基于UPLC-QE-Orbitrap-MS的米邦塔仙人掌茎果化学成分表征及其抗氧化活性评价

目的 建立超高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱方法(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS),对米邦塔仙人掌的叶状茎及果实化学成分进行表征,并对其抗氧化活性进行考察,初步探讨成分与活性的关系。方法 选择UPLC HSS T3 C18 (2.1 mm×10 mm, 1.8 μm) 色谱柱,以乙腈-0.1% 甲酸水为流动相梯度洗脱,流速为 0.2 mL.min-1;采用加热电喷雾离子源(HESI),正、负离子模式分别进行一级、二级质谱数据采集;采用数据库和文献报道对米邦塔仙人掌叶状茎及果实的化学成分进行表征。采用DPPH、羟自由基(.OH)和超氧阴离子自由基(.O2-)清除能力测试方法,对米邦塔仙人掌叶状茎及果实的抗氧化活性进行考察。结果 从米邦塔仙人掌的叶状茎及果实中共表征出39种化合物,其中酚酸类22个,黄酮类13个,其他成分4个。米邦塔仙人掌叶状茎及果实均具有一定的抗氧化能力,米邦塔仙人掌果实对DPPH的清除能力强于叶状茎,而叶状茎对.OH清除能力稍强于果实,叶状茎皮和果皮清除能力相当,果汁对.O2-清除能力最强,米邦塔仙人掌的抗氧化活性与其富含的酚酸类成分密切相关。结论 本研究建立了一种快速、准确、可靠的米邦塔仙人掌茎果化学成分的鉴别方法,为米邦塔仙人掌资源的综合开发利用提供了科学依据。     

银翘散抗流感病毒有效部位各组分变化及归属分析

为深入研究银翘散抗流感病毒有效部位的物质组成及其归属，本文利用HPLC及LC-MS/MS提供的色谱及离子碎片信息，对相同实验条件下提取的银翘散抗流感病毒有效部位及其组方各单味药的色谱指纹图谱流出组分进行对比分析，实现了银翘散与其单味药中各组分的归属分析。采用HPLC及LC-MS/MS方法，负离子扫描获得质谱数据。根据保留时间比对、阴性验证、离子碎片解析、添加对照品指认等方法，归属色谱峰来源，并对主要色谱峰进行指认。结果对银翘散抗流感病毒有效部位色谱指纹图谱中的30个共有色谱峰，归属了其中的29个峰。对其中14个主要色谱峰进行了确定，分别为绿原酸、甘草苷、甘草素-4′-O-芹糖(1→2)葡糖苷、连翘酯苷、芦丁、4，5-二咖啡酰基奎宁酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸、异甘草素-4-O-芹糖(1→2)葡糖苷、3，4-二咖啡酰基奎宁酸、异甘草素-2′-O-芹糖(1→2)葡糖苷、牛蒡子苷、醉鱼草苷、染料木素和异甘草素。银翘散抗流感病毒有效部位与组方各单味药有较好的相关性，建立的方法所测得的色谱指纹图谱特征性和专属性较强，可对中药复方及组成该复方的单味药成分的色谱指纹图谱进行快速比较分析，并为复方物质基础的阐明奠定了基础。     

延胡索活性部位入血成分的LC-MS/MS研究

为深入研究延胡索活性部位体内作用的物质基础, 本文利用LC-MS/MS提供的色谱及离子碎片信息, 对口服延胡索活性部位后大鼠血浆中的移行成分进行分析鉴定, 通过保留时间比对、离子碎片解析等综合分析, 鉴定了9个入血成分均为原形成分, 同时也发现部分生物碱是以葡糖醛酸结合物的形式存在。入血成分及代谢产物可能为延胡索体内直接作用的药效成分, 延胡索活性部位血清药物化学表征为阐明延胡索的药理作用及其机制提供了依据。     

清络方活性部位的化学成分研究

目的:研究清络方(苦参,青风藤、黄柏)活性部位的化学成分,阐明其抑制血管新生作用的物质基础.方法:采用硅胶、氧化铝、葡聚糖凝胶等多种柱层析手段,根据化合物性质和紫外、质谱、核磁光谱数据鉴定结构.结果:从清络方活性部位中分离得到17个化合物,其中的2个化合物:石虎柠檬素A和正二十六烷酸属首次在组成清络方的三味中药苦参、青风藤、黄柏中发现;根据结构类型和生源途径推测石虎柠檬素A很可能来源于黄柏,而正二十六烷酸来源于苦参.结论:分离得到的化合物能部分反映出该复方的活性部位.     

