葛花解酒涤脂汤对酒精性脂肪肝小鼠肝脏核受体PXR,CAR表达的影响

目的:探讨葛花解酒涤脂汤对小鼠酒精性脂肪肝(AFLD)的干预作用及对肝组织孕烷受体(PXR),组成性雄甾烷受体(CAR)表达的影响。方法:将29只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组,模型组,葛花解酒涤脂汤高、低剂量组。采用美国国立卫生研究院酒精滥用和酒精中毒研究所(NIAAA)方法制备AFLD小鼠模型,经鉴定成功后,分别灌胃给予高、低剂量葛花解酒涤脂汤(4.9,2.45 g·kg-1·d-1)。9 d后处死小鼠,收集血清及肝组织样本。酶联免疫吸附法检测血清中游离胆固醇(FCHOL)及甘油三酯(TG)水平,苏木素伊红(HE)染色检测肝组织损伤情况;实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法(Western blot)分析肝组织PXR,CAR mRNA和蛋白表达,及其调控的细胞色素P450氧化酶(CYP3A11,CYP3A25,CYP2B9,CYP2B10)基因表达水平。结果:与模型组比较,葛花解酒涤脂汤组小鼠肝脏脂肪变性显著减轻,并呈剂量依赖性。与模型组和空白组比较,葛花解酒涤脂汤组可显著上调PXR,CYP3A25表达水平(P0.01),明显增加CAR mRNA水平(P0.05)。与正常组比较,模型组血清游离胆固醇及甘油三酯水平水平显著增加(P0.01)。结论:葛花解酒涤脂汤能够显著改善小鼠AFLD,其作用机制可能与肝脏PXR及其调控基因CYP3A25表达的活化有关。     

家蝇幼虫血淋巴提取物抗肿瘤作用

目的 探讨家蝇3龄幼虫血淋巴40%固相萃取组分抗肿瘤作用及机制。方法 应用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测40%固相萃取组分对S180肉瘤细胞株生长的抑制作用;通过体内试验检测40%固相萃取组分对S180小鼠实体瘤生长的抑制率,测定荷瘤小鼠血清总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量变化。结果 在体外,40%固相萃取组分25 μg/mL对S180肉瘤细胞增殖抑制率最高达79%,与阴性对照组比较差异有统计学意义(t=6.40,P<0.05);40%固相萃取组分有抑制S180实体瘤小鼠肿瘤生长的作用,高、中、低剂量组肿瘤生长抑制率分别为46.23%、35.23%、32.13%;与模型对照组(3.19±0.80)、(163.41±22.65)U/mL比较,3个剂量组的血清T-AOC和SOD活性均升高,其中高剂量组小鼠血清T-AOC和SOD活性分别为(4.91±0.46)、(213.19±43.37)U/mL,差异均有统计学意义(t_T-AOC=7.12、t_SOD=-7.16,P<0.01);3个剂量组的血清MDA含量均降低,其中高剂量组血清MDA含量为(8.85±1.81)nmol/mL,差异有统计学意义(t_MDA=6.79,P<0.01)。结论 40%固相萃取组分在体外和体内均具有抑制S180肉瘤细胞生长的作用,清除自由基可能是其体内抗肿瘤机理。     

SFMC在子痫前期患者血清中的表达及其临床意义

目的 探讨血清可溶性纤维蛋白单体复合物(SFMC)在子痫前期发病机制中的作用.方法 20例轻度子痫前期(MPE)患者纳入MPE组,20例重度子痫前期(SPE)患者纳入SPE组,20例健康孕妇纳入对照组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组血清SFMC,全自动凝血仪检测各组凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)及D-二聚体(DD).结果 SPE组及MPE组血清SFMC均明显高于对照组,SPE组血清SFMC明显高于MPE组,差异有统计学意义(P<0.05);SPE组及MPE组DD均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但SPE组与MPE组DD比较,差异无统计学意义(P>0.05);3组PT、APTT及FIB比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 血清SFMC在子痫前期组高表达,可能参与了子痫前期的发病.     

