反义寡脱氧核苷酸抗丁型肝炎病毒的作用

在进行中国人ＨＤＶ核酶活性ｃＤＮＡ克隆及序列分析，并构建含ＨＤＶ核酶质粒（ｐＨＤＶｒｚ２７７）的基础上，进行反义寡脱氧核苷酸抗ＨＤＶ作用的研究。设计合成了一条与核酶结构中起重要作用的７２１￣７３５位核苷酸互补的１５聚反义寡脱氧核苷酸。用其中一条含Ｔ７启动子的一对引物，以ｐＨＤＶｒｚ２７７为模板扩增得到１３１ｂｐＨＤＶ核酶基因片段，再以此为模板用Ｔ７ ＲＮＡ聚合酶进行体外转录，并在转录的同时加入反义     

血管内皮生长因子受体-2及其信号转导作用的研究进展

血管内皮生长因子受体-2(VEGFR2／KDR)及其信号转导在血管内皮细胞的存活、增殖、迁移及通透性增加中起主导作用，是肿瘤发生、发展的限速步骤，KDR及其信号转导通路是抗肿瘤治疗的良好靶标。本文就血管生成中VEGFR-2的作用及相关信号转导，以及在抗肿瘤中的应用作一综述。     

液相色谱/蒸发光散射测定四物汤煎液中单糖和双糖的含量

目的　建立液相色谱 /蒸发光散射 (HPL C- EL SD)测定四物汤煎液中 D-果糖、D-葡萄糖和蔗糖含量的方法。方法　对四物汤煎液进行稀释、醇沉等处理后采用 HPL C- EL SD法分析。结果　 1m L 四物汤煎液中含 D-果糖(33.4± 1.5 ) mg,D-葡萄糖 (2 4 .2± 0 .9) m g,蔗糖 (112 .7± 6 .1) mg;D-果糖在 0 .15～ 3.75 m g/ m L,D-葡萄糖和蔗糖在 0 .15～ 5 m g/ m L ,具有良好的线性关系 ;回收率为 D-果糖 12 8.5 % ,D -葡萄糖 114 .7% ,蔗糖 12 4 .7% ;日内RSD为 D-果糖 3.0 % ,D-葡萄糖 3.2 % ,蔗糖 4 .4 %。结论　四物汤中含有丰富的单、双糖 ;HPL C- EL SD可用于四物汤中单、双糖类物质的分析。     

血管内皮生长因子受体2反义寡核苷酸对人乳癌细胞生长的影响

目的:探讨血管内皮生长因子受体2(KDR)反义寡核苷酸(asONs)在体外对人乳癌细胞生长的抑制作用.方法:采用MTT及Western-blot方法检测4条KDR反义寡核苷酸(asON1、asON2、asON3、asON4)在体外对人乳癌细胞系MCF-7细胞增殖及KDR蛋白表达的抑制作用;asON4作用于MCF-7细胞后,Western-blot检测信号蛋白Bcl-2、Bax、P53表达的变化.结果:asON1、asON2、asON3、asON4在体外以剂量依赖方式抑制了MCF-7细胞的增殖,asON1、asON2、asON3、asON4以0.8 μmol/L剂量给药54 h后,均显著抑制了MCF-7细胞KDR蛋白表达.asON4作用54 h后,MCF-7细胞Bcl-2表达下降,Bax、P53的表达无明显改变.结论:KDR asONs在体外可抑制乳癌细胞的生长.     

基因芯片技术在血液系统疾病研究中的应用

基因芯片技术为在mRNA水平确定基因表达提供了唯一的工具。对全基因组的同时测定不但有助于揭示血液疾病相关的特定的基因表达模式 ,从而用于血液疾病的分子病理、分型、诊断研究 ,还可以用于探究药物作用机制和寻找血液疾病新的治疗靶基因。     

反义核酸药物的合成和纯化

反义核酸药物是能与特定mRNA序列互补的不同长度的短小DNA片段,能够通过与靶mRNA形成杂交双链而干扰基因表达.反义核酸药物的合成、纯化是新药临床前评价的基础.本文就国内外反义核酸药物合成中常用的载体、硫代试剂、脱保护试剂的发展,纯化常用的聚丙烯酰胺凝胶电泳、薄层色谱、高效膜吸附色谱、寡核苷酸纯化柱芯和高效液相色谱等方法进行了综述,对其各自的特点、应用前景及优缺点等进行了介绍.     

