乳腺实性乳头状癌伴浸润性癌临床病理分析

目的探讨乳腺实性乳头状癌(solid papillary carcinoma,SPC)伴浸润性癌的临床病理特点、组织学特征和免疫表型。方法收集乳腺SPC伴浸润性癌8例,总结该组病变的临床资料,采用HE及免疫组化En Vision两步法染色检测组织病理学特征。结果乳腺SPC伴浸润性癌好发于老年女性,平均发病年龄55.5岁,其发生率约占SPC总病例的30%。肿瘤最常见的临床特征为乳腺肿块和乳头溢液,伴浸润癌常见的类型为乳腺非特殊类型癌和黏液癌,亦常伴神经内分泌分化。SPC伴浸润性癌时,浸润癌周边及其癌巢内肌上皮染色均为阴性。SPC与伴随的浸润癌区域ER、PR均阳性且阳性率较高(≥70%),HER-2均阴性,Ki-67增殖指数均≤10%。神经内分泌免疫组化标记Cg A及Syn均双阳性或单个阳性。结论 SPC可能是低级别乳头状导管原位癌的变异型,其具有进展为其他类型乳腺浸润性癌的潜能。SPC可能为伴神经内分泌分化乳腺黏液癌及非特殊类型癌原位癌阶段的病变。     

KLKs基因表达对卵巢癌恶性度评估初探

目的：研究激肽释放酶（kallkarein)KLK10及KLK11在卵巢癌组织中的表达。方法应用IHC技术检测18例正常卵巢组织、32例良性卵巢肿瘤以及43例卵巢癌组织中KLK10，KLK11的hkn蛋白表达。结果 KLK11在健康卵巢、卵巢良性肿瘤、卵巢癌上皮组织细胞中阳性率分别为77.7%、78.1%、53.5%；KLK10分别为83.3%、78.1%、46.5%；Klk11于卵巢癌组织中的表达比正常的卵巢组织和良性的卵巢肿瘤组织表达的水平要低，差异有统计学意义（P<0.05）；Klk10于卵巢癌组织中的表达比其在正常的卵巢组织和良性的卵巢肿瘤组织表达的水平要低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论卵巢癌的组织中一般存在KLKll和KLK10表达水平的下调，表明卵巢癌当中KLKH的表达失调，这一点对卵巢癌的临床诊断以及预后的意义深远。     

反义miR-21对荷人宫颈鳞癌裸鼠移植瘤生长和凋亡的影响

目的 构建荷人宫颈鳞癌裸鼠移植瘤模型,探讨干扰miR-21 表达对移植瘤生长、凋亡的影 响.方法 将人工合成的反义寡核苷酸ASODN(AS-miR-21)转染SiHa 细胞(抑制组),同时设阴性对照组和 空白对照组,对数生长期的SiHa 细胞分别接种于裸鼠皮下,绘制肿瘤生长曲线并计算肿瘤生长率.当肿瘤 体积达0.2 cm3 时采用AS-miR-21 多点瘤周注射,观察其对移植瘤的影响.应用免疫组化技术、荧光TUNEL 检测移植瘤细胞增殖活性和凋亡情况.结果 (1)成功构建人宫颈鳞癌裸鼠皮下移植瘤模型,抑制组、阴性 对照组及空白对照组成瘤率分别为37.5%、75.0%、100.0%,瘤体平均体积为(732.80 ±56.32 ) mm3 、(1228.46 ±78.53)mm3 、(1301.26 ±80.63)mm3,平均生长率为18.32%、30.71%和32.53%,瘤重为(0.73 ± 0.05)g、(1.26 ±0.12)g 和(1.35 ±0.25)g,抑制组与阴性、空白对照组比较差异均有统计学意义(P <0.05); (2)免疫组化显示抑制组裸鼠瘤体Ki67 表达显著下降;荧光TUNEL 凋亡检测显示抑制组裸鼠肿瘤细胞凋亡 率明显增多;(3)注射治疗剂量AS-miR-21 两周后观察肿瘤组织局部坏死严重,胞核裂解、消失,凋亡明显增 加.结论 AS-miR-21 可下调裸鼠人宫颈鳞癌移植瘤中miR-21 的表达,抑制移植瘤生长和促进其凋亡.     

