建立HILIC-UPLC联用分析法测定血浆中葫芦巴碱及在药动学研究中的应用

目的：葫芦巴碱是咖啡豆中含量较多的生物碱之一,为了研究其药代动力学特征,本研究建立了一种简便、灵敏、准确的亲水相互作用色谱一超高效液相联用分析方法,并研究了葫芦巴碱和咖啡豆甲醇提取物的药代动力学。方法：大鼠灌胃和尾静脉注射给予葫芦巴碱和咖啡豆甲醇提取物后,眼眶静脉丛取血,血液样本采用亲水相互作用色谱一超高效液相联用分析法进行分析,药代动力学参数按非房室模型,通过药动学软件87／97进行计算。结果：对所建立的方法进行了方法学的考察,线性范围为O．12—100μg·mL^-1,最低定量下限为0．12μg·mL^-1,日内日间精密度、准确度、提取回收率和稳定性等均达到体内药物分析要求。葫芦巴碱口服和尾静脉注射给药后,AUC（0-ω）分别为（4066．83±1244．41）和（3544．29±908．80）min·μg·mL^-1,生物利用度达到57.37％。咖啡豆甲醇提取物口服后,AUC（0-ω）为（4566．75±1435．64）min·μg·mL^-1,绝对生物利用度为64．42％,相对生物利用度为112．29％。结论：所建立的亲水作用色谱一超高效液相联用分析法简单、准确、重现性好;葫芦巴碱无论是纯品还是在咖啡豆甲醇提取物中都有较好的生物利用度,而且没有明显的差异。     

巴戟天不同炮制品对大鼠肝药酶CYP3A的影响

目的通过研究巴戟天不同炮制品对大鼠CYP3A的影响,探索巴戟天盐制和甘草汁制的机理。方法将110只大鼠随机分为空白对照组、苯巴比妥0.1 g/kg剂量组和生/制/盐巴戟天2.0、1.0、0.5 g/kg剂量组,予相应剂量药液灌胃给药7 d。采用体外温孵法、Western blot和荧光定量PCR技术分析CYP3A酶活性、蛋白和mRNA表达。结果与空白对照组比较,除生巴戟天2.0 g/kg组外,其余各给药组的6β-羟基睾酮生成速率均明显增加(P<0.05);在蛋白和mRNA表达上,仅有制巴戟天1.0 g/kg组CYP3A蛋白的表达、盐巴戟天1.0 g/kg组CYP3A1 mRNA的表达和生巴戟天1.0 g/kg组CYP3A2 mRNA的表达与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),其余各给药组CYP3A蛋白和mRNA表达均明显升高(P<0.05)。与生巴戟天对应剂量组比较,制巴戟天2.0 g/kg组、盐巴戟天1.0和2.0 g/kg组的6β-羟基睾酮生成速率均明显增加(P<0.05),制巴戟天1.0 g/kg和盐巴戟天2.0 g/kg组CYP3A蛋白的表达、制巴戟天2.0 g/kg和盐巴戟天1.0 g/kg组CYP3A1 mRNA的表达、制巴戟天1.0 g/kg组CYP3A2 mRNA的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。结论巴戟天对CYP3A有诱导作用,用甘草汁和盐炮制后诱导作用增强。     

山楂总黄酮对血瘀合并脑缺血-再灌注小鼠的影响(二)

目的:观察山楂总黄酮(HFs)对小鼠血瘀性脑缺血-再灌注模型全血黏度及脑能量代谢的影响.方法:采用地塞米松复制小鼠血瘀模型,结扎双侧颈总动脉30 min,再灌20 min复制脑缺血-再灌注模型;通过测定该模型小鼠全血黏度和脑组织中Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP、Ca2+-ATP、Mg2+-ATP、LD、LDH值,探讨山楂总黄酮对小鼠血瘀性脑缺血-再灌注模型血液流变性和脑能量代谢的影响.结果:山楂总黄酮能明显改善血瘀性脑缺血-再灌注小鼠的全血黏度(P<0.05),对脑能量代谢也有一定的改善作用,使ATP含量显著或明显增加(P<0.01或P<0.05),LD减少(P<0.05),LDH活性显著或明显增加(P<0.01或P<0.05).结论:山楂总黄酮能改善小鼠血瘀性脑缺血-再灌注模型血液流变性和脑能量代谢,具有保护脑缺血-再灌注损伤的作用.     

提高药理学教学质量的方法探索

根据药理学的学科特点,对提高药理学教学质量的方法进行探索,在专业教育中溶入德育教育,与社会热点相结合,让学生自主授课,课堂教学中灵活运用多媒体、比较教学法,注重病例讨论和实验教学等,从多角度激发学习兴趣,提高教学质量。     

