虎杖甙在兔肺缺血再灌注损伤中的保护作用

目的:探讨虎杖甙(polydatin,PD)对兔肺缺血再灌注损伤的保护作用.方法:采用在体兔单肺原位缺血再灌注损伤模型.30只日本大耳兔,随机均分为三组:假手术组(S组),缺血再灌注组(I/R组)和缺血再灌注 PD组(PD组).实验末测血清SOD活力和MDA含量,肺湿干重比和肺泡损伤数比值,观察肺超微结构变化.结果:①I/R组与S组相比,SOD活力下降,MDA含量、湿干重比及肺泡损伤数比值增加(P均＜0.01).PD组与I/R组相比,S0D活力增加,MDA含量降低,湿干重比及肺泡损伤数比值下降(P均＜0.01).②电镜显示I/R组有明显的肺超微结构损伤,而PD组损伤不明显.结论:PD对肺缺血再灌注损伤有明显的保护作用.     

葛根素对兔肺缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响

目的:观察葛根素对兔肺缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响.方法:复制兔单侧肺缺血再灌注损伤模型,随机分为三组,每组10只:对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)和葛根素组(Pur组).对比观察各组血浆超氧化物歧化酶(SOD)活力、一氧化氮(NO)及丙二醛(MDA)含量、肺湿干重比(W/D)、肺泡损伤数定量评价指标(IQA)及肺组织细胞凋亡指数(AI).结果:再灌注后各时间点IR组与C组比较发现,SOD活力、NO含量明显降低(P＜ 0.01),MDA、W/D、IQA、AI明显升高(P＜ 0.01),Pur组与IR组相比较发现,SOD活力、NO含量均明显升高(P＜ 0.01),MDA、W/D、IQA、AI不同程度地有所降低(P＜ 0.05).结论:葛根素通过抗氧化与提高NO含量,可抑制再灌注后肺组织细胞凋亡,从而减轻肺损伤.     

莪术油通过抑制铁死亡减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化的机制研究

目的 探究莪术油是否通过抑制铁死亡减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化及作用机制。方法 40只雄性C57BL/6小鼠分为对照组、模型组和莪术油低、高剂量（3.25、13.00 mg/kg）组。小鼠气管插管注射博来霉素（3 mg/kg）制备肺纤维化模型,造模7 d后开始给药,给药组连续14 d隔日ip莪术油。给药结束后,通过各组小鼠体质量和肺干湿质量比评估小鼠一般情况;采用苏木素-伊红（HE）和Masson染色观察肺组织病理变化;检测血清中炎症因子水平和肺组织中羟脯氨酸（hydroxyproline,HYP）、氧化应激水平;Western blotting检测肺组织中肺纤维化和铁死亡相关蛋白表达。结果 与模型组比较,莪术油组小鼠体质量增长（P<0.05）,肺水肿程度减轻,肺组织损伤情况好转,胶原纤维沉积减少;肺组织氧化产物丙二醛（malondialdehyde,MDA）及HYP水平减少（P<0.05、0.01）,还原酶谷胱甘肽（glutathione,GSH）活性增加（P<0.05）;血清中炎症因子水平明显降低（P<0.01）;肺组织纤维化相关蛋白I型胶原蛋白（coll...     

氨溴索对急性肺损伤兔E-选择素和细胞间黏附分子-1的影响

目的观察氨溴索对油酸诱导的兔急性肺损伤E－选择素和ICAM－1的影响,探讨氨溴索抗急性肺损伤作用及其机制。方法健康日本大耳白兔24只,随机分为3组：生理盐水组（NS组）,油酸组（OA组）。氨溴索治疗组（AMB组）。采用耳缘静脉注射复制兔油酸型急性肺损伤模型。检测各组动脉氧分压、肺组织湿干比（W／D）,光镜观察肺组织病理改变;检测在静注氨澳索（AMB）或生理盐水6h后BALF和肺组织匀浆白细胞介素－1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子－α（TNF-α）、E-选择素、细胞间黏附分子－1（ICAM－1）含量。结果AMB组肺W／D显著低于OA组（P〈0．01）,但显著高于NS组（P〈0．05）,肺组织病理损伤明显减轻;用药前AMB组和OA组PaO2显著低于NS组;用药后6小时,AMB组PaO2显著高于OA组（P〈0．01）,但显著低于NS组（P〈0．01）。AMB组BALF和肺组织匀浆中IL-10、TNF-α、E-选择素及ICAM－1含量含量均显著低于OA组（P〈0．01）,但均高于NS组（P〈0．01）。BALF和肺组织匀浆中E-选择素、ICAM－1含量与相应标本的IL－1β、TNF-α含量有高度的正相关关系（P〈0．001）。结论氮溴索有较好的抗急性肺损伤的作用。氨溴索能抑制促炎细胞因子等的释放及肺组织细胞黏附分子的合成,部分阻止多形核白细胞（PMN）与内皮细胞的粘附。进而阻止PMN的跨膜运动和其在肺内的聚集．从而发挥抗急性肺损伤的作用。     

左旋精氨酸对兔肺缺血/再灌注损伤时Fas/FasL表达的影响

目的 探讨左旋精氨酸对肺缺彬再灌注损伤（PIRI）时Fas／FasL表达的影响。方法 采用在体兔单肺原位缺血／再灌注模型。实验兔30只，随机分为假手术对照组（C组）、肺缺彬再灌注组（I／R组）和肺缺彬再灌注加左旋精氨酸组（L-Arg组），每组10只。分别于再灌注3h取左肺组织，观察Fas／Fas配体（Fas／FasL）mRNA定位表达、凋亡指数（AI）、肺组织湿干质量比（W／D）、肺损伤组织学定量评价指标（IQA）及光镜、电镜下的组织形态学改变。结果 L-Arg组Fas／FasLmRNA在肺小动脉内（外）膜、肺小静脉内膜、肺泡上皮及肺支气管上皮呈弱阳性表达，明显低于I／R组（P〈0．05）；AI、W／D和IQA值显著低于I／R组（P〈0．01和P〈0．05）；肺组织形态学异常改变不同程度减轻。结论 左旋精氨酸可下调肺组织Fas／FasL mRNA的表达而减轻细胞凋亡，对PIRI发挥积极的防治作用。     