上调miR-143表达对CasKi人宫颈鳞癌细胞系增殖与凋亡的影响

目的探讨miR-143对CasKi宫颈鳞癌细胞增殖与凋亡活性影响。方法应用荧光定量RT-PCR法检测miR-143在人宫颈鳞癌组织中表达水平,以及miR-143在CasKi细胞株中表达水平与变化;人工合成miR-143模拟体转染CasKi宫颈鳞癌细胞系,采用流式细胞技术、MTT等实验方法探讨上调miR-143表达对CasKi癌细胞增殖活性与凋亡影响。结果宫颈鳞癌组织与宫颈鳞癌细胞株CasKi中miR-143表达水平较正常宫颈组织明显下调,其中2例鳞癌组织未能检测出miR-143表达。miR-143 mimics转染组miR-143表达显著高于空白对照组;MTT检测结果表明miR-143 mimics转染组中细胞增殖抑制明显,且抑制效应自转染48 h开始显现。细胞周期检测结果显示miR-143 mimics转染组G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少,组间差异有统计学意义(P0.05)。荧光TUNEL检测结果亦显示miR-143 mimics转染组细胞凋亡率增加(9.45±2.31)%,高于阴性对照组(4.03±1.35)%与空白对照组(3.85±1.61)%,组间差异具有统计学意义(P0.05)。结论上调miR-143表达可抑制宫颈鳞癌细胞增殖活性,影响宫颈鳞癌细胞周期和诱导宫颈鳞癌细胞凋亡。     

基于HPLC-LTQ-Orbitraps-MSn分析比较酸枣仁-五味子药对单煎液和合煎液化学成分

目的 对酸枣仁-五味子药对单煎液、合煎液（2∶1）化学成分进行分析,探究该药对配伍合煎后化学成分的变化。方法 采用高效液相色谱-线性离子阱串联静电场轨道阱质谱法（HPLC-LTQ-Orbitraps-MSⁿ）,在电喷雾离子源（ESI）的正、负离子模式下,采用傅里叶变换高分辨全扫方式（TF,Full scan,Resolution 30 000）数据依赖性（data-dependent acquisistion ）ddMS² 和 ddMS³方法分别对酸枣仁-五味子药对单煎液、合煎液（2∶1）采集数据。根据保留时间、高分辨质谱精确相对分子质量和多级碎片信息进行分析。结果 对酸枣仁单煎液中共50个色谱信号进行化学成分鉴定,指认出10个（黄酮类6个、生物碱类2个、皂苷类2个）近10年报道过指纹图谱分析或含量测定的化合物;对五味子单煎液中共32个色谱信号进行化学成分鉴定,指认出10个（均为木脂素类）近10年报道过指纹图谱分析或含量测定的成分;对酸枣仁-五味子药对（2∶1）合煎液中共50个色谱信号进行化学成分鉴定,指认出19个（黄酮类5个、生物碱类1个、皂苷类1个、木脂素类12个）近10年报道过指纹图谱分析或含量测定的成分,这些成分在各自单煎液中均已被指认。合煎液中未检出酸枣仁单煎液中检出的酸枣仁皂苷B,但检测到1个五味子单煎液中缺少的离子峰,系来自五味子药材的木脂素类同分异构体。结论 通过HPLC-LTQ-Orbitraps-MSⁿ,初步发现酸枣仁-五味子药对（2∶1）配伍前后化学成分的变化,为进一步研究两者的配伍作用机制提供参考。     

胎儿心脏三血管气管平面在先天性心脏病筛查中的价值

目的 探讨胎儿三血管气管平面的声像图特点及其筛查胎儿先天性心脏病的价值。方法 回顾性分析2003年4月至2005年4月1212例接受产前胎儿心脏超声筛查孕妇资料，取胎儿心脏检查的常规6个标准切面，然后在四腔心切面的基础上缓慢平行向胎儿头侧移动探头即可显示上纵隔横切面，即三血管气管平面，再叠加彩色多普勒血流显像，观察各房室及大动脉血流分布和血流方向。结果 1212例胎儿超声心动图检出胎儿心脏结构异常47例，22例合并心外畸形。33例在本院引产，20例尸检，其中18例尸检与产前超声诊断相符，1例单心房单心室并大动脉位置正常误诊为单心房单心室并大动脉转位，1例单心房单心室并永存动脉干误诊为完全性心内膜垫缺损并永存动脉干。15例胎儿抽脐带血检查染色体，3例染色体异常。结论 三血管气管平面在筛查胎儿大动脉和心室流出道异常的先天性心脏病中有重要作用。     

胎儿三血管气管平面在胎儿心室发育不良诊断中的价值

目的探讨胎儿三血管气管平面(3V T切面)在胎儿心室发育不良诊断中的价值.方法回顾性分析2003年4月-2005年1月在我院产前诊断门诊接受产前胎儿心脏超声筛查孕妇1212例,年龄20～44岁,孕周为16～38周.取胎儿心脏检查的常规6个标准切面,然后在四腔心切面的基础上缓慢平行向胎儿头侧移动探头即可显示胎儿上纵隔横切面,即三血管气管平面,再叠加彩色多普勒血流显像,观察各房室及大动脉血流分布和血流方向.结果 1212例胎儿超声心动图均获得满意的3V T切面,共检出胎儿心脏结构异常47例,其中心室发育不良11例(8例左心发育不良综合征和3例右心发育不良),年龄23～42岁,平均(29.8±5.7)岁,孕周20～39周,平均(26.7±5.6)周.10例心室发育不良均已引产并有5例尸检,尸检结论与超声检查完全一致,1例胎死宫内.结论胎儿3V T切面是一个简单、可靠的胎儿心脏大血管的筛查方法,能提高我们对涉及大动脉异常胎儿先心病的理解,是诊断胎儿心室发育不良的又一个重要切面.     

