优化近乎PAM-less腺嘌呤碱基编辑器提升编辑效率

目的 探究替换近乎PAM-less腺嘌呤碱基编辑器(ABE)不同元件对其编辑效率的影响。方法 在SpRY-ABEmax中,以Tad-8e替换ABEmax构建SpRY-ABE8e,在此基础上将Cas9蛋白变体SpRY与Tad-8e之间的连接肽3xGGS-XTEN-3xGGS改为长度缩短的PAPAPA连接肽。将ABEs和sgRNA表达质粒共转染人胚肾细胞HEK 293T,24 h后加入1.5μg/mL嘌呤霉素并于72 h后通过流式分选表达绿色荧光蛋白的细胞,提取细胞基因组并使用PCR扩增技术在预期产生编辑的位点进行扩增,采用Sanger测序并使用Beat工具预估各个位点编辑效率情况。结果 与对照组SpRY-ABEmax相比,SpRY-ABE8e编辑效率提升,编辑窗口也扩大(P<0.05);通过使用长度缩短的连接肽可以在保持编辑效率提升的同时限制SpRY-ABE8e的编辑窗口。结论 可通过替换PAM-less ABE不同元件来提升编辑效率,这将为今后基因治疗提供更多的工具选择。     

肝癌细胞系PLC/PRF/5中染色质重塑蛋白ATRX表达的调控作用

目的探讨肝癌细胞中地中海贫血伴精神发育迟滞综合征基因(ATRX)对基因表达的影响及其可能机制。方法利用CRISPR/Cas9技术敲除PLC/PRF/5细胞中的ATRX。全转录组测序技术(RNA-seq)检测ATRX敲除前后的基因表达水平,并用DESeq2软件得出差异表达基因。最后利用转座酶可及性核染色质区域分析技术(ATAC-seq)对差异基因的染色质可及性进行分析。结果分析得到2 754个差异表达基因,其中MUC16和CXCL8均在ATRX缺失后表达显著上调(P0.05),且两基因附近都存在升高的染色质可及性的区域。结论在肝癌细胞中,ATRX调控大量基因的表达,且可能直接参与了MUC16与CXCL8的抑制,为进一步研究ATRX在肝癌发生中的作用提供了新的线索。     

糖皮质激素对肾上腺皮质的抑制作用研究进展

糖皮质激素(GC)具有广泛的生理和药理学作用,临床上主要用于治疗各种炎症和免疫性疾病.但GC治疗具有一些不良反应,任何给药形式均具有诱发肾上腺皮质功能不全的风险,其诱导肾上腺皮质功能不全的机制与负反馈介导的下丘脑-垂体-肾上腺轴抑制、直接抑制内源性皮质醇的合成和分泌有关.目前研究认为,可通过检测血清皮质醇预测肾上腺皮质...     

miRNA在糖尿病周围神经病变中的调控机制研究进展

糖尿病周围神经病变(DPN)是糖尿病微血管并发症,其致残性可导致患者生活质量严重下降。miRNA可能通过调节神经炎症、疼痛刺激和代谢综合征过程参与DPN发病。该文综述DPN中miRNA调节机制的研究进展。     

基于经络辨证运用引火汤的临证体会

经络辨证是中医辨证中重要的组成部分,临床运用较少,如可灵活运用,收效颇佳。引火汤被陈士铎用于治疗阴蛾证,实质为阴虚火旺、虚火上炎,结合经络辨证辨为足少阴肾经病变。"异病同治"是中医的一个治疗原则,故符合足少阴肾经病变,且符合阴虚火旺者均可用引火汤一试。     

老年腹膜透析患者睡眠质量及生活质量的研究

目的了解老年腹膜透析患者睡眠质量,分析睡眠质量与生活质量之间的关系。方法采用匹兹堡睡眠指数量表(Pittsburgh Sleep Quality Index,PSQI)和简明健康调查量表(Medical Outcomes Study Health Status Short Form,SF-36)对75例老年腹膜透析患者的睡眠质量和生活质量进行测评。结果本组患者的PSQI总分为7.89±4.36,高于正常老年组(P0.05),33例(44.0%)患者睡眠质量差。睡眠质量好的患者除社会功能外SF-36各维度评分显著高于睡眠质量差者(P0.05,P0.01);生理健康、心理健康与PSQI总分呈负相关(均P0.01);多元回归分析显示影响生活质量的主要影响因素有PSQI总分、主观睡眠质量、入睡时间、睡眠效率、睡眠障碍、日间功能障碍。结论本组老年腹膜透析患者睡眠质量较差,睡眠质量影响其生活质量,建议采用非药物干预措施改善患者的睡眠质量,以利于生活质量的提高。     

呼吸道疾病，难道是“鸟笼”惹的祸

70岁的李老伯,平时有养鸟的嗜好。最近由于温度多变,李老伯怕爱鸟受冻,于是就把鸟笼挂到卧室里。这几天李老伯反复出现了打喷嚏、流鼻涕、咳嗽及皮肤发痒等症状,开始以为是感冒,但吃了几天的感冒药也没效果。去医院把情况向医生一说,才知道竟是鸟儿惹的祸。     

中药配伍雷公藤制剂治疗类风湿关节炎的安全性系统评价及其增效减毒网络调控机制

目的：系统评价中药配伍雷公藤多苷（甙）片/雷公藤片（TWPT/TWT）治疗类风湿关节炎（RA）的安全性,并初步探索常用配伍方案增效减毒的网络调控机制。方法：检索中文数据库（中国知网、万方数据库、维普数据库）和英文数据库（PubMed、Cochrane Library、EMbase）自建库至2021年7月TWPT/TWT治疗RA出现相关不良反应的研究,应用风险评价工具对研究进行质量评价,提取数据并采用Stata 15.0软件进行分析。进一步,运用中药整合药理学网络计算平台2.0(TCMIP v2.0,http：//www.tcmip.cn/),构建“药物靶标-效毒症状基因”相互作用网络,探析雷公藤常用配伍方案增效减毒的分子机制。结果：共检索到2 132篇文献,最终纳入包含中药配伍TWPT/TWT治疗RA的临床研究文献18篇。系统评价结果显示,TWPT/TWT治疗RA的不良反应主要表现为消化系统、血液系统、生殖系统病变,其中以消化系统损害的发生率最高,而中药配伍可以有效改善TWPT/TWT所导致的不良反应[RR(95%CI)=0.45(0.30,0.66),P<0.01]。进而,亚组...     

奥普力农联合冻干重组人脑利钠肽治疗重症监护病房重症心力衰竭患者的效果分析

目的 探讨奥普力农联合冻干重组人脑利钠肽治疗重症监护病房(ICU)重症心力衰竭患者的效果。方法 选取2020年1月至2022年6月唐山中心医院ICU收治的114例重症心力衰竭患者为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和观察组,各57例。对照组在常规治疗的基础上采用冻干重组人脑利钠肽治疗,观察组在对照组的基础上联合使用奥普力农治疗。2组患者均连续治疗3 d。比较2组治疗前(T₀)、治疗48 h(T₁)、治疗72 h(T₂)的急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、心功能改善情况,比较ICU住院时间、临床疗效、不良反应发生率及28 d病死率。结果 观察组T₁、T₂时点的APACHEⅡ评分、N末端B型脑钠肽前体水平均低于对照组,左心室射血分数、心输出量均高于对照组(均P<0.05)。观察组ICU住院时间短于对照组[(6.5±1.2)d比(7.3±1.4)d],治疗总有效率高于对照组[87.7%(50/57)比71.9%(41/57)](均P<0.05)。...