灵芝的药理作用和临床应用研究进展

灵芝作为最新纳入“药食同源”目录的名贵中药材之一,其药用历史悠久,药用价值高,化学成分多样,富含多种有益于人体健康的成分,具有广泛的药理作用,其主要药用部位有灵芝孢子粉、子实体、菌丝等。灵芝多糖、灵芝三萜、灵芝酸等成分被认为是灵芝发挥其不同药理作用的主要活性成分。现代药理学研究发现,其具有防治心血管疾病、保肝护肝、抗肿瘤、免疫调节、抗衰老、抗菌等作用,在辅助治疗肿瘤等方面疗效确切,应用广泛。目前对于灵芝的基础研究及临床前试验较为普遍,而临床应用研究亟待加强。本文对近年来灵芝药理作用的研究进展进行总结,梳理了其临床应用的现状,并对存在的问题进行了分析,对后续的开发和利用进行了展望,以期为灵芝相关健康产品的开发提供参考和借鉴。     

三氧化二砷联合丹参酮对肝癌的作用效果与机制研究

[目的]考察三氧化二砷(arsenic trioxide,As_2O_3)联合丹参酮对肝癌裸鼠移植瘤的作用效果并初步探讨其可能的分子机制。[方法]建立裸鼠人肝癌移植瘤模型,待瘤体生长到体积100mm3左右,将裸鼠随机分为5组,分别为模型对照组、As_2O_3单用组(As_2O_3低剂量组,2.5mg/kg)、阳性对照组(As_2O_3高剂量组,5.0mg/kg)、丹参酮单用组(500mg/kg)、As_2O_3-丹参酮组(As_2O_32.5mg/kg+丹参酮500mg/kg),每组8只,每天腹腔注射给药,共19d。比较各组肿瘤生长曲线和瘤体质量;采集血液进行血常规和生化常规分析;以原位末端转移酶标记(TdT-mediated dUTP nick end labeling, TUNEL)法检测瘤体组织细胞凋亡情况;免疫组化和Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。[结果]随着给药时间的延长,与模型对照组比较,As_2O_3单用组、丹参酮单用组、As_2O_3-丹参酮组以及阳性对照组均表现出一定的抑瘤效果(P0.01)。与阳性对照组比较,As_2O_3-丹参酮组的抑瘤效果更显著(P0.05)。与模型对照组比较,As_2O_3单用组、阳性对照组、As_2O_3-丹参酮组白细胞(white blood cell,WBC)计数均上调,其中As_2O_3单用组差异具有统计学意义(P0.05);As_2O_3单用组、阳性对照组红细胞(red blood cell,RBC)计数显著下调(P0.05,P0.01);各治疗组血红蛋白(hemoglobin,HGB)水平均下调,其中阳性对照组差异有统计学意义(P0.01);As_2O_3单用组、阳性对照组、As_2O_3-丹参酮组血小板(platelet,PLT)计数均上调,其中As_2O_3单用组和阳性对照组差异具有统计学意义(P0.01);与阳性对照组比较,As_2O_3-丹参酮组WBC、RBC计数和HGB水平均上调,但差异无统计学意义(P0.05)。与模型对照组比较,As_2O_3单用组、阳性对照组与As_2O_3-丹参酮组丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)水平上调,但差异无统计学意义(P0.05);各治疗组中天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平下调,其中丹参酮单用组差异有统计学意义(P0.01);各治疗组中尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平下调,其中丹参酮单用组差异有统计学意义(P0.05);阳性对照组、丹参酮单用组和As_2O_3-丹参酮组肌酐(creatinine,CREA)水平均下调(P0.05,P0.01)。与模型对照组比较,各治疗组凋亡率均明显上调(P0.01);与阳性对照组比较,As_2O_3-丹参酮组凋亡率上调显著(P0.01)。与模型对照组比较,各治疗组中促凋亡蛋白Bax表达上调,其中阳性对照组、丹参酮单用组和As_2O_3-丹参酮组差异有统计学意义(P0.01);丹参酮单用组和As_2O_3-丹参酮组靶向聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)表达明显上调(P0.01);阳性对照组、丹参酮单用组和As_2O_3-丹参酮组抗凋亡蛋白X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)表达明显下调(P0.01)。[结论]As_2O_3与丹参酮联用抗肝癌具有协同增效、减毒的作用,丹参酮可以减轻As_2O_3造成的血常规改变和肝肾功能损伤。     