反相高效液相色谱法测定银翘散抗流感病毒有效部位群中醉鱼草苷的含量

目的 :建立反相高效液相色谱法测定银翘散抗流感病毒有效部位群中醉鱼草苷含量的方法。方法 :选用YWG-C₁₈色谱柱 (4 .6mmid×25 0mm ,10μm) ,乙腈-3%醋酸水溶液 (25∶75)为流动相 ,紫外检测波长为 326nm ,室温下对醉鱼草苷进行含量测定。结果 :醉鱼草苷进样量在 0.25～0.84μg与其峰面积积分值呈良好的线性关系 ,r=0.9997(n=5 ) ,平均加样回收率为 99.3% ,RSD为 1.82 %。结论 :本法简便、准确、快速 ;可作为银翘散抗流感病毒有效部位群的质量控制方法。     

高效液相色谱法分离测定辽吉侧金盏花中强心甙

作者使用甲醇一水作为流动相,在ODS 反相柱上分离测定了辽吉侧金盏花中强心甙。实验结果表明辽吉侧金盏花中含有生物学活性极强的K-毒毛旋花子甙和K-毒毛旋花子次甙-β及索马林,其含量分别为0.13±0.01%,0.071±0.005%,0.024±0.003%。     

肉苁蓉中苯乙醇苷的含量测定

目的建立肉苁蓉中苯乙醇苷的含量测定方法。方法选用测定波长333nm,以松果菊苷为对照品,采用大孔树脂-紫外分光光度法对肉苁蓉中苯乙醇苷的含量进行了测定。结果松果菊苷在8～40mg·mL-1范围内具有良好的线性关系,回归方程为Y=2.3010X-0.0041(r=0.9991),平均回收率为99.1%,RSD为0.4%。结论该方法操作简便,结果准确,重复性好,可用于肉苁蓉的质量控制。     

RP-HPLC测定银翘散抗流感病毒有效部位群中牛蒡子苷的含量

 目的 采用RP-HPLOC对银翘散抗流感病毒有效部位群中活性成分牛蒡子的含量进行测定。方法选用YWGC18色柱（250mm*4.6mm,10um），已腈-水（25：75）为流动相，紫外检测波长为278nm,室温下对牛蒡子进行含量测定。结果进行量在0.22～1.10 ug范围内，牛蒡子与其峰面积呈良好的线性关系（r=0.9998，n=5），平均加样回收率为100.01%；RSD为0.80%。结论本法简便、准确、快速；可作为银翘散抗流感病毒有效部位群的质量控制方法。     

肉苁蓉多糖的促淋巴细胞增殖作用

目的研究肝细胞生长因子（HGF）和表皮生长因子（EGF）对体外培养的SD大鼠肝脏干细胞增殖的时间和剂量效应,为肝脏疾病的基础和临床研究奠定基础。方法肝干细胞用无血清培养基培养,观察不同浓度和不同时间HGF、EGF及HGF和EGF联合对大鼠肝脏干细胞增殖的影响。结果从成体大鼠肝脏分离的肝干细胞体积小、外形及胞核为圆形或椭圆形。EGF组5-160ng／ml各浓度组、HGF组10～160ng／ml各浓度组增殖效应均明显大于对照组（P〈0．05）,且当HGF浓度为20ng／ml时,增殖效应明显大于与其它各组（P〈0．01）;HGF组加10ng／mlEGF组中,除1、5ng／ml外,其余各组增殖效应均明显大于对照组（P〈0．01）。20ng／mlHGF的时间效应实验结果表明,随着作用时间的延长,对干细胞有明显的增殖效应,于第5天达到高峰,第7天较第5天略有降低。10ng／mlEGF的时间增殖效应结果显示,随着时间的延长,于第7天达到高峰,但第7天与第5天相比没有显著差异。20ng／mlHGF和10ng／mlEGF联合对细胞的增殖效应结果显示,第1天作用不明显,于第3天达到高峰。结论EGF和HGF具有明显改善SD大鼠肝脏干细胞体外无血清培养条件的作用,对离体培养的大鼠肝脏干细胞增殖具有协同促进作用。     

YL-2000中黄芩苷在正常大鼠体内的药物动力学研究

ＹＬ 2 0 0 0是我们自行研制的中药二类新药 ,黄芩是该药中的主要组成药物之一 ,黄芩苷作为其主要有效成分对全方来说有一定的代表性。因此 ,本文研究的目的有两个 :一是完善目前黄芩苷药代动力学的研究 ;二是通过对该复方中黄芩苷药动学的研究 ,为该复方在临床运用提供理论依据。材料与方法1　仪器Ｗａｔｅｒｓ高效液相色谱仪ｍｏｄｅｌ4 90紫外检测器 ,ｍｏｄｅｌ6 0 0泵 ,Ｂａｓｅｌｉｎｅ色谱工作站 ;漩涡混合器 (ＷＨ ,江苏太仓通讯器材厂 ) ;ＴＧＬ 16Ｃ型高速离心机 (上海安亭科学仪器制造厂 ) ;恒温水浴箱 (北京医疗设备厂 )。2　药…