组织工程支架材料在脊髓损伤修复中的应用

背景：脊髓损伤最初往往会导致细胞和组织的不断丢失,组织工程支架可以模拟细胞外基质的生理状态,从而有利于细胞的黏附、迁移、扩增和分化。 目的：总结近年来组织工程支架材料联合细胞和/或细胞因子修复脊髓损伤的新进展。 方法：应用计算机检索PubMed、Ovid Medline及CBM数据库中2000-10/2010-10 与组织工程支架材料修复脊髓损伤相关的文章。  结果与结论：组织工程材料治疗脊髓损伤需要3 因素：种子细胞、组织工程支架、细胞因子。组织工程支架对于损伤脊髓断端起到桥接作用,而种植于材料的种子细胞和/或细胞因子可以促进神经轴突的生长和迁移。可用于组织工程支架的材料可分为天然材料和人工合成材料,包括胶原、壳聚糖、琼脂糖/藻酸盐、聚乳酸、纤连蛋白、聚羟基乙酸/聚乳酸、聚β羟丁酸等,动物实验已经取得一些成果,显示组织工程支架材料联合细胞移植修复效果更好,但临床上目前尚无开展组织工程支架材料修复脊髓损伤的研究。     

新入院肺结核患者文化休克现象调查分析及护理对策

目的 调查新入院肺结核患者的文化休克现象,为今后进一步做好这一人群的护理工作提供科学依据。 方法 根据病人的入院先后抽取初诊患者1000例进行问卷调查,收回有效问卷 1000 份（男610,女390）。 结果新入院肺结核患者中文化休克现象约占61.1％,发生文化休克相关因素中性别、年龄、文化程度、经济状况、民族因素差异有统计学意义。文化休克阳性类型中,焦虑、恐惧、沮丧、绝望普遍存在,严重影响肺结核患者的治疗效果。 结论 文化休克现象与患者对医院文化的陌生与信息的缺乏、适应性障碍、沟通交流障碍和日常生活习惯、态度和信仰的改变、个体的差异等因素密切相关,按照跨文化护理理论要求,必须对新入院肺结核患者实施以文化关怀为中心的个性化、人文护理,并综合运用各种方法和手段,帮助这一群体增强跨文化适应能力,减轻乃至消除文化休克症状,顺利渡过跨文化适应期,取得明显的治疗效果,早日康复。     

臭酲酮薄膜包衣片中黄酮类成分的含量测定

采用ＵＶ法及ＨＰＬＣ法分别对臭梧酮薄膜包衣片中的总黄酮及海常素进行定量测定，平均回收率为９７．０％和９５．７％。前者简便易后，后者对有效成分控制准确可靠，两者结合可为控制该制剂的内在质量提供可靠的依据。     

中药大黄在大鼠体内的多组分药时曲线及排泄研究

采用HPLC法．对口服大黄药液后动物血浆及尿、粪中五个蒽醌甙元组分同时进行测定，其24小时内测得的药时曲线表明：大黄在动物体内的代谢过程不能为单一组分的动力学模型所描述。因此，有必要寻求建立适合中药的多组分研究模式。     

GC-MS法测定麝香保心丸中龙脑、异龙脑、麝香酮、苯甲酸苄酯的含量

目的:建立麝香保心丸中龙脑、异龙脑、麝香酮、苯甲酸苄酯的GC-MS测定法。方法:以正己烷为溶剂,采用气相色谱-质谱联用法中选择性离子检测(SIM)方式对麝香保心丸中龙脑、异龙脑、麝香酮、苯甲酸苄酯进行含量测定。DB-5(0.1μm×0.25 mm×30 m)石英毛细管柱;80℃-260℃程序升温;选择m/z 95为龙脑、异龙脑检测离子,m/z 238为麝香酮的检测离子,m/z 212为苯甲酸苄酯检测离子。结果:龙脑、异龙脑、麝香酮、苯甲酸苄酯的线性范围分别为0.020-20.0μg/mL(r=0.999 3)、0.024-24.0μg/mL(r=0.999 0)、0.029-28.8μg/mL(r=0.999 1)、0.050-50.0μg/mL(r=0.999 2)。平均回收率:龙脑97.00%;异龙脑96.30%;麝香酮96.85%;苯甲酸苄酯98.20%。结论:该方法快速、准确、有效,可用于麝香保心丸的质量控制。     

