采用核转染技术建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1的真核细胞系

目的 建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1（soluble human leucocyte antigen G1，sHLA—G1）的真核细胞系。方法 采用核转染技术将质粒pcDNA3一sHLA—G1转入不表达HLA—1类分子的LCL721．221细胞，经G418筛选获得稳定转染细胞，通过RT—PCR及Dot—ELISA在基因和蛋白水平鉴定目的基因的表达。结果 采用核转染法LCL721．221细胞转染效率可以达到约14％。RT—PCR检测发现了sHLA—G1基因特异性条带；采用Dot—ELISA方法利用sHLA—G1特异性抗体MEM—G／9检测，存在sHLA—G1蛋白。结论 通过核转染方法成功建立了稳定表达sHLA—G1的真核细胞系。     

人类白细胞抗原G1转染猪内皮细胞降低异种细胞排斥反应的研究

目的研究转染人类白细胞抗原G1(humanleukocyteantigenG1,HLA-G1)基因后的猪内皮细胞系(porcineendothelialcells,PECs)细胞,对人外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)和自然杀伤细胞92(naturekillercell92,NK-92)细胞介导的杀伤作用的改变。方法利用脂质体包裹的方法,将携带HLA-G1基因的真核表达载体pcDNA3.0转染PECs细胞,在蛋白质水平通过间接免疫荧光法、在RNA水平通过RT-PCR,检测HLA-G1的表达;取6名健康志愿者,每人5ml静脉血,分离出单个核细胞和NK-92作为效应细胞,利用51Cr释放试验来检测其杀伤作用的改变。结果转染HLA-G1基因后,在转染的内皮细胞中蛋白质水平和RNA水平均检测到HLA-G1基因的表达;PBMC和NK-92细胞介导的对PECs细胞的杀伤作用均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论转染HLA-G1后的PECs,可有效地降低由人NK细胞介导的杀伤作用,从而为抑制异种细胞排斥反应提供了新的思路。     

大鼠烫伤后不同时间、不同厚度皮片移植对p53基因表达的影响

目的：了解大鼠深Ⅱ度烧伤后不同时间、不同厚度皮片移植对细胞增殖的抑制因子-抑癌基因p53基因表达影响。方法：实验于2002—07／2003—08在第四军医大学西京医院烧伤外科实验室及基础部生物化学实验室完成。每只大鼠背部两处1％深Ⅱ度烫伤，行自体刃厚、全厚皮片移植，移植时间分别为：伤后即刻、伤后1周、伤后2周，在皮片移植术后的1，2，3，4周时间点取材，每个时间点5个标本。提取标本组织总mRNA，行p53基因及内参照PCR扩增，电泳后比较各时间点总光密度值。结果：在伤后即刻、伤后1周及伤后2周皮肤移植p53基因表达量为0．82&;#177;0．12，0．72&;#177;0．09，0．65&;#177;0．07，刃厚、全厚皮片移植后p53基因表达量为0．63&;#177;0．06，0．85&;#177;0．11，在不同移植时间组及刃厚与全厚皮片组间比较差异均有非常显著性意义(P&;lt;0．01)，p53基因在大鼠的创伤愈合中表现出了与尽早皮片移植及移植物厚度上的正相关性。结论：p53参与了大鼠烧伤后皮肤移植后的创伤愈合，尽快及尽可能厚的皮肤移植有助于p53表达的增高，可能与减少瘢痕形成有关。     

环扎术治疗女性尿道粘膜脱垂五例报告

环扎术治疗女性尿道粘膜脱垂五例报告袁申如，庞书舰，王树森我院自１９８７年至１９９２年共收治女性尿道粘膜脱垂５例，均行尿道粘膜环扎术治愈，现报告如下。１临床资料见附表。２方法与结果本组例２、例３、例５合作，无需麻醉；例１、例４因年龄小不合作而采用全麻。...     