热休克蛋白27参与虎杖甙对缺血-再灌注肺组织的保护效应

在临床上肺缺血-再灌注损伤(lung ischemiareperfusion injury,LIRI),可见于心肺分流术、肺移植、肺栓塞解除后等情况,其损伤程度严重,尚缺乏有效的防治措施.中药虎杖的提取物虎杖甙(polydatin,PD)对LIRI有拮抗作用[1].本研究拟进一步探究PD的作用机制,为其在临床上的应用提供依据.     

As2O3预处理对离体缺血再灌注心肌的保护作用及机制

目的研究三氧化二砷(As2O3)预处理抗心肌缺血再灌注损伤中热休克蛋白(HSP)27的作用及调控机制。方法将16只缺血再灌注心肌损伤大鼠随机分为观察组和对照组各8只,观察组再灌注前24 h腹腔注射As2O3预处理,对照组灌注生理盐水。观察两组再灌注后心功能指标、心肌超微结构及心肌组织HSP27表达变化。结果观察组左心室舒张末期压力(LVEDP)、左心室压力收缩速率(LV+dP/dtmax)、左心室压力舒张速率(LV-dP/dtmax)较对照组明显增高,超微结构损伤亦减轻,HSP27表达量明显增加(P均<0.01)。结论 As2O3预处理对缺血再灌注心肌损伤有保护作用;其机制可能为上调HSP27表达。     

肺缺血再灌注损伤时TXA2/PGI2平衡的变化及尼美舒利对其的影响

目的：探讨大鼠肺缺血再灌注损伤时TXA2/PGI2的变化及尼美舒利对其的影响。方法：健康SD大鼠30只,随机分为假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）和尼美舒利组（NIM组）,复制在体大鼠肺缺血再灌注损伤模型。检测血清丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和黄嘌呤氧化酶（XO）活力,放射免疫法测定肺组织血栓素B2（TXB2）、6-酮-前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）含量并计算比值;逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测肺组织环氧合酶-2 mRNA（COX-2 mRNA）的表达。结果：NIM组与IR组相比,血清MDA、XO均明显降低,SOD明显升高;TXB2明显下降（均P〈0.01）,6-keto-PGF1α无明显差异,COX-2 mRNA表达明显减弱（P〈0.01）。结论：尼美舒利可通过下调肺组织COX-2 mRNA的表达,抑制血小板释放TXA2,调控TXA2/PGI2的平衡,增强抗氧化应激而减轻肺缺血再灌注损伤。     

丁酸通过诱导自噬抑制宫颈癌细胞增殖的研究

目的探讨短链脂肪酸丁酸对宫颈癌细胞增殖的影响及作用机制。方法体外培养人宫颈癌Hela细胞系,5mmol/L丁酸处理细胞48h后,采用MTT实验检测细胞增殖能力;电镜下观察细胞自噬体形成;采用mRFP-GFP-LC3双荧光染色检测细胞自噬流;分别采用Westernblot法、实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测自噬相关微管相关蛋白1轻链3（LC3）、p62蛋白和mRNA的表达;采用流式细胞术检测线粒体活性氧水平。结果MTT实验结果表明丁酸显著抑制宫颈癌细胞的增殖。电镜下观察到丁酸处理后的宫颈癌细胞中形成大量的双层膜结构自噬体,其中可见线粒体等细胞器。mRFP-GFP-LC3双荧光实验结果显示丁酸处理的细胞绿色荧光减少,红色荧光增强,表明丁酸增高自噬流水平。Westernblot分析发现LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化随丁酸处理时间增加而增多,p62的表达则随丁酸处理时间增加而减少。RT-qPCR分析也在基因层面验证了丁酸上调LC3、下调p62基因表达。使用3-甲基腺嘌呤则会显著抑制丁酸诱导的LC3-Ⅱ活化。流式细胞术检测发现丁酸促进了线粒体内活性氧的积累。结论短链脂肪酸丁酸通过自噬抑制宫颈癌细胞的增殖,线粒体ROS可能是重要的触发机制。     

三七总皂甙抗肺缺血再灌注损伤作用机制的实验研究

目的探讨三七总皂甙（panax notoginseng saponins，PNS）抗肺缺血再灌注损伤作用及其机制。方法复制在体兔肺缺血再灌注损伤模型。30只日本大耳兔，随机均分为三组：假手术组（S组），缺血再灌注组（IR组）和缺血再灌注＋三七总皂甙组（PNS组）。取肺组织测湿／干重比（W／D），计算肺泡损伤率（IAR）。电镜观察细胞超微结构改变。原位杂交法检测肺组织蛋白激酶C（PKCα、δ、θmRNA）表达。结果IR组和PNS组的W／D与IAR均高于S组（分别P〈0．05和P〈0．01），但PNS组显著低于IR组（P〈0．01）。IR组肺组织的超微结构损伤严重，PNS组损伤程度明显较轻。原位杂交发现PNS组肺小静脉PKCα、δ、θmRNA表达均显著高于IR和S组（分别P〈0．05，P〈0．01）。结论三七总皂甙可上调LIRI时肺组织PKCα、δ、θmRNA的表达，减轻LIRI发挥积极作用。