苏氏接骨胶囊中当归和川芎的TLC鉴别及阿魏酸的HPLC测定

目的 建立苏氏接骨胶囊中当归和川芎的定性鉴别和总阿魏酸的定量检测方法.方法 采用薄层色谱法对苏氏接骨胶囊中的当归和川芎进行定性鉴别,采用高效液相色谱法对阿魏酸进行定量测定.色谱柱为Thermo C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,流动相为乙腈-1%醋酸溶液(20:80),体积流量1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长320 nm.结果 薄层色谱清晰,分离良好,阴性无干扰.阿魏酸在0.42～2.24 μg线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99.26%,RSD为1.27%.结论 所建立的方法准确、快速、简便、重现性好,可作为苏氏接骨胶囊的质量控制方法.     

高效液相色谱法测定人血浆中万古霉素浓度

目的:建立万古霉素血药浓度的快速高效液相色谱法测定方法.方法:以去甲万古霉素为内标,血浆样品经硫酸锌沉淀,采用Thermo-C18柱(250mm×4.6mm,5μm)色谱分析柱;以甲醇-pH 3.2磷酸二氢钾缓冲液(20:80)为流动相;流速为1.0mL·min-1;检测波长为230nm;柱温为25℃;进样量为10μL.结果:万古霉素最低检测浓度为80ng·mL-1;血浆样品浓度在5.0～80.00mg·L-1范围内呈良好的线性关系,r=0.994 7,n=5;相对回收率为在98.67%～100.4%;日内RSD与日间RSD均在1.6%～3.4%(n=5).结论:该方法采血量少,简便快速、灵敏度高、重复性好,适用于临床常规血药浓度监测及药动学研究.     

HPLC法测定龙胆泻肝丸中黄芩苷的含量

目的:用HPLC法测定龙胆泻肝丸中的黄芩苷的含量。方法:采用Nova-Pak C18柱(3.9 mm×150 mm,4μm),以甲醇-水-冰醋酸(45∶55∶1)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长275 nm。结果:对照品在0.815~4.075μg/ml范围内呈线性关系(r=0.999 6),加样回收率平均为99.4%,RSD为1.12%。结论:本方法简便、准确、重复性好,可用于测定龙胆泻肝丸中黄芩苷的含量。     

结肠炎散Ⅰ号的质量标准研究

目的制定结肠炎散Ⅰ号质量控制方法。方法采用TLC法对方中的黄连、五倍子进行了定性鉴别;采用HPLC法对方中靛玉红进行了测定。结果本品定性鉴别薄层色谱特征明显;靛玉红在0.129 3～0.226 2μg/mL具有良好的线性关系(r=0.999 5),平均回收率为99.8%,RSD为1.62%。结论该方法可以准确地进行定性、定量检测,有效地控制结肠炎散Ⅰ号的质量。     

大承气汤对内毒素血症小鼠血清一氧化氮浓度的影响

目的：观察大承气汤（ＤＤ）对内毒素血症小鼠血清一氧化氮（ＮＯ）浓度的影响。方法：通过腹腔注射大肠杆菌内毒素对小鼠进行内毒素血症造模,治疗组同时经口投与ＤＤ：采用Ｇｒｉｅｓｓ试剂比色法间接测定血清ＮＯ浓度。结果：模型组小鼠血清ＮＯ浓度明显高于正常组,而ＤＤ治疗组则明显低于模型组。结论：ＤＤ对内毒素血症小鼠一氧化氮浓度的升高有明显的降低作用。     

小檗胺对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞增殖的抑制作用

目的:探讨小檗胺对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞增殖和细胞周期的影响.方法:体外培养视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定0、2、4、8、16、32 mg/L小檗胺作用24、48和72 h后对HXO-RB44细胞增殖的抑制率,流式细胞仪检测0、4、8、16 mg/L小檗胺作用HXO-RB44细胞24h后的细胞周期.结果:随着小檗胺浓度的增加和作用时间的延长,其对HXO-RB44抑制率逐渐增加,作用24、48、72 h的IC50分别为25.26、10.94和6.25mg/L.流式细胞分析显示,与空白对照组比较,小檗胺可显著抑制细胞周期,使G2/M期细胞增多(P＜0.01).结论:小檗胺在体外可抑制视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞的增殖,并可诱导G2/M期阻滞,可能成为一种有效的抗视网膜母细胞瘤药物.     

