IR组比较,LIR组T_(1,2)时肝动脉血流速度增快,T_1～6时肝静脉血流速度增快,T_(1,4～6)时血浆ALT和AST的活性降低(P＜0.05).与IR组比较,LIR组肝细胞线粒体及窦周间隙面微绒毛的肿胀程度减轻,肝血寞窦壁覆盖完整.结论 控制性低CVP可减轻兔肝缺血再灌注损伤,其机制可能与增加再灌注期间肝血流量,减轻肝细胞及肝血窦损伤,从而改善肝灌注有关.     

活性氧簇在皮炎湿疹发病中的作用

活性氧簇是重要的氧的衍生物,氧化还原反应状态的平衡对维持机体的内环境起着重要的作用.皮肤是氧应激损害的主要靶器官,过多活性氧造成组织损伤,其主要通过影响核因子-κB、NO、蛋白激酶介导的磷酸化和基因异常表达发挥作用.多种炎症性皮肤疾病与活性氧簇相关,活性氧簇在皮炎、湿疹的发病中起着重要作用,抗氧化剂有望成为治疗这类疾病的新途径.     

"一站式"Hybrid技术在冠心病治疗中的麻醉体会

传统概念的Hybrid技术由英国学者Angelini等[1]在1996年提出,开始是指分期冠脉支架置入和搭桥手术(CABG)复合用于治疗冠心病.冠状动脉多支复杂病变是冠心病治疗的难题,单纯靠冠状动脉搭桥手术或介入治疗均存在缺陷,近年来随着微创手术和心导管介入技术的发展,临床医师开始探索更为合理有效的治疗方法.