细粒棘球蚴细胞外信号调节激酶基因克隆、序列分析及功能的初步鉴定

目的 从新疆株细粒棘球蚴中克隆细胞外信号调节激酶(EgERK1)基因,进行序列测定、生物信息学分析,蛋白表达及功能初步鉴定.方法 设计特异性引物,从新疆株细粒棘球蚴中提取总RNA,RT-PCR法扩增EgERK1基因,构建pET28a-EgERK1原核表达质粒,测序确定序列并进行生物信息学分析.构建正确的pET28a-EgERK1原核表达质粒,经诱导、表达EgERK1重组蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western印迹检测其生物学功能.结果 RT-PCR扩增出的条带经测序,结果显示其长度为1125 bp,编码374个氨基酸,等电点为6.34,BLAST比对结果提示为一薪基因,命名为EgERK1(EU701008).同源性比较表明,EgERK1与多房棘球绦虫ERK基因(EmMPK1)同源性为95.45%,与线虫、酵母、果蝇和人类等ERK基因的同源性为43.04%～61.88%.进化树分析发现EgERK1和EmMPK1相聚集.功能分析预测EgERK1具有ERK类激酶T-X-Y结构保守区和酶激活功能域.Western印迹显示,原核诱导表达的EgERK1重组蛋白能与抗人ERK1/2抗体发生特异性免疫反应.结论 成功克隆细粒棘球蚴EgERK1新基因,发现EgERK1重组蛋白具有与ERK1/2抗体结合的功能,为进一步研究该基因在寄生虫与宿主相互作用中的功能奠定基础.     

cDNA微阵列分析穿刺手术所致BALB/c小鼠肝损伤基因表达谱变化

目的分析肝穿刺术后BALB/c小鼠肝脏基因表达谱的变化。方法10只BALB/c随机分为两组;实验组和正常组,每组各5只;实验组小鼠开腹直视下肝左叶注生理盐水,8天后采集肝组织标本并提取RNA,cDNA微阵列分析25 000个基因在实验组和正常组小鼠肝组织中的表达水平差异。结果肝穿刺术后共有82条差异基因,其中52条基因表达上调,30条基因表达下调;功能聚类可分为代谢、转录调节、转运、信号转导、炎症反应、细胞增殖与凋亡、细胞周期与细胞骨架及细胞粘附等8类。结论肝穿刺术所致小鼠肝脏基因表达谱发生的改变,涉及多个基因表达调控途径。     

腰椎间盘突出症的非手术治疗现状

腰椎间盘突出症是骨伤科的多发病和常见病，也是严重危害人民群众身心健康的一种疾病，由于诊疗设备技术水平的提高，目前对该病可以获得明确诊断，其诊疗研究也更加深入。为了对腰椎间盘突出症的非手术治疗的现状作一分析，对近10年来有关非手术治疗临床资料进行整理，综述如下，冀其有裨于同道。     

自发性硬膜外出血患者神经功能预后的影响因素及干预对策

目的：探讨SSEH对患者神经功能预后的影响,并提出相应的干预对策。方法选择2005-01-2013-05我院收治的接受手术治疗的SSEH患者29例,比较术前不同神经症状以及不同手术时间间隔对术后神经功能预后的影响。结果术前神经功能完全丧失的患者术后神经功能的恢复率显著低于术前神经功能未完全丧失的患者（P＜0·05）;手术时间0～24 h内的患者术后神经功能的恢复率显著高于手术时间＞24 h的患者（ P＜0·05）。结论患者术前神经功能的受损程度以及手术间隔对神经功能的预后有重要的影响,应在24 h内实施手术。     

把握工具理性的正义

工具理性是与价值理性相对应,是一种把实现个人目标作为评价标准的思维模式.工具理性的正义观是将正义作为保护和获得个人利益或集团利益的工具.工具理性的正义观不是正义的本意,而是其反面,而且已经给人类带来危害.     

