基于UPLC-ESI-MS/MS的何首乌中12种真菌毒素污染检测

通过测定何首乌中多种真菌毒素的含量,探讨其致肝毒性原因。采用高效液相色谱-串联质谱法检测何首乌中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2,赭曲霉毒素A,B,T-2毒素,HT-2毒素,伏马毒素B1,B2,玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镰刀菌烯醇共12种真菌毒素的含量。样品采用改良的Qu ECh ERS方法提取,使用Welch Ultimate XBC18色谱柱(4.6 mm×100 mm,2.5μm)分离,甲醇-含0.1%乙酸的2 mmol·L~(-1)醋酸铵水溶液为流动相梯度洗脱,多反应监测模式下测定,外标法定量。结果表明,12种真菌毒素在0.1~200μg·kg~(-1)线性关系良好,相关系数为0.996 3~0.999 9,加标回收率为71.19%~98.68%,相对标准偏差为1.7%~13%。该方法操作简单、准确、灵敏,可用于何首乌中多种真菌毒素的快速测定。结果显示,41批样品中的15批检出了真菌毒素,涉及毒素类型有AFB1,AFG2,FB1,OTB,T-2,HT-2,FB2和OTA共8种,毒素在0.51~1 643.2μg·kg~(-1)。其中1批制首乌中检测到AFB1,达6.8μg·kg~(-1),超出了其在2015年版《中国药典》中的限量标准(5μg·kg~(-1))。AFB1具有明确的肝毒性。因此,推测何首乌在产地加工、储存运输过程中产生的少量霉变样品是其导致肝损伤的重要因素之一。     

连翘属药用植物化学成分研究进展

目的:探讨连翘属药用植物化学成分研究概况。方法:总结国内外相关文献,综述连翘属药用植物所含化学成分的种类、数量及结构。结果:目前已从连翘属药用植物中分离出苯乙醇苷类20个,木脂素类18个,C₆-C₂天然醇类13个,萜类13个,黄酮类5个,还有一些挥发油及其他类成分。结论:通过对该属药用植物化学成分的系统总结,对开展本属其它药用植物的研究有很好的参考价值。     

华重楼地上部分新的甾体皂苷类成分

重楼药材的供不应求促进了对其基原植物地上部分废弃资源的综合利用与开发研究。前期基于液质联用技术明确了华重楼地上部分的化学组成,并从中分离得到一系列黄酮和甾体皂苷类成分,该研究继续针对基于液质联用技术发现的潜在新化合物进行分离和结构鉴定研究。采用硅胶、ODS、Flash快速制备等柱色谱技术,结合制备高效液相色谱,从华重楼地上部分75%乙醇提取物分离得到5个化合物,通过波谱数据结合化学转化的方法鉴定了5个化合物的结构,分别为(23S,25R)-23α,27-二羟基薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、(25R)-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-呋甾-5-烯-3β,22α,26-三醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、(25R)-27-O-β-D-吡喃葡萄糖基-5-烯-3β,27-二羟基螺甾-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)]-...     

HPLC测定胆南星中猪去氧胆酸的含量

目的：建立胆南星中猪去氧胆酸含量测定方法,为其质量控制提供方法。方法：用HPLC-蒸发光散射检测测定样品的猪去氧胆酸含量。色谱和检测条件：Diamonsil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),柱温35 ℃；流动相甲醇-水-冰醋酸(75∶25∶0.01),流速1 mL·min^{-1；漂移管温度85 ℃,空气流速3.0 L·min-1。结果：猪去氧胆酸进样量在2.4～24 μg,进样量和峰面积的对数呈线性(r= 0.999 8)。平均加样回收率为97.1%,RSD 3.0%(n=5)。结论：方法简便,测定准确,且重复性好,可用于胆南星的质量控制。}     

何首乌肝毒性物质基础探索研究

通过观察何首乌中蒽醌类成分对Hep G2细胞的细胞毒作用,并通过精密肝切片技术对细胞毒成分进行验证,探讨何首乌致肝毒性的物质基础。运用MTT法检测何首乌中游离蒽醌、结合蒽醌及柰类共11个单体成分对Hep G2细胞的毒性。将有明确细胞毒的成分与大鼠肝切片共同培养6 h后制备肝组织匀浆,通过BCA法测定匀浆液中蛋白含量,连续监测法测定并计算每1μg蛋白中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰氨基转肽酶(GGT)和乳酸脱氢酶(LDH)的漏出率,以考察这些成分对肝组织的毒性作用。细胞试验结果显示,只有大黄酸、大黄素、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素甲醚-8-O-(6'-O-乙酰基)-β-D-葡萄糖苷显示一定的细胞毒作用,其IC50分别为71.07,125.62,242.27,402.32μmol·L-1,而其他7个化合物的毒性很小。肝切片试验结果显示,大黄酸400μmol·L-1组能引起肝切片ALT,AST,LDH漏出率的显著升高(P0.01),100μmol·L-1组能引起肝切片LDH漏出率的显著升高(P0.05);随药物浓度增大,肝切片中蛋白含量显著下降(P0.05),显示有一定的量毒关系。大黄素400μmol·L-1组可引起肝切片ALT,GGT,LDH漏出率的显著升高(P0.01)。大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷800μmol·L-1组能引起肝切片ALT,AST,LDH漏出率的显著升高(P0.01或P0.05),200μmol·L-1组能引起肝切片LDH漏出率的显著升高(P0.05);且随药物浓度的增大肝切片中ALT,AST,LDH漏出率呈升高趋势,蛋白含量呈下降趋势。此外,浓度为800μmol·L-1的大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷还可使肝切片MTT还原能力显著下降(P0.01)。结果提示,大黄酸、大黄素及大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷只有在高浓度(≥400μmol·L-1)时才可能对肝组织产生一定的损害作用。但是,据文献报道这3个成分的体内暴露水平都很低,要达到毒性浓度(400μmol·L-1或800μmol·L-1)的暴露水平,转化为健康成人至少分别需要单次口服4 898,339,5 581 g的何首乌药材,这与何首乌的临床使用剂量(生首乌3~6 g,制首乌6~12 g)相差甚远,因此,"蒽醌类成分是何首乌肝毒性成分"这一说法是缺乏科学依据的。     

