Resistin基因在肥胖易感大鼠与肥胖抗性大鼠脂肪组织中表达差异的研究

目的探讨高脂饮食诱导下肥胖易感(Obesity鄄prone,OP)大鼠与肥胖抗性(Obesity鄄resistance,OR)大鼠白色脂肪组织中Resistin基因mRNA表达的差异。方法25只雄性SD大鼠,以高脂高能量鼠料饲养2周后,按体重增值大小分组,增重最多9只为OP组,增重最少9只为OR组,余7只为正常对照组(C组),OP、OR大鼠继续饲以高脂高能量鼠料4周,对照组改饲标准鼠料。观察各大鼠体重变化、脂肪组织湿重、血脂、血糖、血清胰岛素等,并采用NorthernBlot技术分析脂肪组织中Resistin基因的mRNA表达水平。结果①高脂高能量鼠料诱导下,OP组大鼠体重、附睾周围及腹膜后脂肪组织湿重明显高于C组,OR组则显著低于C组,但各组间血脂、血糖、血清胰岛素水平并无显著差异(P>0.05);②OP组大鼠附睾周围和腹膜后脂肪组织中ResistinmRNA表达水平均显著高于C组与OR组,OR组则低于C组,且附睾周围脂肪组织中ResistinmRNA表达水平显著高于腹膜后脂肪组织。结论OP与OR大鼠外周脂肪组织存在Resistin基因mRNA表达的差异,其差异与大鼠发生肥胖的易感程度有关。     

VEGF?CD44v6?MMP-2在食管癌中的表达及与淋巴结转移的关系

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)、CD44拼接异构体(CD44v6)和基质金属蛋白酶(MMP-2)在食管癌中的表达,分析其与淋巴结转移的关系.方法:应用免疫组织化学方法检测VEGF、CD44v6、MMP-2在40例食管正常鳞状上皮和80例食管鳞癌组织中的表达.结果:80例食管癌标本中VEGF、CD44v6、MMP-2阳性表达率分别为76.3%、71.3%、66.3%,40例食管正常鳞状上皮VEGF、CD44v6、MMP-2阳性表达率分别20.0%、12.5%、7.5%,二者相比差异均有显著性(P＜0.05).VEGF、CD44v6、MMP-2在食管癌中的表达与肿瘤的淋巴结转移相关.44例有淋巴结转移的食管癌组织中VEGF、CD44v6、MMP-2表达阳性率分别为95.1%、84.1%、80.0%,36例无淋巴结转移者为61.1%、55.6%、50.0%.结论:VEGF、CD44v6、MMP-2在食管癌组织中呈高表达,其表达值与肿瘤的有无淋巴结转移有关,可作为食管癌浸润、转移的重要指标.     

定痫方对戊四氮致痫大鼠模型海马神经元凋亡的影响

目的:观察戊四氮(PTZ)致痫大鼠海马神经元凋亡以及定痫方(AAP)的脑保护作用。方法:144只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组(CK组)、模型组(PTZ组)、定痫方大剂量组(AAPl组)、定痫方中剂量组(AAPm组)、定痫方小剂量组(AAPs组)和丙戊酸钠组(VPA组);每组24只。CK组和PTZ组分别给予生理盐水(4 ml/kg体质量.d)灌胃;定痛方各组分别给予定痫方大、中、小剂量(10.26 g/kg体质量、5.13 g/kg体质量、2.56 g/kg体质量)灌胃,VPA组给予丙戊酸钠(20 mg/kg.d)灌胃,每日1次;连续7 d。造模第1天,除CK组外,其余各组大鼠均腹腔注射戊四氮(PTZ)75 mg/kg体质量,观察记录大鼠行为学变化;于致痫后12 h、2 d、5 d、7 d相应时间点取材,制备脑标本,TUNEL检测海马神经元凋亡。结果:致痫后,除CK组外,其余各组海马区凋亡细胞增加;7 d,与PTZ组相比,AAPl组凋亡神经元阳性表达减少(P<0.05)。结论:凋亡参与致痫大鼠海马神经元死亡过程;定痫方能减少神经元凋亡,有神经保护作用。     