盐酸吡格列酮对鼠心脏成纤维细胞增殖的影响

目的 观察胰岛素增敏剂盐酸吡格列酮(PIO)对Wistar大鼠心脏成纤维细胞(CFs)增殖的抑制作用,探讨其与一氧化氮合酶-一氧化氮(NOS-NO)系统活性的关系.方法 采用胶原酶消化法培养Wistar大鼠的CFs、四氮唑蓝(MTT)比色法测定CFs的增殖情况、硝酸还原酶法测定CFs培养上清NO含量、分光光度计法测定CFs培养上清NOS活性.结果 CFs吸光值(A490值)随PIO干预浓度增加和作用时间延长而减低,呈浓度和时间依赖性;5×10-6 mol/L的PIO干预48 h后,CFs培养上清NO含量(221.7±35.3) μmol/L和NOS活性(15.38±1.82) U/mL高于对照组[(112.1±8.9 μmol/L)和(11.24±0.49) U/mL](P＜0.01).结论 PIO能够抑制大鼠CFs的增殖,具有浓度和时间依赖性,其效应可能是通过上调NOS-NO系统的活性来实现的.     

转化生长因子-β1及凋亡相关因子在泡球蚴感染宿主病灶旁免疫细胞中的表达及其意义

目的 探讨泡球蚴感染宿主病灶旁免疫细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)、凋亡及相关因子Caspase-3的变化及其意义.方法 8例配对泡型包虫患者和泡球蚴感染小鼠均采用苏木素-伊红(HE)染色观察病理变化,免疫组织化学技术检测病灶旁免疫细胞TGF-β1以及凋亡相关因子Caspase-3的表达与分布,原位末端标记技术(TUNEL)检测病灶旁免疫细胞凋亡.结果 泡型包虫患者及泡球蚴感染小鼠病灶旁及汇管区均有大量炎性细胞灶性浸润,TGF-β1(P＜0.01)和凋亡相关因子Caspase-3(P＜0.01)高表达,TUNEL结果表明病灶旁免疫细胞发生凋亡,与对照比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 泡球蚴在感染宿主过程中可能通过引起宿主TGF-β1高表达,造成免疫细胞发生凋亡而达到逃避宿主免疫反应长期寄生的目的.

Abstract：

Objective To explore the expression of transforming growth factor-pi (TGF-β1 ) and Caspase-3 in immune cells adjacent to Echinococcus multilocularis (Em) invasion. Methods In 8 paired alveolar echinococcoisis (AE) patients and Em infected mice, pathological changes were observed by Hematoxylin and Eosin (HE) staining. The expression of TGF-β1 and Caspase-3 in immune cells was detected by using immunohistochmistry, and the apoptosis of the immune cells was assayed by TUNEL. Results As compared with the lesion and the distant, TGF-β1 expressed mainly around granuloma,showed significant difference: AE leision and distant tissue ( P ＜ 0. 01) , acompanied with the high expression of Caspase-3 in immune cells ( P ＜ 0. 01). The immune cells showed significant apoptosis ( P ＜ 0. 01). The results of Em mouse model were consistent with AE patients. Conclusion TGF-β1 may play an important role in immune cell apoptosis during Em Evasion.     

高效液相色谱法测定抗纤丸中芍药苷、阿魏酸和黄芩苷的含量

目的:建立同时测定抗纤丸中芍药苷、阿魏酸、黄芩苷3种有效成分的含量方法.方法:Diamonsil C18色谱柱,流动相甲醇-1%磷酸,梯度洗脱;二极管阵列检测器(DAD);检测波长分别为芍药苷230nm,阿魏酸316 nm,黄芩苷280nm,柱温35℃.结果:在3个波长下同时测定3种化合物的含量:芍药苷、阿魏酸、黄芩苷的线性范围分别为0.20～0,60 μg,0.025～0.075μg,1.25～3.75 μg;平均加样回收率分别为100.87%,100.31%,101.05%;RSD分剐为1.03 0A,0.71%,1.88%.结论:该方法灵敏准确、重复性好,可用于本制剂的质量控制.     

循证护理在化疗药物外渗的预防及护理中的应用

循证医学是在经验医学基础上兴起的获取与应用医学证据的科学,强调医疗决策应建立在最佳科学证据的基础上,循证护理是循证医学的延伸,是循证思想在护理学中的实践应用,随着循证护理在护理领域中广泛开展,我科将循证护理应用于化疗药物外渗的预防及护理实践中,取得了满意的效果,现报告如下.……