β-胡萝卜素和维生素C对白血病细胞c-myc基因表达的影响

为了研究β 胡萝卜素和维生素C(VC)对白血病细胞中c myc癌基因表达的影响 ,以探讨其抑制白血病细胞增殖的分子机理。分别添加不同浓度的 β 胡萝卜素和VC体外培养白血病细胞株HL 6 0 2 4、48、72h后 ,利用台盼蓝拒染法检测两种微量营养素对细胞增殖的抑制作用 ;同时取作用 2 4h的细胞利用Northern印迹杂交检测细胞中c myc基因的表达。结果发现 :VC(5、10、10 0 μmol L)对HL 6 0细胞增殖具有显著性抑制作用 (P <0 0 5 ) ,而且低浓度的VC(5 μmol L)对HL 6 0细胞的抑制作用出现较早。β 胡萝卜素三个剂量组 (10、5 0、10 0 μmol L)均可抑制HL 6 0细胞增殖 ,作用有显著性 (P <0 0 5 ) ,且呈剂量 效应关系。VC(5 μmol L)对HL 6 0细胞内c myc的表达没有显著性作用 (P >0 0 5 )。β 胡萝卜素 (5 0 μmol L)对HL 6 0细胞内c myc的表达有显著性促进作用 (P <0 0 5 )。提示VC抑制HL 6 0细胞增殖的效应与c myc的表达无关。β 胡萝卜素可能通过上调c myc基因的表达 ,进一步诱导白血病细胞凋亡 ,从而抑制白血病细胞增殖。     

后柱融合椎弓根钉内固定治疗胸腰椎骨折35例观察

胸腰椎骨折是脊柱常见骨折,由于胸腰段脊柱(T11～L2)处于两个生理弧度的交汇处,是应力集中之处,因此该处骨折十分常见,而胸腰椎爆裂性骨折又占该类骨折50%以上.目前治疗胸腰椎骨折的手术方式较多,根据骨折的类型、椎管占位程度、受伤时间等选择不同的术式,近年来随着内固定材料的改进、术中良好的监视设备、手术技术的成熟、胸腰椎骨折治疗正朝着创伤小、脊柱结构破坏小、功能恢复好的方向发展.     

胃粘膜的组织损害与抗损害在胃癌发病学上的重要作用

本研究选定多种对胃粘膜具有损伤作用或保护作用的因素,结合致癌剂,对胃粘膜的组织损害与抗损害在胃癌发病学上的作用进行了实验研究。结果表明,胃粘膜屏障的破坏与组织的反复损害是胃癌发病的一个重要条件,而保护胃粘膜对降低胃癌发生具有重要意义。     

微波在免疫组织化学染色中的应用

免疫组化染色是病理研究和临床诊断广泛应用的技术。但其经典的染色过程往往需要1～2天,时间较长。我们利用微波来处理免疫组化ABC法孵育过程中的石蜡切片,使整个染色时间明显缩短。显示出微波在免疫组化技术方面的实用价值。     

冷热循环对纳米填料树脂与牙本质粘接界面的影响

目的:探讨冷热循环对纳米填料树脂与牙本质粘接界面密合度的影响。方法:选完整离体人磨牙60颗随机均分3组,备邻洞后,用3M公司粘接剂(Adper Prompt)与该公司的光固化复合体F2000 Compomer(FT)、混合填料树脂FiltekTM Z250(ZT)和纳米树脂FiltekTM Supreme(FS)分别进行粘接充填,各组样本一半经2000次冷热循环(5℃和55℃),冷热循环组和非冷热循环组均经染料渗透实验,在体视显微镜下观测染料渗入界面的深度并用扫描电镜观察各组试件粘接界面的超微形态。结果:冷热循环前3种材料微渗漏深度差异无显著性(P>0.05),冷热循环后3种材料微渗漏深度差异有显著性(P<0.05),FS冷热循环测试前后的微渗漏深度差异有显著性,FT和ZT组冷热循环测试前后的微渗漏深度差异无显著性。扫描电镜下观察发现冷热循环可增大纳米树脂与粘接剂之间的裂隙。结论:冷热循环对纳米树脂与自酸蚀粘接剂的界面有负面影响。     

丙型肝炎病毒截短型核心基因表达载体的构建与表达

目的构建重组丙型肝炎病毒核心基因表达载体pVec-core,并进行原核表达。方法人工合成丙型肝炎病毒截短型核心基因至pUC57载体上,经双酶切后,将其克隆至原核表达质粒pVec中,测序正确后将重组质粒pVec-core转化入表达宿主菌BL21,经IPTG诱导表达核心蛋白,SDS-PAGE检测目的蛋白的表达情况。采用GST亲和层析方法纯化融合蛋白并进行Western印迹法验证。结果丙型肝炎病毒核心基因表达载体构建成功,重组菌表达出相对分子质量约为40.6 kD重组融合蛋白,并以可溶形式存在于菌体中。蛋白经谷胱甘肽琼脂糖凝胶纯化,得到纯度较高的目的蛋白。经Western印迹分析,该蛋白可与HCV患者阳性血清发生特异性结合反应,具有良好的抗原活性。结论核心抗原表达载体在原核表达系统中高效表达,为利用其作为诊断抗原及研究核心蛋白的其他生物学功能奠定了基础。     

