硫代反义寡脱氧核苷酸在树体内对HDV复制与表达的抑制作用

目的：在树（Ｔｕｐａｉａ）体内观察硫代反义寡脱氧核苷酸（Ｓ－ＡＳＯＤＮ）对ＨＤＶ复制、表达的抑制作用。方法：树同时接种ＨＢＶ阳性血清０．１ｍｌ、ＨＤＶ阳性血清０．３ｍｌ后，将１６只ＨＤＶ／ＨＢＶ感染成功的树随机分为两组，给药组８只树按每只每次经尾静脉注射Ｓ－ＡＳＯＤＮ３ｍｇ，隔日１次，共７次。对照组中２只注射等量生理盐水，另６只不作处理。注射后５、１０、１５、２５ｄ取血及肝组织采用免疫组化、斑点杂交及原位杂交法检测ＨＤＶＡｇ及ＨＤＶＲＮＡ。结果：于注射结束时（１５ｄ）给药组有７只树肝内ＨＤＶＡｇ及ＨＤＶＲ－ＮＡ转为阴性，对照组８只树中仅１只转为阴性。停止使用Ｓ－ＡＳＯＤＮ１０ｄ后，给药组２只阴转树肝内又可检出ＨＤＶＡｇ和ＨＤＶＲＮＡ，对照组仍有７只可检出。结论：Ｓ－ＡＳＯＤＮ在树体内能有效抑制ＨＤＶ复制及表达，但作用并不完全，可能与用药剂量不足，时间不够长及仅用硫代修饰尚不能直接导向靶基因有关     

基因芯片法测定中国人群细胞色素P4502D6的基因多态性

目的：根据细胞色素P4502D6基因序列的多态性分布特点，针对在中．国人群药物代谢中具有潜在作用的突变位点C188T和G4268C，设计寡核苷酸探针，制备寡核苷酸芯片，探讨基因芯片技术应用于CYP2D6基因分型的可行性，观察中国人群细胞色素P4502D6的基因多态性。 方法：实验于2005-02／08进行。以克隆并已测序的细胞色素P4502D6基因重组质粒作为标准样品，扩增产物与芯片进行杂交，制备基因芯片，测定312名中国健康志愿者（已签署知情同意书）细胞色素P4502D6基因分型，并使用直接测序法对结果进行验证。 结果：312名全部进入结果分析。①312名中国．健康志愿者中CYP2D6＊2和CYP2D6＊10的变异频率分别为CYP2D6＊2W＊10W 8．3％，＊2H＊10W13．5％．＊2M＊10W 10．6％．＊2M＊10H 17．0％，＊2M＊10M 34．6％，＊2H＊10H 9．6％，＊2H＊10m 6.4％。②对部分样本采用直接测序的方法进行进一步确证，结果完全吻合。 结论：①CYP2D6＊2和CYP2D6＊10突变型等位基因在中国人群中出现的频率较高。②基因芯片法简便、快捷，适用于中国人群细胞色素P4502D6基因分型研究。     

寡核苷酸芯片方法检测儿童急性淋巴细胞性白血病融合基因

目的 探讨寡核苷酸芯片在儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)融合基因检测中的应用.方法 针对儿童ALL常见的5种融合基因:TEL/AML1、E2A/PBX1、BCR/ABLp190、BCR/ABLp210、MLL/AF4,设计特异的融合基因片段为芯片探针,合成后用点样仪点片制成寡核苷酸芯片.提取疾病初期白血病患儿的骨髓/外周血标本的总RNA,进行多重巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、荧光标记并与芯片杂交,以检测白血病细胞中特异融合基因.结果 该芯片可以从患儿骨髓样本RNA中准确检测到阳性内参序列、特异的融合基因以及融合位点.结论 采用寡核苷酸芯片方法,可快速、同时筛选出5种染色体结构畸变产生的融合基因及融合位点,为ALL患儿危险分层、治疗选择、预后判断提供重要依据.此种方法应用于筛查初治白血病患儿融合基因表达时优缺点并存,具有一定临床实用价值.     

