坐骨神经损伤大鼠模型鞘内移植神经干细胞后脊髓背角和背根神经节脑源性神经营养因子的表达

背景：坐骨神经损伤模型可测试伤害性的热刺激和机械刺激所引发的痛觉过敏及冷、触觉异常。 目的：观察坐骨神经损伤模型大鼠鞘内移植神经干细胞后脊髓背角和背根神经节脑源性神经营养因子的表达。 方法：72只SD大鼠随机均分为假手术组、对照组和实验组。对照组和实验组制作坐骨神经损伤模型,假手术组仅暴露坐骨神经,不结扎。分别于造模后第3,10天进行鞘内移植,实验组注入30 μL的神经干细胞悬液,空白组和对照组注入30 μL的细胞培养液。 结果与结论：与假手术组相比,对照组和实验组移植后3 d机械痛阈和热痛阈逐渐降低,至移植后7 d降低至最低点(P < 0.01),于移植后21 d恢复至移植前水平;实验组移植后7,14 d机械痛阈和热痛阈较对照组明显上升(P < 0.01)。与对照组相比,假手术组移植后7,14,21 d各组大鼠脑源性神经营养因子的表达呈低水平(P < 0.05);移植后14,21 d,实验组脑源性神经营养因子的表达量高于对照组(P < 0.05)。提示鞘内移植神经干细胞可提高脊髓背角和背根神经节中脑源性神经营养因子的表达。从而抑制了周围神经损伤产生的神经病理性疼痛。 关键词：脑源性神经营养因子;神经干细胞;慢性限制损伤;脊髓背角;背根神经节 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.10.031     

新型氧气输送和加湿装置的临床研究

目的为充分保证氧疗效果和患者安全,解决氧气湿化过程中普遍存在的湿化液污染、湿化产生噪音和吸氧干燥问题。方法选择急诊科病房吸氧患者60例为实验组,应用OT-MⅠ型一次性吸氧管,同期与对照组采用传统湿化方式吸氧患者60例进行比较,研究噪音产生、终端氧气湿度与患者反应的差异,检测氧气湿源物质内微生物生长的情况。结果对照组吸氧24h后的终端氧气的相对湿度为（48．3±13．7）％,鼻咽干燥发生率为100％,68．3％患者夜间对湿化噪音有明显感受,湿源物质内细菌阳性率为15％;实验组吸氧24h后终端氧气的相对湿度为（62．2±10．6）％,鼻咽干燥发生率为16．7％,噪音感受和细菌阳性率均为0;两组比较,差异有统计学意义（均P〈0．01）;对照组夜间噪音为（50．6±6．8）dB,实验组为（41．5±6．2）dB,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论OT—MⅡ型一次性吸氧管的仿生学氧气湿化及输送系统,在保证氧气加湿效果和按需足量输送的同时,消除了传统氧气湿化液污染的风险,降低了吸氧气泡噪音对睡眠质量的影响,改善了患者吸氧的适从性,进而有助于保证氧疗效果并保护患者安全。     

氨氯吡咪对大鼠慢性阻塞性肺疾病模型病理改变的影响

目的观察尿激酶型纤溶酶原激活物（u-PA）抑制剂氨氯吡咪对大鼠慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型病理及病理生理改变的影响，探讨u-PA系统成分在COPD发病中的作用。方法健康Wistar大鼠24只随机分为3组：正常对照组、模型组和氨氯吡咪组。7周后检测各组大鼠的肺功能，支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞计数及分类，天狼猩红染色观察支气管肺组织的胶原沉积，免疫组化染色观察u-PA、u-PA受体、纤溶酶原激活物抑制物1（PAI-1）的蛋白定位和表达。结果模型组大鼠的呼气阻力显著高于对照组和氨氯吡咪组，0．3s用力呼气容积／用力肺活量、呼气峰流速均显著低于对照组和氨氯吡咪组；模型组大鼠的BALF中自细胞总数、中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞构成比显著高于对照组和氨氯吡咪组；模型组大鼠以I型胶原为主的细胞外基质在气道壁过度沉积，胶原面积显著高于对照组和氨氯吡咪组；模型组大鼠支气管肺组织u-PA、u-PA受体和PAI-1蛋白表达的平均吸光度值[（0．166±0．010）、（0．158±0．024）和（0．171±0．012）]显著高于对照组[（0．137±0．015）、（0．122±0．009）和（0．144±0．005）]及氨氯吡咪组[（0．126±0．004）、（0．120±0．010）和（0．122±0．004）]，且u-PA受体蛋白表达与中性粒细胞构成比呈显著正相关。结论应用u-PA抑制剂氨氯吡咪可显著减轻COPD大鼠的气道炎症和病理结构改变，u-PA系统成分是COPD气道炎症和组织重塑环节中具有关联作用的重要物质。     