基于HPLC指纹图谱与核苷类成分含量测定的鸡内金质量评价研究

鸡内金为雉科动物家鸡Gallus gallus domesticus的干燥沙囊内壁,是中医临床常用的消食类中药。但由于质地和组成的特殊性,其有效成分至今未明确,也缺乏质量评价指标。该研究采用UPLC-Q-TOF-MS对鸡内金水提液的化学成分进行分析,首次从中鉴定出10种核苷类成分;采用HPLC建立了鸡内金水提液的指纹图谱,并对7种核苷类成分进行定量分析。40批鸡内金样品指纹图谱相似度为0.765～0.959,表明不同炮制方法的鸡内金饮片差异较大。进一步采用SPSS 22.0和SIMCA 14.1软件对鸡内金19个共有峰的峰面积进行聚类分析和主成分分析,40批样品可按生鸡内金、炒鸡内金、醋鸡内金明显分为3类;采用正交偏最小二乘法判别分析标记了鸡内金中8个差异性成分,其中2个为腺嘌呤和胸腺嘧啶。含量测定结果表明,7种核苷类成分总量在生鸡内金、炒鸡内金、醋鸡内金中分别为182.5～416.8、205.3～368.7、194.2～283.0μg·g^-1。次黄嘌呤、胸腺嘧啶和胸苷的含量在不同炮制方法的饮片间均存在显著性差异(P<0.05),从高到低排序均为炒鸡内金&g...     

潜在Procaspase-3激活剂的设计、合成及活性评价研究

目的 本研究设计并合成一系列新的半胱天冬酶-3(procaspase-3)激活剂,同时进行分子模拟研究和抗肿瘤活性评价。方法 以具有苯丙-2-烯酸结构的反式阿魏酸为原料,设计并合成了系列苯丙烯类化合物。采用分子模拟技术构建procaspase-3激活剂的药效团模型,选择最优药效团模型预测目标化合物的活性。利用CCK-8法研究目标化合物对肺癌细胞系A549半胱天冬酶-3(caspase-3高表达)和乳腺癌细胞系MCF-7(caspase-3不表达)的体外抗增殖活性。结果 共设计并合成了29个目标化合物,其中包含26个新化合物。药效团模型预测结果显示有23个目标化合物活性优于阳性对照PAC-1。肺癌细胞系A549的体外抗增殖活性结果表明有20个目标化合物优于阳性对照PAC-1,其中活性最优的化合物AWS-XAPI-06的半抑制浓度(IC₅₀)值为8.99μmol·L^-1。乳腺癌细胞系MCF-7的体外抗增殖活性结果表明在30μmol·L^-1给药浓度下目标化合物和阳性对照PAC-1的抑制率均较差。结论 该系列化合物对Procas...     

一测多评法同时测定没食子药材及制剂西帕依固龈液中5个没食子鞣质

目的:建立同时测定没食子药材及制剂西帕依固龈液中没食子酸(GA)、1-没食子酸酰葡萄糖(1-GG)、没食子酸甲酯(MG)、1,2,3,6-四没食子酰葡萄糖(TeGG)和1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖(PGG)5个没食子鞣质的一测多评方法(QAMS)。方法:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS)法,对没食子药材的主要没食子鞣质进行定性鉴别,并确定待测成分;采用HPLC建立多成分同步测定方法,色谱柱为Phenomenex C₁₈柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为乙腈(A)-0.2%磷酸溶液(B),梯度洗脱(0～20 min, 3%A→8%A;20～30 min, 8%A→10%A;30～70 min, 10%A→15%A;70～100 min, 15%A→18%A;100～120 min, 18%A→30%A),流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,检测波长275 nm。以GA为内参物,采用斜率法,分别建立1-GG、MG、TeGG、PGG的相对校正因子(RCFs),并考察其耐用性。采用Q...     

广枣果皮总原花青素纯化工艺及成分鉴定研究

该文以工业废弃物广枣果皮为研究对象,首先根据高效液相色谱法(HPLC)和质谱图谱比对结果,确定了广枣果皮总原花青素纯化工艺考察过程中的定量标志物.基于2个稳定存在的原花青素类成分为标志物,优化总原花青素的纯化工艺,考察了 5种不同大孔吸附树脂的吸附和解吸附能力、NKA-Ⅱ树脂的静态吸附动力学曲线、最大上样量和洗脱梯度等...     

黄连须根提取物生物碱类成分及抑菌活性研究

目的:在黄连的采收加工过程中,大量的黄连须作为农业废弃物而丢弃,为探索其在植物源农药方面的应用价值和前景,对黄连须根的化学成分及其含量进行测定,并对其提取物和单体成分进行活性筛选.方法:采用酸水提取,制备黄连须根提取物,采用超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS)对其生物碱类成分进行定性分析,指...