基于表面增强拉曼光谱的肝病血清检测技术研究

目的：通过比较正常人与慢性乙肝、肝硬变和肝癌患者血清之间的拉曼光谱差异,探索基于表面增强拉曼散射（ SERS）的血清诊断新方法。方法首先制备纳米银溶胶作为活性基底,分别测量30例正常人和48例慢性乙肝、48例肝硬变、46例肝癌患者血清的增强拉曼信号,并进行正交偏最小二乘法判别分析（ OPLS－DA ）。结果正常人与3组肝病患者血清在位移625、725、806、947、1018、1219、1131、1329、1440、1580、1660 cm－1处均有拉曼峰,且峰强弱存在差异;正常人血清在位移1096和1395 cm－1处有强峰,肝病患者血清在位移887 cm－1有强峰。 ROC曲线下面积（AUC）分别为0．981、0．966、0．984。结论初步研究表明血清SERS图谱可作为肝病早期诊断的一种辅助手段。     

肺癌诊断基因的初步筛选

目的 筛选肺癌细胞恶性转化不同时期差异表达的基因，以期用于肺癌的诊断。方法 应用抑制消减杂交技术(SSH)、测序、cDNA芯片(cDNA Miemarray)、northern blot。结果 利用SSH建立了永生化人支气管上皮细胞(BEP2D)恶性转化不同时期差异表达基因的cDNA文库，其中，A消减文库(BEP2D细胞的cDNA为tester，α粒子照射BEP2D细胞后35代恶性转化细胞R15Hp35的cDNA为driver)有416个克隆，B消减文库(α粒子照射BEP2D细胞后20代转化细胞R15Hp20的cDNA为tester，BEP2D和R15Hp35细胞的cDNA混合后为driver)有301个克隆，C消减文库(R15Hp35细胞的cDNA为tester，BEP2D细胞的eDNA为driver)有586个克隆。对文库中107个克隆单向测序发现：19个克隆在GenBank中没有查到对应的同源序列，其它88个克隆共代表了76个不同的已知基因。然后，将3个文库中全部克隆的cDNA制作成cDNA芯片，用该芯片筛选了15例肺癌组织、5例肺癌旁组织和其他8种癌组织(肝癌、胃癌、食管癌、乳腺癌、白血病、子宫内膜癌、脑神经角质瘤和结肠癌)中mRNA的表达差异。结果，获得肺癌组织高于肺癌旁组织表达的eDNA26个，肺癌旁组织高于肺癌组织表达的31个，2者高于其他8种癌组织的分别为：肺癌旁组织中63个，肺癌组织中87个。将这208个具较大差异表达的基因重新制作成cDNA芯片，再选用临床上同一鳞癌病人鳞癌和鳞癌癌旁组织各1例与该芯片杂交，发现这些筛选出的基因的确在癌组织和癌旁组织中存在较大差异。结论 这些初步筛选出的差异表达基因有望成为肺癌诊断的侯选基因。     

ISIS首次提出反义药物的NDA申请

ISIS公司已完成反义药物fomivirsen的新药应用(NDA)登记。该药用于治疗艾滋病相关巨细胞病毒(CMV)视网膜炎,CMV视网膜炎通常易使患者致盲。1998年2月在芝加哥召开的逆转录病毒及机会感染会议上,ISIS公司的Chandler提供了用fomivirsen治疗CMV视网膜炎的研究结果。研究表明,该药可显著延缓CMV视网膜炎的病情进展。参加的28名受试者都有活动性视网膜炎,CD4细胞计数为0～430。其中18名接受fomivirsen治疗(每周玻璃体内给药一次,连续3周,然后隔月给药)。另外10名作为对照组。治疗组病情进展的平均时间为71d,对照组为14d;其中1例无CD4…