端粒与端粒酶研究进展

端粒与端粒酶研究进展郑晓飞王升启（综述）孙志贤（审校）关键词端粒酶端粒肿瘤中图号Ｒ７３０２３１Ｑ５５端粒的独特结构、复制方式及功能，端粒酶的结构、功能、催化机制、表达调控及其在细胞衰老、永生化和癌变中的作用使之成为近期生命科学研究的热点。本文就端粒...     

霍乱弧菌O139实时荧光PCR检测方法的建立及应用

目的：建立检测霍乱弧菌O139的实时荧光PCR检测方法，为霍乱弧菌0139的检测提供快速、敏感、特异的检测手段。方法：用复合探针法荧光PCR检测技术，检测0139特异基因——编码糖基转移酶的基因。结果：本方法特异性好，检测非0139肠道菌均无响应；灵敏度高，可检测低至10CFU的细菌；重复性较好，批间批内变异系数均小于3％。对采自浙江省0139霍乱弧菌感染患者的335份标本进行检测，共有133份为阳性，而采用常规细菌培养法，仅检测出90份阳性。结论：本方法的建立为霍乱的诊断提供了又一有效手段。     

复方积雪草对FGS鼠肾细胞因子mRNA表达影响的实验研究

目的：观察复方积雪草的抗肾纤维化作用及其对FGS实验鼠肾细胞因子mRNA表达的影响。方法 BALB／C小鼠尾静脉一次性注射阿霉素诱导FGS肾炎模型，以复方积雪草制剂灌胃治疗4周。分别观察尿蛋白和肾脏病理化，同时提取肾组织总RNA，通过逆转录掺入荧光素，再与细胞因子表达谱基因芯片杂交，并行扫描分析。结果：复方积雪草治疗组蛋白尿较模型明显减轻，同时实验鼠肾小球硬化的病理明显改善：芯片检测证实，复方积雪草可下调PDGF-α、PDGF-β、PDGF受体、VEGF、IL-9、IL-7R2、MIP、c-myc、Jun等细胞因子mRNA的表达，上调GM—CSF的表达。结论：复方积雪草具有抗肾纤维化作用，其作用效应可能是通过对多种细胞因子mRNA共同调控的结果。     

乙型肝炎病毒耐药寡核苷酸基因芯片的制备及特性分析

在构建了乙型肝炎病毒(HBV)拉米夫定抗药性相关HBV多聚酶基因突变体基础上,设计制备了HBV耐药寡核苷酸基因芯片,并对其特性进行了分析,为建立合理高效的HBV治疗方案,指导临床合理用药提供快速检测手段。一、材料与方法1.HBV耐药寡核苷酸芯片制备:因HBV拉米夫定抗药性相关突变主要位于HBV多聚酶基因的L526,A546,M550     

硫代反义寡脱氧核苷酸阻断树鼠感染丁型肝炎病毒的初步研究

硫代反义寡脱氧核苷酸阻断树鼠感染丁型肝炎病毒的初步研究ＰｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｓｔｕｄｙｏｆＨＤＶＳ－ａｓＯＤＮｔｏｐｒｅｖｅｎｔＨＤＶｉｎｆｅｃｔｉｏｎｉｎｔｕｐａｉａ毛青，王升启，李奇芬，王玉芝，吴纯清，陈鸿书（第三军医大学西南医院传染科）６３００...     

基因芯片技术快速检测水中常见致病菌

致病菌污染饮用水可导致多种疾病的爆发与流行 ,严重威胁着人类的健康。因此 ,若想有效控制介水传染病的发生 ,致病菌的快速检测是关键。传统的细菌检测方法 ,操作繁琐、且需要数天时间才能得到结果。核酸探针杂交技术也存在特异性或敏感性的问题。常规ＰＣＲ 1次只能检出 1种致病菌 ,对水中分离的未知菌或有多种细菌污染的样品则显得无从下手。我们建立了以基因芯片技术为基础的水中常见致病菌的快速检测与鉴定技术 ,报道如下。首先 ,利用在细菌学分类上具有重要意义的 1 6ＳｒＲＮＡ基因作为检测的靶分子。细菌的 1 6ＳｒＲＮＡ基因具有序…     

寡核苷酸芯片在胃癌相关基因研究中的应用

目的：应用寡核苷酸芯片研究胃癌差异表达基因。方法：根据文献获取基因，查阅相应基因序列设计并合成探针，将探针点样于化学修饰过的载玻片上，制成寡核苷酸芯片。抽提胃癌与相应正常组织总RNA，并以其进行逆转录掺入双色荧光合成荧光标记的cDNA探针，混合后与芯片杂交，经严格洗片后扫描获取图象，计算机分析比较胃癌组织与正常组织的差异表达基因。结果：在288条基因中胃癌组织与正常胃粘膜组织存在差异表达的基因。检测10例标本共有11条基因表达存在明显差异，其中表达明显增高的有7条，表达明显降低的有4条。结论：胃癌组织与正常胃粘膜组织存在大量差异表达的基因，胃癌的发生发展与这些基因密切相关；寡核苷酸芯片在胃癌相关基因的研究具有重要意义。     

应用寡聚核苷酸芯片检测白血病与其同胞供者的白血病基因表达差异

为了应用寡聚核苷酸基因表达谱芯片研究9对白血病患者／同胞供受者对之间的基因表达谱差异以识别主要的疾病相关基因，将163条白血病／肿瘤发病相关基因组群列入芯片设计，合成寡核苷酸探针，用点样仪点片制成基因芯片。提取病初白血病患者及其供者的骨髓／外周血标本或其相对应的健康同胞供者经G-CSF动员后并经CS-3000细胞分离机采集的浓集的9份外周血造血干细胞的总RNA；分别逆转录并进行寡核苷酸探针杂交。结果表明：与其相应的正常供者配对比较，发现4例ALL患者中存在6条显著差异表达基因，其中上调表达基因5条(RIZ，STK-1，T—cell leukemia／lymphoma 1A，Cbp／p300，Opl8)，下调表达1条(hematopoietic proteoglycan core protein)；5例AML-M4和AML-M，患者中亦存在7条显著差异表达基因，其中上调表达6条(STAT5B，ligand p62 for the Lck SH2，CST3，LTC4S，myeloid leukemia factor 2，epb72)，下调表达1条(CCR5)。结论：选择有高度遗传关联的兄弟姐妹供受者对作为差异研究比照对象，利用寡聚核苷酸基因芯片技术进行疾病基因的筛查，筛查出了13条主要异常基因；进一步确认了上述基因在白血病分子发病机制中的关键性作用。     

DPYD基因芯片的制备及条件的优化

[目的] 制备DPYD基因分型芯片，以该芯片为手段预测肿瘤病人对5-Fu的毒副作用。[方法] 设计并合成探针、引物，制备基因芯片，提取人外周血中DNA，经PCR仪扩增后，与芯片上的探针杂交，并用扫描仪分析结果，部分结果经直接测序证明。[结果] 成功制备了基因分型芯片，优化了制备条件，另外，构建了标准模板，并建立了分型标准。[结论] 该基因芯片的灵敏性及准确性均可.