猕猴骨髓基质干细胞体外培养及其生物学特性的研究

目的 通过体外分离、培养猕猴骨髓基质干细胞(BMSCs)，研究其生物学特性、表面标志和遗传学性能，为BMSCs用作组织工程化神经种子细胞提供研究基础。方法 通过密度梯度离心分离猕猴BMSCs，体外培养、扩增，用倒置相差显微镜进行形态学的观察，通过绘制生长曲线、计算克隆形成率来研究细胞的活力和增殖能力，流式细胞仪检测表面标志，核型分析反应遗传学性能。结果 密度梯度离心的方法能获得较纯的猕猴BMSCs，第7代以前的细胞有较强的活力和增殖能力，具有与人的BMSCs相似的形态和表面标志，体外培养第10代细胞仍稳定为二倍体核型。结论 用本实验方法能较容易地获得大量的猕猴BMSCs，具有与人的BMSCs相似的形状和表面标志，第3—6代的细胞可满足以猕猴为动物模型的组织工程化神经种子细胞的研究要求。     

用活体动物进行冠脉搭桥训练的效果分析

目的：通过在活体猪心上进行冠脉吻合术,寻找快速提高吻合冠脉血管水平的方法。方法：对12名外科医生进行为期12个月的冠状动脉吻合训练,通过冠脉造影检查搭桥术后吻合口通畅及出血情况。于训练的第3、6、12个月进行考评,记录吻合乳内动脉与前降支所需要的时间与血管吻合口质量。结果：培训者完成猪冠状动脉搭桥手术所需时间：训练初期平均（22．08±1．14）min、中期平均（17±1．14）min,末期平均（13．16±1．14）min,组间相比差异有统计学意义（P〈0．001）;训练末期血管吻合口质量显著高于训练初期（P=0．001）。结论：通过在活体猪心上进行冠脉搭桥训练可快速提高冠脉血管的吻合技术,为心外科医师熟练掌握冠脉搭桥术奠定了理论基础与实验基础。     

全身性淀粉样变性病合并左股骨干骨折一例报告

患者女,60岁。以左股骨干病理性骨折于2003年12月20日入院。患者于1991年行右下颌骨肿物切除,病理诊断为骨纤维异常增殖症。1998年因肋骨骨折在拍摄胸部X片时发现双肺广泛结节状阴影,未作进一步诊治。2000年为确定双肺广泛结节状阴影性质再次入院,病理活检示支气管炎,未见肿瘤细胞。此次入院后查体:呈贫血貌,体形消瘦,轻度驼背,全身未扪及肿大淋巴结,右下颌角原手术切口处有一与下颌骨相连的较大的骨性肿物,左下肢股骨干骨折。X线片示左股骨干病理性骨折、骨质疏松(图1)。胸部X线片示双肺弥漫性结节影(图2)。拟诊为下颌骨肿瘤广泛肺及骨转…     

溃疡性结肠炎活动期疗效预测模型构建研究

目的 基于五味苦参肠溶胶囊治疗溃疡性结肠炎的患者数据,探讨中医药疗效预测模型构建的可行性及其方法要点。方法 选择五味苦参肠溶胶囊Ⅲ期临床试验的试验组(五味苦参肠溶胶囊)作为研究对象,经过8周试验后,数据资料完整的患者共274例。统计分析软件使用R语言4.1.0,纳入全部待筛选变量构建多因素Logistic回归模型,筛选P<0.05的变量纳入最终模型;绘制列线图;采用Bootstrap法重复抽样1 000次对模型进行内部验证,计算C指数并绘制校准图,评价模型的区分度及校准度;并进行Hosmer-Lemeshow拟合优度检验和外部验证,对模型进行总体评价。结果 筛选出溃疡性结肠炎完全缓解的促进因素为：患者(15～65岁)接受治疗时年龄小(OR=0.96, 95%CI:0.94～0.99,P=0.002)、非慢性持续型(与初发型比,OR=0.36, 95%CI:0.18～0.74,P=0.005)、镜下无出血(OR=0.42,95%CI:0.22～0.82,P=0.011)、红细胞沉降率降低(OR=0.97,95%CI:0.95～0.99,P=0.006)。使用上述变量构建最终模型,并...     