恶性淋巴瘤的疗效评价-国际工作组标准与修订标准的比较

背景及目的:取得完全缓解以期获得长期生存是我们治疗恶性淋巴瘤的最终目标.常规CT评价淋巴瘤疗效具有难以鉴别小淋巴结性质、区别活动性病灶及纤维组织增生等缺陷,正电子发射断层显象(PET)在鉴别病灶的良、恶性,治疗前的分期以及治疗的疗效评价和疗效监测等方面具有无创性、高敏感性和准确性等优点,国际淋巴瘤协调计划的专家们被召集起来对淋巴瘤的评价标准进行修订更新.本研究拟评价相对于国际工作组标准(IWG),结合PET的疗效评价修订标准是否更能准确评价恶性淋巴瘤疗效.方法:2001年1月～2007年1月,113例(男性76例,女性37例)患者入选本研究,中位年龄是40岁(5岁～79岁).所有病例均经病理学证实为NHL或HL,并按WHO进行分型.按Ann Arbor临床分期,Ⅰ期患者14例;Ⅱ期患者34例;Ⅲ期患者39例;Ⅳ期患者26例.化疗以含有蒽环类的药物为主,按常规的方法和剂量进行放疗.所有患者在化疗结束后均进行了PET的检测.结果:IWG标准,62例患者CRu,4名患者CR,41例患者PR,1例SD,5例PD;根据修订标准,80例患者CR,22例患者PR,2例SD,9例PD,没有患者CRu.多变量分析显示,PET检查为有意义的独立预后因素(P=0.0049).按两种评价标准评价为CR的患者的PFS无统计学差异;而按修订标准评价的非CR患者的PFS低于按IWG评价标准评价的非CR患者(P= 0.01).修订标准评价的非CR患者的PFS明显低于CR患者(P=0.00).T细胞淋巴瘤患者按修订标准评价的CR和非CR的患者PFS无统计学差异(P=0.797).结论:与IWG标准相比,修订标准为淋巴瘤患者提供了一种更精确的疗效评价体系.对于不可治愈或FDG敏感性不确定的患者,尤其是T细胞淋巴瘤,PET的应用仍值得商榷.     

坐骨神经损伤后脊髓后角P物质及降钙素基因相关肽的变化

周围神经损伤后不仅在损伤局部及末梢有着相应的变化，其在中枢的神经元胞体也将发生一系列的生物学变化〔１〕。神经元的功能活动主要表现在电位的改变和各种神经递质的变化，尤其是各种神经肽的变化。为此，本课题以切断大鼠坐骨神经并结扎其近端的方法建立周围神经损伤...     

无水乙醇注射后行前列腺切除术的体会

前列腺增生症是中老年男性常见病之一,开放性手术仍是治疗的主要手段之一,而减少术中术后出血则是该手术应着重解决的问题。1990年1月至1992年1月,我们采用无水乙醇注射后再行前列腺切除术47例,止血效果较好,无显著并发症,现报告如下。1 资料与方法1.1 一般资料本组共47例,年龄56～86岁;病程10天～10年。1.2 操作方法经耻骨上切开膀胱,充分显露膀胱颈部,在增生的前列腺包膜内按3、5、7、9点方向用8号或9号针     

白细胞介素-5在慢性排斥反应中作用机制的探讨

目的通过观察白细胞介素-5(IL-5)对人嗜酸性粒细胞 (Eos) 中转化生长因子TGF-β1基因表达的影响,以阐明其在Eos相关性慢性排斥反应中的作用.方法采用改良的密度梯度离心法分离并体外培养人外周血Eos,以未加任何细胞因子的孔作为阴性对照,试验组加入不同浓度的IL-5 (10-11, 10-9, 10-7 mol/L)共培养,台盼蓝拒染法观察细胞活力变化,培养16 h后收集细胞和细胞培养上清液,应用RT-PCR和ELISA方法通过检测转化生长因子TGF-β1 mRNA和蛋白表达的量观察IL-5的调控作用.结果与对照组(228.9±2.87)相比,3种浓度的(10-11, 10-9, 10-7 mol/L)Th2型细胞因子IL-5均能显著增强体外培养的Eos中TGF-β1蛋白的表达(335.13±9.43, 403.7±0.09, 426.0±0.05), P<0.05, 处理组mRNA的量分别为对照组的1.42,1.70和1.76倍(P<0.05).结论 Th2型细胞因子IL-5可能通过上调TGF-β1的基因表达在Eos相关性慢性排斥反应中发挥作用.