葛根芩连汤及配伍调控Nrf2/NQO1信号通路抑制溃疡性结肠炎大鼠氧化应激损伤

目的 探讨葛根芩连汤治疗溃疡性结肠炎（UC）大鼠的可能机制,同时讨论缺少药味对葛根芩连汤疗效的影响。方法 采用自由饮用5%葡聚糖硫酸钠盐水溶液诱导UC大鼠模型,雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、西药组（柳氮磺吡啶肠溶片,350 mg·kg^-1）、葛根芩连汤全方组（17 g·kg^-1）、全方去甘草组（17 g·kg^-1）、全方去葛根组（17 g·kg^-1）、葛根甘草组（17 g·kg^-1）和黄芩黄连组（17 g·kg^-1）。用1,1-二苯基-2-苦肼基（DPPH）、2,2-联氨-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（ABTS）和荧光漂白后恢复技术（FRAP）法评估葛根芩连汤及其不同配伍组体外抗氧化活性;通过比较大鼠体质量变化和记录结肠长度、观察结肠剖面和苏木素-伊红（HE）染色病理组织切片评估给药治疗后各组大鼠结肠组织损伤程度;比色法测定大鼠血清中髓过氧化物酶（MPO）、脂质过氧化物（LPO）、丙二醛（MDA）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、过氧化氢酶（CAT）和还原型谷胱甘肽（GSH）水平变化;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测结肠组织中核因子E₂相关因子2（Nrf2）、醌氧化还原酶1（NQO1）和血红素氧合酶-1（HO-1） mRNA和蛋白表达的变化。结果 与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜组织坏死,炎症浸润,血清中过氧化物MPO、LPO和MDA含量显著上升（P<0.01）,抗氧化酶T-SOD、CAT和GSH活性显著下降（P<0.01）,Nrf2、NQO1和HO-1 mRNA表达均呈下降趋势,Nrf2蛋白表达显著下降（P<0.01）,NQO1和HO-1蛋白表达呈下降趋势;与模型组比较,葛根芩连汤及配伍组能改善UC大鼠结肠组织病理损伤和形态结构,显著降低大鼠血清中过氧化物MPO、LPO和MDA水平（P<0.05）,提高无葛根组抗氧化酶T-SOD,无甘草组、黄芩黄连组CAT和GSH（P<0.01）活性,增加结肠组织中Nrf2、NQO1和HO-1 mRNA和蛋白的相对表达,全方组差异明显（P<0.05）。结论 葛根芩连汤对UC大鼠病理损伤具有恢复作用,其机制可能与激活Nrf2信号通路、抑制氧化应激反应有关。葛根芩连汤组方中缺少君药葛根或仅有臣药黄芩和黄连对其治疗UC有较大影响。研究结果可为中药复方临床合理应用及复方配伍机制研究做出有益探索。     

葛根芩连汤抑制TNF-α诱导的Caco-2细胞氧化损伤配伍规律研究

目的 探讨葛根芩连汤缓解肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）诱导的人结肠癌Caco-2细胞氧化应激损伤作用及其配伍规律。方法 将Caco-2细胞随机分为对照组、TNF-α（80 μg/L）组、小檗碱（6.73 μg/mL）组及葛根芩连汤配伍组（全方组、去甘草组、去葛根组、葛根甘草组和黄芩黄连组,18.75 μg/mL）。除对照组外,其余各组细胞给予TNF-α预处理2 h,再给予相应药物处理24 h。MTT检测Caco-2细胞活力;流式细胞术检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;比色法检测细胞中总超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase,T-SOD）活性和丙二醛（malondialdehyde,MDA）、还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）水平;qRT-PCR和Western blotting分别检测核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2）、还原型辅酶I/II醌氧化还原酶1[NAD(P)H quinine oxidoreductase 1,NQO1]和血红素氧合酶-1（heme oxygenase 1,HO-1）mRNA和蛋白表达;荧光显微镜观察Nrf2蛋白入核情况。结果 5.0～25.0 μg/mL的含药培养基和10～80 μg/L的TNF-α对Caco-2细胞活性无明显影响。与TNF-α组比较,各给药组Caco-2细胞ROS水平显著降低（P＜0.01）;除去葛根组和黄芩黄连组外,其余各组MDA水平显著降低（P＜0.01）,GSH水平明显升高（P＜0.01）;除去葛根组外,其余各给药组Nrf2基因表达明显升高（P＜0.01）,全方组和去甘草组NQO1基因表达明显升高（P＜0.05、0.01）,全方组和葛根甘草组HO-1基因表达明显升高（P＜0.05、0.01）;除黄芩黄连组外,其余各组Nrf2和HO-1蛋白表达显著升高（P＜0.01）;除去葛根组和黄芩黄连组外,其余各组NQO1蛋白水平显著升高（P＜0.05、0.01）,Nrf2蛋白入核明显增加（P＜0.05、0.01）。结论 缺少葛根对葛根芩连汤抑制Caco-2细胞氧化应激损伤有较大影响。     

LC-MS/MS法同时测定护心口服液中11种成分

目的建立高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法同时测定护心口服液(甘草、黄芪、麦冬等)中苦参碱、氧化苦参碱、丹酚酸B、丹参素、原儿茶醛、甘草苷、黄芪甲苷、桂皮醛、丹参酮ⅡA、麦冬皂苷D、鲁斯可皂苷元的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Ultimate XB-C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,3μm);流动相水-甲醇(含0.05%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.4 m L/min;柱温25℃。结果 11种成分在各自范围内线性关系良好(r0.999 0),平均加样回收率96.66%~103.2%,RSD 1.4%~3.4%。结论该方法灵敏、可靠、准确,可用于护心口服液的质量控制。     

中药学研究生《中药化学专论》课程建设的实践和探讨

根据国家中医药发展战略和中药学学科的特点,研究生课程改革中《中药化学专论》课程将重点加强硕士研究生对中药中化学成分研究能力的培养,避免过去硕士研究生培养过程中,研究生存在选课目的性和针对性不强的缺点,同时为研究生在后续的中药药效物质基础研究和中药质量标准研究等方面打下坚实的基础。