海马化学成分及药理活性研究进展

海马Hippocampus为我国名贵珍稀动物类药材,其化学成分种类丰富,含有氨基酸、活性多肽、甾体类、脂肪酸和微量元素等多种化学成分。海马为传统补益类药材,药理作用广泛,其主要的药理活性包括性激素样作用、抗炎、抗氧化、抗肿瘤和提高机体免疫力等。通过查阅近年来国内外的相关文献,就海马的化学成分和药理作用等方面研究进展进行系统综述,结合课题组前期的工作对海马药材的相关问题进行了讨论与展望,以期为海马的临床应用和后续产品开发提供依据和参考。     

太平洋海马的性状鉴别和COI-ATP6条形码分子鉴定研究

目的:基于性状鉴别和DNA条形码联用技术建立太平洋海马药材(Hippocampus ingens)的生药学鉴定特征,为其后续的应用开发奠定基础.方法:利用传统性状鉴别方法研究太平洋海马的典型性状特征;通过有效扩增测定10个太平洋海马样品的COI和ATP6基因片段序列,分别分析两种序列中碱基组成、变异位点等信息;基于K2P模型计算太平洋海马的种内种间遗传距离;通过NJ法构建太平洋海马与常见市售海马的系统聚类树,比较各海马间的亲缘关系.结果:太平洋海马最典型的性状特征包括体表光滑和体型巨大,全身密布白色竖线纹和突出的眼棘;10条太平洋海马样品COI、ATP6序列平均长度分别为649和603 bp,变异率分别为1.079％和1.990％.COI和ATP6序列的最大种内遗传距离均显著小于最小种间遗传距离,因此能与其他海马明显区分,同时与大海马的亲缘关系最近.结论:COI和ATP6序列均可作为将太平洋海马与其它常见海马明显区分的有效条形码,但ATP6序列更适合作为其标准条形码.本文提供了太平洋海马的性状和分子鉴别特征,为其品种的快速鉴定提供了技术支撑,对有效维护海马药材的市场秩序,控制和提高海马药材质量具有重要意义.     

败酱草及其混伪品的显微鉴别特征与HPLC指纹图谱研究

目的 对败酱草Herba Patriniae及其市场常见混伪品的显微鉴别特征和HPLC指纹图谱进行研究,明确不同品种的败酱草及其混伪品间的差异,为败酱草的准确鉴定提供技术保障。方法 收集败酱草正品药材黄花败酱和白花败酱,市场常见败酱草混用品异叶败酱、菥蓂和苣荬菜,采用显微鉴别方法对5种药材粉末的显微特征进行研究;优化败酱草总皂苷的提取工艺,比较不同品种的总皂苷含量;建立败酱草及其混伪品的HPLC指纹图谱,基于指纹图谱相似度评价、聚类分析和主成分分析,对败酱草及其混伪品进行鉴别和药材质量的综合评价。结果 败酱草及其混伪品药材粉末的显微特征存在显著差异;优化了败酱草总皂苷的提取工艺,结果表明,败酱草及其混伪品总皂苷含量存在差异;建立了败酱草及其混伪品共26批的HPLC指纹图谱,共标定了11个共有峰,明确了败酱草及其混伪品指纹图谱的差异,通过相似度分析、聚类分析和主成分分析,可将败酱草及其混伪品进行准确区分;综合评价分析结果表明,败酱草及其混伪品的得分差异较大,其中正品白花败酱和黄花败酱的得分最高。结论 获得了败酱草及其市场常见混伪品在粉末的显微特征和HPLC指纹图谱的差异,为败酱草的准确鉴...     

