中药地龙中参环毛蚓环介导等温扩增快速检测方法

[目的]建立中药材地龙中参环毛蚓的环介导等温扩增(LAMP)检测技术,实现对参环毛蚓的快速检测。[方法]采集不同产地地龙,提取总DNA后将所提取的总DNA进行线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ亚基(COI)基因片段扩增、测序、比对,判断各产地地龙物种。用设计的LAMP引物组进行地龙LAMP实验,反应结束后向扩增产物中加入核酸染料SYBR GreenⅠ,分别在自然光、紫外光下直接通过肉眼来观察颜色变化及利用琼脂糖凝胶电泳来检测其引物的特异性。[结果]利用新设计的LAMP引物对参环毛蚓实现了特异性扩增,且检出限达40 fg/μL,具有极高的灵敏度。[结论]利用LAMP技术可实现参环毛蚓的现场快速检测。     

重组人红细胞生成素治疗肿瘤相关贫血

贫血在晚期肿瘤患中很常见。输血在很长一段时间内是纠正贫血的唯一方法，但这种方法费用高、效果差、危险性大。伴随分子生物学技术的进展，重组人红细胞生成素(益比奥，rHuEPO)问世，并应用于临床。自2001-10／2002—05应用沈阳三生制药股份有限公司生产的益比奥治疗肿瘤相关贫血患15例．现总结如下。     

副粘病毒Tianjin株NP蛋白的表达及分析

目的分析副粘病毒Tianjin株NP蛋白与其他SeV的同源性及种系进化关系,探讨其变异及抗原性。方法克隆NP基因,对其核苷酸和氨基酸序列进行同源性及进化分析。在原核系统中分3段表达NP蛋白。结果经Western blot分析,重组蛋白NP1、NP2和NP3能与副粘病毒Tianjin株抗血清特异反应,具有天然抗原性。Tianjin株与仙台病毒BB1株NP的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为94.5%和96.2%,与其他仙台病毒的同源性,在85.1%～88.7%和92.4%～94.7%之间。Tianjin株NP蛋白共有15个独特的氨基酸变异位点和11个与BB1株共有的变异位点。Tianjin株与BB1株NP核苷酸序列的差异大于同一进化分支内的仙台病毒之间的差异。结论副粘病毒Tian-jin株属于仙台病毒新的进化分支。重组NP蛋白具有抗原性。     

颌骨骨折钛板内固定术后钛板取出原因分析(附171例报告)

由于解剖结构特点,颌骨的有些部位在结构和力学上属于薄弱区,为骨折的好发部位。这些部位骨折后往往造成咀嚼功能障碍、面部畸形。治疗的主要目的就是恢复其解剖结构和生理功能。由于金属钛具有良好的生物相容性、理化性能稳定、可塑性强、可长期保留体内等优点广泛应用于临床,目前微钛板坚强内固定术已广泛应用于颌骨骨折治疗中并取得了良好的治疗效果。     

阿霉素对肝癌细胞增殖及TRAIL受体表达影响的实验研究

[目的]研究亚毒性浓度阿霉素联合TRAIL蛋白对肝癌HepG2细胞增殖及TRAIL受体表达的影响。[方法]采用MTT法,分别检测阿霉素、TRAIL及亚毒性浓度阿霉素联合TRAIL对HepG2细胞的生长抑制率;RT-PCR和Westernblot分别检测阿霉素作用前后HepG2细胞TRAIL受体DR4、DR5、DcR1、DcR2mRNA和蛋白表达的水平。[结果]TRAIL对HepG2细胞增殖的抑制不存在浓度依赖性;阿霉素对HepG2细胞增殖的抑制作用存在浓度依赖性;亚毒性浓度阿霉素与亚毒性浓度TRAIL联用杀伤肿瘤的能力明显增强;无论在mRNA还是蛋白水平,阿霉素处理后HepG2细胞死亡受体DR4、DR5的表达水平显著增加,而阿霉素处理后诱骗受体DcR1、DcR2的表达量较阿霉素处理前明显减少。[结论]亚毒性浓度的阿霉素与亚毒性浓度的TRAIL联合应用具有协同作用,其机制可能是由于阿霉素在某种程度上增加了细胞表面死亡受体的表达,从而诱导了细胞凋亡的增加,说明TRAIL在肿瘤治疗方面存在潜在的应用价值。     

副黏病毒Tianjin株NP蛋白的稳定表达及其检测

目的:构建副黏病毒Tianjin株NP基因的真核表达载体,转染HEK293细胞,经G418筛选出稳定表达NP蛋白的细胞.方法:应用RT-PCR技术克隆副黏病毒Tianjin株NP基因,插入真核表达载体pcDNA3.1(+).经PCR、酶切和测序鉴定后,将构建的pcDNA3.1(+)-NP用LipofectaminenTM2000转染试剂转染HEK293细胞.应用免疫荧光法及Western Blot检测NP蛋白的瞬时和稳定表达.结果:RT-PCR扩增得到NP基因,重组质粒pcDNA3.1(+)-NP转染HEK293细胞后,经免疫荧光法检测到目的蛋白的瞬时和稳定表达.Western Blot法可见NP蛋白瞬时和稳定表达的条带.结论:副黏病毒Tianjin株NP基因在HEK293细胞可以瞬时和稳定表达,为研究副黏病毒Tianjin株NP蛋白功能与病毒致病性、宿主亲嗜性奠定了基础.     

食管癌肉瘤误诊1例

患者,男,60岁,主因进行性吞咽困难伴背部疼痛20d来我院就诊。患者自带CT片显示食管增粗,呈直径约为3cm的类圆形软组织团块影。故建议患者行食道钡餐检查明确食管病变情况,结果显示：食管下段管腔内见一椭圆形充盈缺损,边缘清晰,表面见小钡斑,充盈缺损可轻微移动,局部黏膜结构大部完好,管壁柔软局部蠕动波可通过,钡剂亦可通过该段食管,但其上段食管有轻度扩张。     

胸部结节病影像表现误诊分析

目的通过分析胸部结节病影像表现误诊原因,了解胸部结节病的不典型影像表现。方法回顾性分析本院13例初诊时胸部影像误诊经病理及临床治疗确诊的结节病患者。结果误诊为弥漫性细支气管肺泡癌、血行播散性肺转移、肺癌肺内转移、淋巴瘤、肺结核者各2例,误诊为结缔组织病的肺部表现、癌性淋巴管炎、肺炎者各1例。结论胸部结节病的不典型影像表现容易误诊,确诊需结合临床及病理检查。     

16层螺旋CT增强扫描对纵隔淋巴结核诊断意义

CT在纵隔疾病诊断中的价值已经有目共睹,随着CT设备的不断更新和技术的发展,特别是多层螺旋CT的诞生使得纵隔疾病的影像诊断登上了一个新的高度,其连续横切影像构成的三维空间.使纵隔内结构及病灶部位一目了然,借助CT薄层图像较高的空间分辨率,为淋巴结病变的定性提供了诊断依据.     

血栓性血小板减少性紫癜1例

血栓性血小板减少性紫癜(TTP)为少见的出血性疾患,病情进展迅速,预后差。我所首次收治1例,现报告如下。患者,栾某,女,42岁。于1989年11月18日入院。患者3个月前无明显诱因出现月经过多伴有头晕、乏力;2个月前除阴道大量出血外,全身皮肤出现较多散在紫癜及大片瘀