镍化合物对大鼠肺泡巨噬细胞凋亡影响

目的 研究镍化合物导致大鼠肺泡巨噬细胞凋亡机制.方法 用Ni3S2和Ni2O3,对大鼠进行染毒,16个月后收集各组动物的肺泡巨噬细胞,运用流式细胞术(FCM)测定细胞的周期分布、胞内钙离子浓度和线粒体膜电位.结果 Ni3S2组大鼠肺泡巨噬细胞较对照组的凋亡率(%)明显增加[(8.6±5.5)和(2.2±0.7),P<0.05],胞内游离钙浓度增加((26.6±8.7)和(19.5±0.5),P<0.05],线粒体膜电位变小[(7.7±3.4)和(10.9±0.84),P<0.05].Ni2O3组较对照组的凋亡率和胞内游离钙浓度均增加,线粒体膜电位下降.结论 线粒体膜电位下降,胞内外Ca2+浓度的改变可能是造成染镍大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的原因.     

维生素C对镍诱导的肺泡巨噬细胞氧化损伤的保护作用

目的:研究维生素C(VC)拮抗Ni2O3的细胞氧化损伤的作用及对大鼠肺泡巨噬细胞iNOS诱导表达的影响。方法:采用体外细胞培养法测定在VC(25,50,100μmol/L)作用下,体外染镍肺泡巨噬细胞的死亡率及活力。同时观察细胞内丙二醛(MDA)、一氧化氮(nitricoxide,NO)和活性氧(ROS)的产生;超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、诱导型一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,iNOS)活力的变化以及应用RT-PCR法测定iNOSmRNA的表达。结果:在体外染镍肺泡巨噬细胞中加入不同浓度的VC后可降低该细胞的死亡率并提高细胞的活力,可减少MDA、NO和活性氧的产生,降低NOS的活性,提高SOD、GSH-Px、CAT的活性,iNOSmRNA表达也较镍组降低。结论:镍可致细胞脂质过氧化,VC可通过提高抗氧化酶的活性,抑制iNOSmRNA的表达,减少活性氧及NO的产生,拮抗镍对肺泡巨噬细胞的氧化损伤。     

经腰部小切口输尿管切开取石术26例报道

我院自１９９７年１０月～２００２年６月 ,采用经腰部小切口输尿管切开取石２６例 ,效果满意 ,现报道如下 :１资料与方法１．１临床资料 :本组２６例 ,男１５例 ,女１１例 ;年龄２１～６４岁 ,平均年龄４３岁 ;病程１周～２年 ,平均３个月 ;右侧输尿管上段结石１０例 ,左侧输尿管上段结石１６例 ;结石多为单个 ,均为单侧结石 ,结石最大１．９ｃｍ×１．２ｃｍ×１．０ｃｍ ,最小０．８ｃｍ×０．６ｃｍ×０．５ｃｍ。２６例均有不同程度患侧肾积水 ,结石近端输尿管扩张。１ .２手术方法 :采用硬膜外麻醉 ,取俯卧位 ,患侧垫高 ,头高脚低略有…     

含红色荧光蛋白DsRed2的RNA干扰载体pDsRed2-SilencerU6构建

目的构建含红色荧光蛋白DsRed2的RNA干扰质粒载体pDsRed2-SilencerU6,便于利用荧光显微镜、FACS等实验技术开展RNA干扰研究。方法质粒pDsRed2-N1中DsRed2蛋白的编码基因BbsⅠ酶切位点无意突变后,破坏pDsRed2-N1多克隆位点,PCR扩增CMV启动子、DsRed2蛋白基因片段并将其克隆至RNA干扰载体pSilencerU6,得到pDsRed2-SilencerU6质粒,利用脂质体转染技术将其转染HEK293T细胞,荧光显微镜、FACS检测转染效率。结果DsRed2蛋白编码基因序列BbsⅠ点突变正确,成功构建pDsRed2-SilencerU6载体,其在HEK293T细胞中可显著表达红色荧光蛋白,利用脂质体转染技术,转染效率达70.61%。结论成功构建含红色荧光蛋白DsRed2的RNA干扰载体pDsRed2-SilencerU6并在哺乳动物细胞中表达,为今后开展RNA干扰研究提供了基础。