粗茎秦艽多糖GCP-1的分离纯化、结构表征及抗炎活性评价

目的从粗茎秦艽Gentianacrassicaulis中分离纯化多糖,初步分析其结构特征并研究其体外抗炎活性。方法采用热水浸提粗茎秦艽粗多糖(Gentianacrassicaulispolysaccharide,GCP),再经CelluloseDE-52纤维素离子交换柱、Sephadex G-100柱进行分离纯化,得到GCP-1。采用高效凝胶色谱法(HPGPC)鉴定纯度并测定其相对分子质量;采用高效液相色谱(HPLC)测定其单糖组成;采用红外光谱(IR)、气相色谱-质谱联用(GC-MS)和核磁共振波谱法对该多糖的结构进行初步分析;采用CCK-8法检测其对小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7增殖的影响;利用ELISA试剂盒测定其对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、一氧化碳(NO)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)释放量的影响。结果从粗茎秦艽中分离纯化得到GCP-1多糖,相对分子质量为6.87×10⁴,由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖7种单糖组成,其物质的量比为0.07∶3.07∶0.42∶1.98∶1.33∶5.22∶6.76;IR、GC-MS和核磁共振波谱分析表明,GCP-1是一种典型的果胶多糖,含有HG和RGI区域及AGI和AGII侧链;质量浓度在10~200μg/m L时,GCP-1能明显促进小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7的增殖(P<0.05),并能明显抑制小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7分泌IL-1β、NO和TNF-α。结论GCP-1为从粗茎秦艽中分离得到的天然来源的均一多糖,其结构和活性初步研究为秦艽多糖成分的开发提供了一定参考。     

胶体金免疫层析法快速检测中药材中除草剂扑草净残留

目的:基于自制的扑草净抗原和单克隆抗体,建立了一种适用于快速检测中药材、饮片中三嗪类除草剂扑草净残留的免疫层析方法。方法:确定了抗体偶联量为7μg,稀释液配制条件为含1%OVA,0.1%Tween-80的0.1 mol·L^-1 PBS优化条件,并采用T线划线浓度为0.05 mg·mL^-1,C线划线浓度为0.5 mg·mL^-1的湿法试纸条,提升胶体金免疫层析试纸条的灵敏度,降低不同用药部位中药的基质效应,并进行大批量中药材检测。结果:试纸条检测灵敏度可达到1 ng·mL^-1,实际样品检出限可达到0.1 mg·kg^-1,所建立的方法适用于陈皮、蒲公英、三七、金银花等中药材中40种不同部位扑草净残留检测。对10批西洋参、5批山药、12批三七、5批黄芪、3批沙参、4批牛膝、14批菊花、9批生姜、6批菟丝子进行了实际样品快速检测,均未检出扑草净残留。结论:本方法检测方法快速准确,前处理简便,操作简单,推广性强,可作为现场快速筛查扑草净残留的有效手段,以保证中药材的质量和安全性。同时,该研...     

荭草抗肿瘤活性提取物质量标志物的初步研究

目的基于质量标志物(Q-marker)理论,分析具有抗肿瘤活性的荭草醋酸乙酯提取物的成分,研究其质量控制方法。方法首先使用UPLC-ESI-HRMS对该提取物进行成分鉴定;再使用HPLC进行成分的定量测定,同时建立其定量测定方法,并对鉴定出的化合物进行药理作用分析,初步预测Q-marker;最后采用人非小细胞肺癌A549细胞模型,研究荭草醋酸乙酯提取物及6种候选成分混合物对A549肿瘤细胞生长及迁移的影响。结果通过UPLC-ESI-HRMS结果指认出12个化合物,其中,HPLC未检出原儿茶酸、儿茶素、山柰素和芹菜素,异牡荆素和木犀草素质量分数低于0.01mg/g,不纳入Q-marker候选物之列。结合药理作用分析,最终选择了6种成分没食子酸、异荭草苷、荭草苷、牡荆素、木犀草苷和槲皮苷作为其潜在Q-marker。各样品中均能检测出这6个成分,且6个成分总量超过10%。荭草醋酸乙酯提取物及等剂量6成分混合物均能显著抑制A549细胞的增殖与迁移,并诱导其凋亡,且两组之间效果无显著性差异。结论没食子酸、异荭草苷、荭草苷、牡荆素、木犀草苷和槲皮苷作为具有抗肿瘤活性的荭草醋酸乙酯提取物中的潜在Q-marker具有科学合理性;建立的荭草醋酸乙酯提取物的HPLC定量测定方法准确、稳定。     

中医对偏头痛认识沿革的探析

偏头痛是一种反复发作性、搏动性头痛,属中医"头风"、"偏头痛"、"偏头风"范畴.本文就历代医家对偏头痛的病因病机、症侯特点、治则治法、用药规律等方面进行了分析、归纳总结,认为如何继续发挥中药的配伍优势以取得更好的临床疗效,是今后该方面研究的重点之一.     