细胞色素P450 2C9和血管紧张素Ⅱ1型受体基因多态性与血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂厄贝沙坦降压疗效的关系

目的 观察血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)和细胞色素 P450 2C9(CYP2C9)基因变异对高血压患者血管紧张素Ⅱ1 型受体拮抗剂降压疗效个体差异的影响.方法 入选高血压患者 76 例,予单药厄贝沙坦每天 150 mg,治疗 8 周,观察降压疗效.提取血中 DNA,分别用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和微阵列技术进行单核苷酸多态性(SNP)位点(AT1R 1166A/C、573 T/C、-521 C/T,CYP 2C9 1075A/C、1080C/G)的基因型分析.结果 含 AT1R 573 T 等位基因患者,服用厄贝沙坦后,收缩压下降幅度明显大于 CC 基因型患者,分别为(16.47±11.75) vs (7.44±7.50)mm Hg(P＜0.05)而 AT1R 1166A/C、-521 C/T、CYP 2C9 1075A/C、1080C/G 各基因型服药后,血压下降幅度均无显著差异.结论 厄贝沙坦作用受体 AT1R 基因 SNP 位点 573 T/C 可能与其降压疗效有关;未发现 CYP 2C9 基因上的两个 SNP 位点与厄贝沙坦的降压疗效有关.     

基因治疗高血压的研究进展

与传统治疗高血压药物相比,基因治疗不但具有作用特异性强、效果稳定、持续时间长、毒副作用小等优点,而且还有可能从根本上控制具有家族遗传倾向的高血压发生,从而降低人群中高血压的发病率.本文综述了目前基因治疗高血压的研究概况,讨论了基因治疗前景及其面临的主要问题.     

以细胞凋亡通路为靶点的抗肿瘤分子治疗研究进展

细胞凋亡异常与肿瘤的发生存在密切的关系。通过靶向细胞凋亡通路中的关键分子，诱导肿瘤细胞凋亡，成为肿瘤分子治疗的一个热点和方向。本文就细胞凋亡的分子机制及针对凋亡通路中的关键调控分子为靶点的抗肿瘤研究进展进行综述。     

多药耐药基因的单核苷酸多态性研究进展

多药耐药基因(mdr1)是ABC运输系统的重要一员,在药物代谢处理中有重要作用,在多基因疾病的诊断及治疗方面有广阔的应用前景。目前,已经发现mdr1有28个单核苷酸多态性(SNP)位点,其中7个SNP发生在内含子,11个SNP导致了氨基酸的变化。C3435T寂静突变影响了mdr1在十二指肠中的表达与P-糖蛋白的功能,由此可以改变一些药物的代谢。SNP与种族关系密切,年龄对SNP影响不大,C3435T及G2677T/A位点间有连锁关系。     

四物汤对人骨髓基质细胞蛋白质表达的作用

目的：考察四物汤对骨髓基质细胞HFCL增殖及蛋白质表达的影响,探讨四物汤补血作用的分子机制。方法：分别用MTT法、流式细胞术和蛋白质组学方法测定四物汤对HFCL增殖、细胞周期及蛋白质表达的影响。结果：四物汤能促进HFCL的增殖,提高其增殖指数,并使HFCL的12种蛋白质表达上调,5种下调。结论：四物汤能促进HFCL增殖,作用于多个蛋白质靶点,间接发挥补血作用。     

复合探讨PCR定量检测HBV方法的建立及临床应用

我们采用复合探针技术,设计、建立的实时、荧光定量检测ＨＢＶ ＤＮＡ的方祛,对实验条件进行了优化,并对临床提供的２０２份血清标本进行ＨＢＶ ＤＮＡ检测,与ＥＬＩＳＡ方法结果进行比较。 一、资料与方祛 １ 资料：２０２份血清标本由重庆医科大学附属第一医院提供;ＨＢＶ标准质粒由军事医学科学院放射研究所配制,定量;仪器为ｉＣｙｃｌｅｒ自动荧光ＰＣＲ仪（美国ＢＩＯ－ＲＡＤ公司生产）;ＨＢＶ ＥＬＩＳＡ试剂盒由上海科华实业有限公司提供;特异性引物的设计和合成为根据Ｐｒｉｍｅｒ３软件,自行设计并合成了以下引物序列：…     

API4基因为靶的反义寡核苷酸体内外抗肿瘤研究

反义技术是近十几年兴起的一种生物高技术 ,用反义技术封闭和抑制特定基因的表达是基因治疗的重要组成部分。本研究选取ＡＰＩ4基因为靶标进行抗肿瘤反义寡核苷酸的筛选。ＡＰＩ4是凋亡抑制因子在最终发展成肿瘤的转化细胞中表达 ,可抑制ｃａｓｐａｓｅ活性和抗癌药物等诱导的凋亡。选择ＡＰＩ4ｍＲＮＡ二级结构中不稳定区域为反义药物作用的靶点 ,设计了 12条序列 ,将ＨｅｐＧ2细胞接种于 96孔培养板 ,每孔接种 5× 10 3 细胞。待长成 5 0 %～ 6 0 %细胞层后 ,无血清状态下 ,采用ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ试剂转染。每条反义寡核苷酸设置 0 .2…