Notch1信号通路对小鼠触液神经元体外增殖能力的调节作用

【摘要】 目的：探讨Notch1信号通路在调节小鼠触液神经元增殖中的作用。方法：（1）取出生24h内C57BL/6小鼠延髓组织，消化后提取细胞，经流式细胞分选得到触液神经元（cerebrospinal fluid-contacting neurons, CSF-cNs）。将CSF-cNs悬浮培养并传代。（2）将CSF-cNs传至第2代，培养0h、24h、48h、72h、96h、120h时应用CCK-8法检测CSF-cNs 光密度（optical density，OD）值，培养5d时应用免疫荧光检测CSF-cNs特异性标志物多囊肾病2型1通道蛋白（polycystic kidney disease 2 like 1，PKD2L1）与神经干细胞标志物Nestin、Sox2及增殖标志物Ki67共表达情况。（3）将第3代CSF-cNs分为4组：对照组、Jagged-1组、二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）组、γ-分泌酶抑制剂（3，5-二氟苯乙酰基）-L-丙氨酰基-L-2-苯基甘氨酸叔丁酯[（3，5-difluorophenylacetyl）-L-alanyl-L-2-phenylglycine tert-butyl ester，DAPT]组。对照组采用无血清神经培养液培养；Jagged-1组采用无血清神经培养液+5μmol/L Jagged-1培养；DMSO组采用无血清神经培养液+0.05% DMSO培养；DAPT组采用无血清神经培养液+50μmol/L DAPT培养。培养0h、24h、48h、72h、96h、120h时应用CCK-8法检测各组CSF-cNs的OD值；培养5d时应用Western Blot检测各组CSF-cNs PKD2L1、Notch1、Notch受体胞内段（NICD）、Hes1、β-actin蛋白表达情况，应用免疫荧光法检测各组CSF-cNs增殖标志物Ki67蛋白荧光强度（arbitrary unit，A.U.）值。结果：（1）提取的细胞经流式细胞分选后得到的CSF-cNs纯度为（94.5±2.03）%，存活率为（93.64±2.35）%。CSF-cNs可连续传代并形成神经球。（2）第2代CSF-cNs培养0h、24h、48h、72h及96h时的OD值具有统计学差异（P<0.05），96h与120h的OD值无统计学差异（P=0.44）。CSF-cNs中PKD2L1可与Nestin、Sox2或Ki67共表达。（3）第3代CSF-CNS分组处理后各组细胞PKD2L1蛋白表达量无统计学差异（P=0.27）。Jagged-1组细胞Notch1、NICD、Hes1蛋白表达量均较对照组升高（P＜0.01）；72h、96h、120h的OD值较对照组均显著性升高（P72h=0.03，P96h=0.02，P120h=0.01）；Ki67蛋白A.U.值较对照组显著性升高（P＜0.01）。DAPT组细胞Notch1、NICD、Hes1蛋白表达量较对照组均显著性减低（P＜0.01）；72h、96h、120h的OD值与对照组比较均显著性降低（P<0.01）；Ki67蛋白A.U.值较对照组显著性降低（P<0.01）。DMSO组各项指标与对照组比较均无统计学差异（P>0.05）。结论：CSF-cNs在体外具有神经干细胞潜能；激活Notch1信号通路可增强CSF-cNs的增殖能力，抑制Notch1信号通路可降低CSF-cNs的增殖能力。