不同比例甘草炮制对吴茱萸水提物指纹图谱和肝毒性的影响

目的探讨不同比例甘草炮制对吴茱萸水提物指纹图谱和致小鼠肝毒性作用的影响。方法吴茱萸的炮制参照《中国药典》2015版进行,采用HPLC指纹图谱分析炮制前后化学成分的变化,采用分光光度方法检测ALT、AST、T-SOD、NOS和MDA等指标。结果在HPLC指纹图谱中除峰1面积在4个制品中均较生品减少(P<0.01或P<0.001)及峰9~11和13~14未有明显变化外,其他峰的变化受炮制用甘草比例的影响较大(P<0.05,P<0.01或P<0.001);在100:6制品与100:3和100:24制品间14个峰面积比较均有统计学差异(P<0.05,P<0.01或P<0.001),与100:12制品间7个峰有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。吴茱萸生品和制品组ALT和AST均明显高于空白组(P<0.01),其中100:6和100:12制品组明显低于生品组(P<0.01);与空白组比较,生品组T-SOD活性降低(P<0.05)而制品组升高,且制品组T-SOD活性明显高于生品组(P<0.05或P<0.01);制品组NOS的活性均高于空白组(P<0.05或P<0.01),尤其100:6和100:12制品组与生品组相比亦明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论吴茱萸生品和制品均有明显的肝毒性,其中100:6和100:12制品的肝毒性较弱;不同比例的甘草炮制对吴茱萸水提物中部分化学成分产生明显影响;甘草炮制可减轻吴茱萸导致的小鼠肝脏抗氧化能力损伤。     

肠胃宁片镇痛作用

目的：观察其对小鼠疼痛模型的影响。方法：以不同浓度肠胃宁片(2．7g／kg、1．8g／kg、0．9g／kg)给小鼠连续5天灌服，采用小鼠热板致痛法、小鼠酒石酸锑钾致扭体反应法，观察肠胃宁片的镇痛作用。结果：肠胃宁片可明显提高小鼠热板法致痛的痛阈，使酒石酸锑钾所致小鼠扭体反应的潜伏期延长，10分钟内扭体次数减少。结论：肠胃宁片有较好的镇痛作用。     

小鼠血瘀合并脑缺血模型的建立

目的:建立小鼠血瘀合并脑缺血模型。方法:在注射地塞米松造成血瘀模型基础上,结扎双侧颈总动脉造成小鼠全脑缺血再灌注模型。结果:模型小鼠的血液粘度、脑能量代谢、脑水肿、Ca2 和脑组织显微结构的变化符合缺血性脑血管病的临床特征。结论:注射地塞米松造成血瘀并通过结扎双侧颈总动脉可成功建立小鼠血瘀合并脑缺血再灌注模型。     

不同商品规格巴戟天炮制品中游离蒽醌类成分含量的比较

目的:以巴戟天中5种游离蒽醌类化合物(2-羟基-3-甲基蒽醌,2-羟基-1-甲氧基蒽醌,1,8-二羟基蒽醌,甲基异茜草素-1-甲醚,甲基异茜草素)为指标,对市场上流通的不同商品规格的巴戟天饮片的质量进行检测。方法:三氯甲烷提取后采用HPLC同时检测上述5种成分的含量,Phenomenex-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.4%磷酸(B)梯度洗脱(0~15 min,15%~30%A;15~70 min,30%~45%A;70~90 min,45%~65%A;90~100 min,65%~90%A),流速1 mL·min~(-1),柱温30℃,检测波长277 nm,进样量10μL。结果:上述5种游离型蒽醌分别在0.010~0.250,0.060~1.500,0.004~0.100,0.050~1.250,0.025~0.625μg与其峰面积呈良好线性关系,r分别为0.999 7,0.999 1,0.999 6,0.999 7,0.999 5。加样回收率分别为98.2%,99.6%,97.9%,98.5%和97.7%,RSD分别为1.4%,1.6%,2.2%,1.6%和1.7%。结论:所建立的方法准确、可靠,能同时检测上述5种游离蒽醌类成分的含量,适用于巴戟天饮片的质量评价。     

吴茱萸经不同比例甘草炮制后肝毒性变化与对CYP450酶调控的相关性分析

目的 通过分析吴茱萸经不同比例甘草炮制后致小鼠肝毒性的差异与肝脏细胞色素P450(CYP450)酶蛋白和mRNA表达变化间的联系,探寻甘草炮制减轻吴茱萸肝毒性的作用靶点,阐释吴茱萸甘草炮制的原理及科学内涵。方法 参照《中国药典》2020版中制吴茱萸的炮制方法制备吴茱萸不同比例甘草炮制品;80只雄性小鼠随机分8组,分别为空白组、对乙酰氨基酚组、吴茱萸生品组、无甘草炮制品组和甘草炮制品(100∶3、100∶6、100∶12、100∶24)组,吴茱萸的给药剂量为30 g·kg^-1;采用酶联免疫法检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(AKP)和白蛋白(ALB)水平;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织Cyp1a2、Cyp2c29、Cyp2d22、Cyp2e1、Cyp3a11蛋白表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝组织Cyp1a2、Cyp2c29、Cyp2d22、Cyp2e1、Cyp3a11 mRNA表达;采用两变量回归分析法对AST和ALT水平与CYP450酶蛋白及m...     

薏苡仁药理研究新进展

薏苡仁为禾本科植物薏苡Coix lacryma-jobi L.var.rnayuen(Rornan)Stapf的成熟种仁。味甘淡,性微寒,功能利水健脾,常用于脾虚湿滞证。早期药理研究表明薏苡仁有解热、镇静、镇痛的作用,近年又发现有增强免疫、抗肿瘤及降血糖的作用^[1]。现就其在抗肿瘤和降血糖方面的研究综述如下。