不同剂量米非司酮配伍米索前列醇药物流产的研究

目的　探讨米非司酮配伍米索前列醇药物流产的方法 ,以提高药物流产的完全流产率。方法　 2 0 0 0年 7月 1日至 2 0 0 3年 12月 31日解放军 2 0 5医院将 2 0 32例早孕 35～ 4 9d行药物流产的妇女随机分为 4组 :即观察 1组、观察 2组、观察 3组和对照组。对照组 30 0例 ,米非司酮每日 5 0mg顿服连用 3d ,第 3次服药后 2 4h服米索前列醇 6 0 0 μg ;观察 1组 30 0例 ,观察 2组 82 4例 ,观察 3组 6 0 8例 ,米非司酮常规服药 2 4h后分别加服 5 0、75和 10 0mg ,米索前列醇用法同对照组。结果　按照观察 1组、观察 2组、观察 3组及对照组的顺序 ,完全流产率分别为 90 6 7%、99 88%、99 5 1%和 80 6 7%。胎囊排出时间分别为 (5 0 6± 1 5 6 )h、(2 74± 1 2 1)h、(2 6 9±1 19)h和 (6 4 5± 1 36 )h。阴道流血时间分别为 (10 80± 4 2 3)d、(7 81± 3 2 2 )d、(7 90± 2 91)d和 (13 90±5 4 2 )d。观察组完全流产率较高 ,胚囊排出时间和阴道流血时间较短 ,差异有显著性意义 (P <0 0 1)。观察 1组分别与观察 2组、观察 3组比较 ,完全流产率较低 ,胚囊排出时间和阴道流血时间较长 ,差异有显著性意义 (P <0 0 1)。观察 2组与观察 3组相近 ,差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。 4组副反应及月经复潮时间     

抵抗素结合多肽对3T3-L1脂肪细胞分化、脂代谢及葡萄糖转运体4基因表达的影响

目的观察抵抗素结合多肽（RBP）对3T3-L1脂肪细胞分化、脂代谢及葡萄糖转运体4（GLUT-4）基因表达的影响。方法构建大鼠抵抗素真核表达载体并转染3T3-L1前体脂肪细胞，获得稳定表达抵抗素基因细胞株；采用台盼蓝排斥试验，确定理想的RBP干预浓度，于诱导细胞分化第0天加入培养液；采用油红O染色，观察脂肪细胞分化及脂质积聚情况；采用RT-PCR技术检测脂肪细胞分化标志基因及GluT-4基因表达变化；采用全自动生化仪比色法，检测脂肪细胞内TG和游离脂肪酸FFAs含量的变化。结果（1）RBP浓度10^-12mol／L时，脂肪细胞活细胞数比例较高，且细胞形态无明显改变。（2）RBP对正常脂肪细胞分化进程无明显影响，RBP虽未影响抵抗素稳定表达脂肪细胞内脂滴的出现时间，但细胞内脂滴的数目明显减少。（3）RBP对正常脂肪细胞分化标志基因及抵抗素稳定表达细胞分化早期标志基因Pref-1的表达无明显影响，但明显下调抵抗素稳定表达细胞分化中晚期标志基因C/EBPα和FAS的表达水平。（4）RBP对正常脂肪细胞内TG、FFAs含量无影响，但可显著降低抵抗素稳定表达脂肪细胞内的TG、FFAs含量。（5）RBP干预对正常脂肪细胞及抵抗素稳定表达脂肪细胞中GluT-4基因的表达水平均无显著影响。结论RBP对正常3T3-L1脂肪细胞的分化、脂代谢、GluT-4基因表达均无明显影响，但能有效拮抗抵抗素基因，显著促进3T3-L1脂肪细胞分化及脂代谢。     

脂肪组织提取细胞及其临床展望

新近发现的脂肪组织提取细胞(PLA细胞)已成为干细胞研究的又一热点。PLA细胞不但具有自体来源、容易获取、再生能力强、低衰老性等特点。而且尚具备多向分化潜能，可定向分化为脂肪细胞、肌细胞、软骨细胞及成骨细胞等。该文对PLA细胞的基本特性及多向分化潜能进行综述，并探讨其在基因治疗中的优势和临床应用前景。     