AT-Ⅲ基因突变及多态性与颅内静脉系统血栓形成的相关性

目的探讨AT-Ⅲ基因突变及多态性与女性颅内静脉系统血栓形成(cerebral venous thrombosis,CVST)的相关性。方法采集南方医院生育期女性CVST住院患者50例及严格配伍的健康女性52例外周静脉血。采用ELISA法及发色底物法分别检测AT-Ⅲ抗原水平(AT-Ⅲ:Ag)、AT-Ⅲ血浆活性水平(AT-Ⅲ:A)。提取所有受试者全血DNA,PCR扩增后应用变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)技术分析抗凝血酶-Ⅲ(antithrombin,AT-Ⅲ)基因的启动子区,第1～6外显子及其侧翼序列的基因变异情况。结果病例组与对照组比较,AT-Ⅲ抗原含量水平相当(F=0.754,P=0.472),AT-Ⅲ活性明显降低(P<0.001)。DHPLC筛查发现突变位点1个已报道的致病突变Intron1 5+5 G>A突变,SNP位点5个,其中4个为SNP库已报道的SNP位点,1个为新发现的SNP位点。对照组亦发现4个为SNP库已报道的SNP位点。结论AT-Ⅲ基因突变可能是导致生育期女性CVST的遗传因素之一,功能性SN...     

家蝇幼虫血淋巴纯化蛋白对Hela肿瘤细胞抑制作用的形态学观察

目的 研究家蝇幼虫血淋巴纯化蛋白(anticancer protein from Musca domestica larva hemolymph,MAC-1)对体外培养的人官颈癌Hela细胞抑制作用引起的形态学改变.方法 应用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法、光学显微镜、HE和吖啶橙(AO)染色、透射电镜(SEM)的方法检测MAC-1对体外培养的人宫颈癌Hela细胞的抑制作用及形态学改变.结果 MAC-1对人宫颈癌Hela细胞株的增殖抑制作用呈剂量依赖性,同时呈时间依赖性.MAC-1 12.5 μg/ml作用12h后在倒置显微镜、HE及AO染色和透射电镜均观察到典型细胞凋亡形态变化.结论 MAC-1对人宫颈癌Hela细胞株具有抑制增殖及诱导凋亡作用.     

妊娠期糖尿病合并妊娠期高血压疾病血清差异蛋白的鉴定

摘要：目的寻找妊娠期糖尿病合并妊娠期高血压疾病的分子标记物,为筛查及防治该类疾病提供分子生物学基础。方
法收集妊娠期高血压疾病、妊娠期糖尿病、妊娠期糖尿病合并妊娠期高血压疾病患者的静脉血清标本各4份,去除高丰
度的免疫球蛋白和白蛋白。应用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）技术将可溶性血清总蛋白分离。切
取在不同样品中显示明显差异的蛋白条带,酶解后使用质谱技术对所得的差异蛋白进行鉴别。运用生物信息学分析差异
蛋白的生物学功能。结果将上述去除高丰度蛋白的标本进行3次重复的SDS-PAGE,确定了显示显著差异的蛋白条带。
质谱分析结果表明这些差异性蛋白分别为：结合珠蛋白、SMG8蛋白和凋亡诱导因子-1。结论为建立妊娠期代谢性疾病
的蛋白质数据库提供了基础性数据。鉴定了与该疾病显著相关的部分蛋白,为进一步预防该疾病、改善妊娠结局以及阐
明该疾病的分子机制提供了可参考的实验依据。     

广东省不同地域孕产妇围生期栓塞性疾病流行病学调查

目的 探讨广东省不同地域孕产妇围生期栓塞性疾病发病情况、流行病学特征及相关高危因素.方法 回顾性调查2005年1月至2010年6月广东省珠三角及粤东、西、北地区13家三甲医院共169218名孕产妇病历资料,分析妊娠期或产褥期栓塞性疾病的发病率及其流行病学特征.结果 (1)169 218名孕产妇中,栓塞性疾病共201例,发生率为1.3‰,其中妊娠或产褥期合并下肢深静脉血栓形成(DVT) 128例,合并颅内静脉窦血栓形成(CVT)68例,合并肺栓塞5例,发生率分别为0.8‰、0.4％、0.02‰.(2)珠三角地区孕产妇DVT发生前5位高危因素主要为既往血栓病史或血栓家族史、妊娠合并症、妊娠合并内科疾病、卧床时间＞3d、孕期体重增长＞15kg;粤东、西、北地区孕产妇DVT发生前5位高危因素主要为孕期体重增长＞15kg、卧床时间＞3d、子痫前期、剖宫产手术、妊娠合并症.珠三角地区孕产妇CVT发生前5位高危因素主要为子痫、子痫前期、妊娠合并症、卧床时间＞3 d、既往血栓病史或血栓家族史;粤东、西、北地区孕产妇CVT发生前5位高危因素主要为子痫、子痫前期、高龄或低龄妊娠、孕期体重增长＞15 kg、妊娠合并症.结论 不同地域围生期栓塞性疾病的发病率及危险因素存在着一定差异;对不同地域栓塞性疾病发病特点及发病高危因素采取有效措施,是预防和降低疾病发生的重要手段.