基于分枝菌酸分析法鉴定分枝杆菌临床株

非结核分枝杆菌(NTM)病具有与结核病临床表现相似的全身中毒症状和局部损害,在无菌种鉴定的情况下,与结核病难以区别。NTM与TB对抗结核药物的敏感性大不相同,不同的NTM对药物的敏感性也不相同,根据不同菌种化疗方案应有所不同。     

小檗胺对大鼠骨肉瘤UMR-106细胞增殖的抑制作用

目的:探讨小檗胺体外对大鼠骨肉瘤UMR-106细胞增殖的抑制作用及机制.方法:0、2、4、8、16、32mg/L小檗胺作用UMR-106细胞24、48、72 h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测小檗胺对UMR-106细胞增殖的抑制作用;0、4、8、16 mg/L小檗胺作用UMR-106细胞24 h后,Hoechst33258染色激光共聚焦扫描显微镜观察细胞的形态学变化;Annexin V/碘化丙啶(PI)荧光标记流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率;PI荧光标记FCM检测细胞周期变化.结果:小檗胺以剂量依赖方式显著抑制UMR-106细胞的增殖(P＜0.01),其作用24、48、72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为24.69、8.03和3.54 mg/L.小檗胺处理组可见核固缩和凋亡小体.空白对照组和小檗胺4、8、16 mg/L处理组的细胞凋亡率分别为(1.64±0.29)％、(3.58±0.31)％、(6.27±0.47)％和(11.27±1.09)％,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);同时,小檗胺可以诱导细胞坏死;此外,与空白对照组比较,小檗胺4、8、16 mg/L处理组UMR-106细胞的G0/G1期细胞比例增高,而S期和G2/M期细胞比例呈降低趋势(P＜0.01).结论:小檗胺体外能够抑制骨肉瘤UMR-106细胞增殖,其机制与诱导细胞凋亡、坏死和G0/G1期阻滞有关.     

应用萃取-超滤两步法从过期人血中提纯人血红蛋白

目的：建立一种有效的实验方法，从过期的全血及血液制品（少浆全血；浓缩红细胞；洗涤红细胞）中，提取人天然无基膜血红蛋白（SHFb）。方法：采用甲苯萃取法有效去除血液中的有形成分（细胞膜等），再采用Millipore超滤装置分离提纯人血红蛋白，得到SFHb，然后建立合理的实验方法（电泳、紫外－可见光扫描、反相高效液相，库尔特血液分析系统和ABO血型凝集试验等），确定纯化产品的产率、浓度、纯度。结果：应用上述方法，测得SFHb的浓度为15．2g/dl；纯度为98．3％；血型 凝集实验：阴性；紫外扫描图谱、反相高效液相峰谱与对照品吻合；聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示，产品呈均一分布，90％电泳迁移率近似Marker(45KD);15%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示确定了血红蛋白蛋白质的亚基组成及分子量,电泳迁移率与对照品完全一致。     

18种分枝杆菌标准菌株的分枝菌酸指纹谱比较

目的 用本实验室所建立的高效液相色谱分枝菌酸分析方法，构建18种分枝杆菌标准菌株的分枝菌酸指纹谱库，并对该库的分枝菌酸指纹谱进行比较。方法 标准菌株按常规方法，分别转种到改良罗氏培养基斜面上培养，待菌落形成后，用化学法从培养物中提取细胞壁的分枝菌酸，经皂化、酸化和衍生后，制备出良好的分析样品，用于色谱检测分析。结果 成功地构建了18种分枝杆菌标准菌株的分枝菌酸指纹谱库，该指纹谱的重复性日内变异系数为0．20％-0．83％，均〈1％。每种分枝菌酸的指纹谱都具有各自的特征，峰形也有一定规律，根据峰形的特点将其分为3类：A类（单组峰）包括结核、牛、戈登、爱知、堪萨斯、海分枝杆菌和卡介苗，B类（2组峰）包括蟾蜍、土地、新金色、不产色和浅黄分枝杆菌，C类（3组峰）包括胞内、鸟、金色、偶然、副偶然、脓肿和耻垢分枝杆菌。结论 依据18种分枝杆菌标准菌株的分枝菌酸指纹谱，即可对分枝杆菌菌种进行鉴定。卡介苗与牛分枝杆菌的分枝菌酸指纹谱的峰形存在很大差别，该现象很可能作为结核病潜伏感染和分枝杆菌耐药机制的一种新理论依据。