肠易激综合征患者生活质量的影响因素分析

目的：探讨肠易激综合征（ IBS）患者生活质量状况及其影响因素。方法采用SF－36量表（英国发展版）对112例入院IBS患者进行生活质量测评,采用多重线性回归方法探讨其影响因素。结果 IBS患者各领域得分均低于全国常模,差异有统计学意义（ P＜0.05）;单因素分析显示不同性别、经济状况的患者躯体综合总分（PCS）比较差异有统计学意义（P＜0.05）,而心理综合总分（MCS）仅在不同经济状况间差异有统计学意义（P＜0.01）。多因素分析显示,性别和年龄对IBS患者PCS的影响有统计学意义（P＜0.05）,而MCS的影响因素仅为性别（ P＜0.05）。结论合理治疗可提高IBS患者的生活质量,但还需考虑其他因素的影响,应对其加强健康教育和心理辅导。     

S-腺苷甲硫氨酸抑制miR-34a依赖的肺癌转移的作用

目的探讨S-腺苷甲硫氨酸抑制miRNA-34a依赖的肺癌转移机制。 方法选取肺癌细胞A549,分别采用0、50、100、200、500 μM的S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine, SAMe)刺激A549细胞并检测miR-34a以及下游STAT3信号通路的表达情况,同时检测不同刺激条件下A549细胞的侵袭转移情况;实时荧光定量(real-time fluorescence quantification, qPCR)检测miR-34a、E-cadherin、α-catenin、N-cadherin、Vimentin的mRNA表达水平;Western Blot实验检测STAT3、p-STAT3、β-actin的表达水平;Transwell实验检测A549细胞的侵袭能力变化。 结果随着SAMe浓度的增加,miR-34a的表达水平呈梯度增加,与对照组相比,经t检验分析,差异有统计学的意义(P<0.05);Western Blot实验显示,与对照组相比,500 μM SAMe刺激后,下游的p-STAT3蛋白水平下降,总STAT3和内参蛋白β-actin水平不变;qPCR结果显示,随着药物浓度的增加,表皮蛋白E-cadherin、α-catenin的mRNA水平上升,间质蛋白N-cadherin、Vimentin的mRNA水平下降;Transwell实验显示经50、100、200、500 μM的SAMe刺激后,A549细胞的侵袭转移抑制率分别为18.70%、31.24%、47.66%、58.46%,与对照组相比,经t检验分析,差异有统计学的意义(P<0.05)。 结论SAMe可通过抑制miR-34a依赖的下游STAT3信号通路抑制肺癌细胞的侵袭转移,提示SAMe在肺癌侵袭转移过程中发挥重要作用。     