小构树总黄酮提取工艺优化及其抗氧化、美白活性

目的优化小构树总黄酮提取工艺,并评价其抗氧化、美白活性。方法在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、液料比、提取温度、提取时间为影响因素,总黄酮得率为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。检测总黄酮对DPPH、ABTS自由基的清除能力,以及对酪氨酸酶活性的抑制作用。结果最佳条件为乙醇体积分数90%,液料比35∶1,提取温度85℃,提取时间80 min,总黄酮得率为55.14 mg/g。总黄酮对DPPH、ABTS自由基及酪氨酸酶单酚酶、二酚酶的IC50值分别为151.70、242.20、24.37、15.64μg/m L。结论该方法稳定可靠,可用于提取具有良好抗氧化、美白活性的小构树总黄酮。     

萝卜硫素诱导白血病细胞K562凋亡及其与化疗药协同作用的实验研究

目的:探讨萝卜硫素诱导K562白血病细胞作用及其与化疗药的协同作用。方法:琼脂半固体集落培养法和MTT法检测不同浓度的萝卜硫素对K562细胞增殖的影响;倒置显微镜观察萝卜硫素对细胞形态的影响,Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡情况;Western blot检测凋亡调控蛋白PARP的活性;观察萝卜硫素分别和高三尖杉酯碱、阿糖胞苷联合的抑瘤作用,用药物相互作用指数评价药物协同作用。结果:萝卜硫素能够抑制白血病K562的增殖,呈剂量依赖性;萝卜硫素引起了K562细胞形态的明显改变,显著提高了细胞的早期凋亡率,增加了促凋亡蛋白PARP的表达水平;萝卜硫素与化疗药物高三尖杉酯碱和阿糖胞苷存在明显的协同作用,其协同系数分别为0.64和0.66。结论:萝卜硫素可以诱导K562细胞发生凋亡,增加化疗药物的敏感性,具有良好的临床应用前景。     

马兜铃酸Ⅰ的生物合成途径研究进展及临床研究现状

马兜铃酸致肝癌事件引发了社会舆论对中药安全性问题的持续关注。马兜铃酸Ⅰ是马兜铃酸中的主要毒性物质,具有很强的肾毒性和肝毒性。马兜铃酸Ⅰ的合成途径复杂,涉及到酪氨酸脱羧酶、去甲乌药碱合成酶和单胺氧化酶等多种的关键催化酶。本文综述了马兜铃酸Ⅰ的生物合成途径及相关的关键催化酶和马兜铃酸肾病的临床研究现状,以期为马兜铃酸的合成途径的明确奠定基础,并对马兜铃酸肾病的临床研究提供借鉴。     

线粒体DNA标记在动物类药材分子鉴定中的应用进展

动物类中药材是中华医药宝库中重要的组成部分,药用历史悠久,功效显著。随着野生动物资源的破坏和日益增长的市场需求,动物类药物中混伪品掺杂现象时有发生,为其临床应用带来了安全隐患。线粒体DNA因其严格的母系遗传特征和丰富的遗传多样性,被广泛应用于动物群体遗传、谱系生物地理和系统发育等研究领域。近年来,线粒体DNA标记在动物类药材分子鉴定中的应用日益广泛,并取得了丰硕的成果,为动物类药物的质量控制提供了技术保障。对COI、Cyt b、12S rRNA等线粒体DNA标记在动物类药材分子鉴定中的应用现状进行总结,结合课题组前期的研究结果,对线粒体DNA分子标记技术在动物类药材鉴定中的后续应用开发进行了展望,以期为我国药用动物资源的合理利用提供参考和借鉴。