西黄丸含药血清经Wnt信号转导通路细胞周期蛋白D1调控人肺癌干细胞增殖的机制

目的：观察葶苈草颗粒对炎症性肠病（IBD）的治疗作用并探讨其作用机制。方法：选昆明种小鼠,用3%恶唑酮（OXZ）复制小鼠OXZ结肠炎模型。实验分为正常对照、模型对照组（等容蒸馏水）、葶苈草颗粒（1.95,3.9,7.8 g·kg^-1）治疗组、柳氮磺胺吡啶（0.39 g·kg^-1）阳性药对照组,ig每天 1 次,连续治疗4 d。用酶联免疫吸附（ELISA）法测定血清和结肠组织中白细胞介素-10（IL-10）、结肠组织中髓过氧化物酶（MPO）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量,进行疾病活动指数（DAI）评分和病理组织学观察。结果：治疗4 d后,与模型组比较,葶苈草颗粒3.9,7.8 g·kg^-1治疗组,血清和结肠组织IL-10含量明显升高（P<0.05或P<0.01）,结肠组织MPO,IL-1β,TNF-α和IL-6含量明显降低（P<0.05或P<0.01）;葶苈草颗粒治疗组总DAI值明显减少（P<0.05或P<0.01）。结论：葶苈草颗粒对OXZ诱导的小鼠实验性肠炎具有较好的治疗作用,其可能通过调节促炎细胞因子IL-1β,TNF-α,IL-6和抑炎细胞因子IL-10之间的平衡,有效减轻实验性结肠炎炎症,从而起到治疗IBD的作用。     

藏药桑当抗痛风作用机理的初步研究

目的 探讨藏药桑当抗痛风作用机理.方法 考察藏药桑当对单胺类神经递质以及局部组织中炎性细胞因子的影响.结果 藏药桑当具有提高中枢5-HT及DA含量和降低外周5-HT,DA含量的趋势,能够显著降低局部组织中TNF-α,L-1β,IL-6的含量(P<0.01).结论 藏药桑当抗痛风作用机理与其能够调整体内单胺类神经递质的含量和降低局部炎性细胞因子的含量有关.     

浅析中药五味标定混乱的认识论原因

本文从中药五味理论形成的认识方法论入手,对造成五味混乱的原因进行初步探讨。提出五行学说（原始普通系统论的泛化使用;取类比象的局限性以及简单归纳法在五味理论中的运用是导致五味混乱的主要原因。认为运用现代先进的科学技术和科学的辨证思维方法,找到中药五味实质和内在规律性,才是五味理论进一步发展的关键。     

右归丸对肾阳虚大鼠卵巢细胞Caspase-3、 TNFα、Bcl-2、Bax表达的影响

目的:研究右归丸对大鼠卵巢卵泡细胞凋亡的影响与作用机理.方法:以雌性SD大鼠注射糖皮质激素造成肾阳虚模型,采用免疫组织化学方法观察了右归丸对肾阳虚大鼠卵巢的卵泡细胞TNF-α、Caspase-3、Bcl-2、Bax表达的影响.结果:在对大鼠卵巢卵泡细胞Bcl-2表达的影响上,右归丸低剂量组、金匮肾气丸组与模型组存在明显的差异(P＜0.05),右归丸低剂量组、金匮肾气丸组可通过上调bcl-2水平,发挥抑制凋亡的作用(P＜0.05),TNFα、Caspase-3、Bax也存在相应改变.结论:提示右归丸温阳补肾、填精补血的现代机理之一,可能与该药调节卵泡细胞凋亡途径上的Bcl-2、Caspase-3、Bax表达有关.同时中成药金匮肾气丸也具有相似的作用.     

右归丸水提液对小鼠卵巢颗粒细胞雌激素、孕酮分泌的影响及机制

目的:观察右归丸水提液对卵巢颗粒细胞分泌雌激素、孕酮功能的影响。方法:首先运用体外培养技术进行小鼠卵巢颗粒细胞体外培养,采用直接给药法,观察右归丸水提液对小鼠卵巢颗粒细胞雌激素、孕酮的分泌量(放射免疫测定法),并用检测卵巢颗粒细胞内cAMP水平(ELISA法)。结果:右归丸水提液高剂量组(0.18g/ml)可明显增加颗粒细胞雌激素、孕酮分泌量(P<0.01),同时显著增加颗粒细胞内cAMP的浓度(P<0.01)。结论:右归丸温补肾阳的作用可能与直接促进颗粒细胞的分泌功能有关,同时,其作用途径可能是通过激活颗粒细胞内酰苷酸环化酶而实现。