乳腺钼靶X线摄片计算机辅助定位穿刺

目的探讨乳腺钼靶照片在电子计算机辅助下立体定位穿刺活检对乳腺疾病诊断的价值.方法对79例乳腺钼靶照片发现可疑病灶的患者,采用由电子计算机辅助定位仪立体定位,用穿刺针对病灶进行准确穿刺,取得活组织送病理检查.结果79例所取活组织全部符合组织学检查要求.79例中68例行手术治疗,手术切除标本的石腊切片诊断符合率为97.1%(66/68).结论X线计算机辅助定位穿刺检查技术具有定位准确,创伤小,操作简单等优点,对诊断早期乳腺癌有重要价值.     

足月新生儿获得性脑损伤早期相关血清指标和脑电图监测及预后评价

目的探讨足月新生儿获得性脑损伤早期血清神经细丝酸性蛋白(GFAP)、肌酸激酶脑型同工酶(CK-BB)、髓鞘碱性蛋白(MBP)水平及动态脑电图变化情况,为疾病严重程度的判断及预后的评定提供客观依据。方法选取获得性脑损伤新生儿32例(病例组)及同期出生无脑损害表现的足月儿31例(对照组),均于出生后2～3 d采用酶联免疫吸附试验测定血清GFAP、CK-BB、MBP水平,并于出生后3～5 d长程监测脑电图,以最长背景抑制时间、有无持续低电压、暴发-抑制、电静息、发作期及发作间期痫样放电等作为观察指标,出生后3个月、1岁进行随访,复查脑电图。结果病例组GFAP、CK-BB、MBP水平较对照组均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。病例组最长背景抑制时间较对照组明显延长,差异有统计学意义(P<0.05)。病例组中有2例呈持续低电压表现,2例背景波率慢。最长背景抑制时间>20 s者3例(中型1例,重型2例)。生后3个月、1岁随访,63例中有7例发现神经行为发育评估较正常儿明显落后,Bayley婴幼儿发育量表中智力发育指数(MDI)、心理运动发育指数(PDI)均<70。结论足月新生儿获得性脑损伤早期血清GFAP、CK-BB、MBP水平明显升高,可能与早期脑损伤程度及预后有关。新生儿早期脑电图监测可作为评价新生儿脑损伤的早期指标之一。     

上调microRNA-383对人髓母细胞瘤D341细胞系中PRDX3表达的影响

目的探讨microRNA-383(miR-383)对人髓母细胞瘤D341细胞系中PRDX3基因的表达及细胞增殖活性与凋亡等细胞功能学的影响。方法应用实时荧光定量PCR法检测人髓母细胞瘤D341细胞系、正常脑组织中miR-383及PRDX3 mRNA表达水平;采用Western blot法检测人髓母细胞瘤D341细胞系、正常脑组织中PRDX3基因、蛋白表达水平;人工合成miR-383模拟体(mimics)转染MBD341细胞系,采用cck-8法、流式细胞术等实验方法检测转染人髓母细胞瘤D341细胞系后各组D341细胞增殖与凋亡、细胞内活性氧水平、线粒体膜电位水平的变化。结果人髓母细胞瘤BD341细胞系中miR-383表达水平为正常脑组织的0.524倍,明显下调。而PRDX3基因mRNA表达水平为正常脑组织的5.214倍,蛋白表达水平较正常脑组织明显上调。miR-383 mimics转染D341细胞系24、48 h,实验组miR-383表达水平均明显高于空白对照组,且48 h作用更加明显;而PRDX3基因mRNA、蛋白表达水平48 h较空白对照组降低。cck-8法检测提示实验组中细胞增殖率降低(P<0.05)。An-nexinV-FITC法检测转染后24、48 h细胞凋亡结果显示miR-383 mimics实验组细胞早期凋亡率明显增高,且24 h作用较明显(P=0.000)。细胞内活性氧水平和线粒体膜电位水平检测结果分别显示,转染后24、48 h实验组较对照组细胞内活性氧水平明显升高,而线粒体膜电位水平较对照组明显降低。结论与正常脑组织相比,miR-383在人髓母细胞瘤D341细胞系中表达降低,PRDX3基因表达升高。上调miR-383可敲低D341细胞系中PRDX3基因表达,并可抑制D341细胞增殖活性,促进D341细胞凋亡,出现D341细胞内活性氧水平升高、线粒体膜电位水平降低的细胞功能学变化。