长链脂肪乳对反复种植失败患者外周血Treg细胞比例失衡的调节作用

目的：探讨长链脂肪乳对反复种植失败（repeated implantation failure,RIF）患者外周血调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）比例失衡的调节作用。方法：选择2016年5—12月在南京鼓楼医院生殖中心行辅助助孕RIF患者75例,静脉长链脂肪乳治疗后分别用流式细胞技术检测外周血Treg细胞亚群比例。结果：75例RIF患者经静脉脂肪乳治疗后,外周血中Treg细胞亚群比例为（2.46±1.23）%,较治疗前的（2.30±0.83）%虽有所上升,但差异无统计学意义。进一步分析治疗前外周血Treg细胞比例异常降低的35例RIF患者,结果显示,静脉脂肪乳治疗后,该组RIF患者外周血中Treg细胞亚群比例为（2.18±0.64）%,较治疗前的（1.63±0.29）% 显著上升,差异有统计学意义（P < 0.001）。结论：长链脂肪乳对于RIF患者外周血Treg细胞比例失衡具有调节作用,可能在诱导免疫耐受,促进胚胎植入,降低流产率中发挥作用。     

完全受精失败周期应用早期补救性卵细胞胞质内单精子注射术的安全性评估

目的:评估完全受精失败周期应用早期补救性单精子卵细胞胞质内注射(ICSI)术的安全性。方法:105例早期补救性ICSI周期,随访临床结局。结果:早期补救性ICSI周期出生婴儿64名。出生婴儿的性别比无偏差,出生体重正常,无严重出生缺陷。结论:早期补救性ICSI没有增加临床应用的安全性风险,临床应用前景十分广阔。     

人胚胎干细胞系NJGLLhES1的建立

目的:使用人类冷冻胚胎建立新的人胚胎干细胞系。方法:将人类冷冻胚胎解冻后培养至囊胚,用免疫外科法分离内细胞团,以ICR小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,机械法传代。将此细胞系命名为NJGLLhES1,检测其核型,对其碱性磷酸酶和特异性标记物(Oct-4,SSEA-3,SSEA-4,TRA-1-60,TRA-1-81)进行鉴定,并进行类胚体形成实验及畸胎瘤成瘤实验,对其体内外分化能力进行检测。结果:NJGLLhES1已在体外培养逾1年时间。细胞呈人胚胎干细胞克隆样,具正常人类核型,碱性磷酸酶和胚胎特异性标记物的表达为阳性,可形成类胚体和畸胎瘤。结论:成功建立人胚胎干细胞系NJGLLhES1,此细胞系具人胚胎干细胞形态特征,可长期稳定增殖且保持不分化状态,核型正常,在体内外具有多向分化潜能。     

附睾及睾丸精子行ICSI治疗无精子症妊娠结局

目的 :回顾性分析 5 0例无精子症患者利用附睾或睾丸精子行卵细胞胞质内单精子注射 (ICSI)的治疗结局。　方法 :经皮附睾精子抽吸术 (PESA)或睾丸切开取精术 (TESE)获得精子行ICSI,评估取精的成功率 ,ICSI后的受精率、种植率及临床妊娠率 ,以精液精子ICSI组作为对照。　结果 :PESA、TESE与精液精子组分别注射MⅡ期成熟卵子 2 86、36 0、15 6 9个 ,受精率 3组差异无显著性 (74 .8% ,75 .2 %vs 77.5 % ,P >0 .0 5 )。种植率、妊娠率TESE与精液精子组差异无显著性 (2 9.87%vs 2 9.5 4 % ;4 8.15 %vs 5 2 .6 0 % ,P >0 .0 5 ) ,PESA组显著高于TESE组及精液精子组 (5 0 .85 %vs 2 9.87% ,2 9.5 4 % ;6 8%vs 4 8.15 % ,5 2 .6 0 % ,P <0 .0 5 )。PESA组共妊娠 17例 ,已分娩 6例 ,继续妊娠 9例 ,流产 2例 ;TESE组共妊娠 13例 ,已分娩 7例 ,继续妊娠 4例 ,流产 2例。　结论 :采用附睾或睾丸精子行ICSI是治疗男性无精子症的有效方法。