神经元样细胞与控释神经营养因子联合移植对脊髓损伤猴后索结构修复和功能恢复的作用

目的：探讨骨髓间质干细胞源性神经元样细胞与胶质细胞源性神经营养因子控释生物材料联合移植治疗猴急性脊髓损伤过程中，对后索结构修复与功能恢复的影响。方法：实验于2004—03／11在中山大学附属第一医院实验动物中心完成。选择雄性恒河猴8只，随机分为2组，每组4只。制作猴脊髓损伤模型后损伤治疗组植入3．0&;#215;10^6个／kg神经元样细胞与含2μg胶质细胞源性神经营养因子的单甲氧基聚乙二醇聚乳酸嵌共聚体用200μL磷酸盐缓冲液制成悬液，损伤对照组给予等体积磷酸盐缓冲液；各组动物分别于术前和治疗后四五个月进行皮质体感诱发电位检测；处死动物前3周将True Blue注射到脊髓损伤部位下界下部后索部位，制备石蜡切片应用苏木精-伊红染色观察脊髓损伤处脊髓后角的组织形态学改变。应用甘氨酸银浸镀法染色观察后索结构。结果：8只恒河猴全部进入结果分析。①两组动物皮质体感诱发电位结果：脊髓损伤后，皮质体感诱发电位信号消失，治疗后四五个月与治疗前比较，损伤治疗组潜伏期无明显延长。损伤治疗组波幅降低度明显低于损伤对照组[（3．78&;#177;1．32）μV，（9．85&;#177;0．84）μV，t=-11．194，P〈0．01]。②病理结果表明，损伤治疗组后角轻度胶质增生；损伤对照组后角神经元少见，胶质浸润。③脊髓后索神经纤维密度和积分吸光度值：损伤治疗组后索神经纤维密度明显高于损伤对照组【（1338&;#177;276）个／视野，（574&;#177;168）个／视野，t=4．734，P〈0．01】；积分吸光度值高于损伤对照组（9966．73&;#177;3753．78，4323．25&;#177;1040．92，t=2．897，P〈0．05）。④荧光显微镜下，损伤治疗组大脑皮质躯体感觉区（对侧）存在蓝色荧光阳性细胞，损伤对照组无此现象。结论：①注射骨髓间充质神经元样细胞与控释胶质细胞源性神经营养因子的恒河猴皮质体感诱发电位的潜伏期基本正常，波幅降低，表明其本体感觉获得了一定程度恢复，同时说明波幅的变化在判断脊髓损伤方面比潜伏期更敏感。②后角神经元明显增多，说明骨髓间充质神经元样细胞与控释胶质细胞源性神经营养因子可以促进脊髓损伤猕猴后索组织结构的修复。     

许旺细胞在人工神经支架材料上三维培养的体外活性研究

目的　探讨许旺细胞在组织工程支架材料上体外三维培养的生长活性。　方法　对聚羟基乙酸和聚乳酸的共聚物细丝支架进行生物学修饰 ,把原代培养的许旺细胞悬液接种在支架材料上 ,用MTT法、单细胞凝胶电泳法及显微分光光度和显微图像联合法测定许旺细胞的生长活性。　结果　聚羟基乙酸和聚乳酸的共聚物细丝支架上的许旺细胞各项活性指标与正常培养的许旺细胞比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,实验组许旺细胞DNA无损伤。　结论　聚羟基乙酸和聚乳酸的共聚物细丝适于构建具有许旺细胞活性的组织工程化人工神经。     

丽珠肠乐胶囊治疗中老年便秘临床观察

慢性特发性便秘是一种中老年人常见的消化道病症。目前治疗便秘药物虽然很多，但停药后又即发生便秘，且多患有不良反应发生。我们于2001年5～8月，使用双岐杆菌(P．O．Bifidobiogen)活菌制剂(丽珠肠乐胶囊，DM8504菌株)，对36例慢性特发性中老年人便秘患者，进行了临床疗效观察，现将结果报告如下：     

九针联用治疗寻常型痤疮的临床疗效及对血清睾酮水平的影响

目的：观察九针联用治疗寻常型痤疮的临床疗效及对血清睾酮水平的影响。方法：将寻常型痤疮患者49例随机分为观察组与对照组,观察组25例,对照组24例,对照组予针刺常规治疗,观察组采用九针联用综合治疗,疗程均为4周。观察两组综合疗效、皮损变化情况及睾酮水平的变化。结果：经4周治疗,观察组患者治疗总有效率高于对照组（P <0.05）;观察组治疗前后痤疮综合分级系统（Global Acne Grading System,GAGS）评分的差值与对照组比较,差异具有统计学意义（P <0.05）,提示观察组皮损改善的程度优于对照组;观察组治疗前后睾酮的差值与对照组比较,差异具有统计学意义（P <0.05）,提示观察组睾酮水平下降程度优于对照组。结论：九针联用治疗寻常型痤疮具有较好的疗效,与针刺常规治疗相比能明显改善临床症状,同时在改善血清睾酮水平上具有明显优势,值得临床推广应用。