黄芩苷、栀子苷对神经细胞缺氧缺糖/再灌注损伤的保护作用

 目的 观察黄芩苷、栀子苷对神经细胞缺氧缺糖/再灌注损伤的保护作用,在细胞水平阐明黄芩苷、栀子苷治疗脑缺血/再灌注损伤的作用机制。方法 选用SH-SY5Y细胞,采用缺氧、复氧结合缺糖、复糖的方法,对其进行攻击,模拟人体神经细胞的缺血再灌注损伤,观察黄芩苷、栀子苷对此损伤的治疗作用。结果 缺氧、缺糖8 h结合复氧、复糖12 h对神经细胞可造成明显损伤,导致SH-SY5Y细胞突起皱缩、变圆,可见有部分细胞漂起,细胞轮廓不清,凋亡率明显上升,线粒体的活性下降;而黄芩苷、栀子苷可以显著减轻上述损伤。结论 黄芩苷、栀子苷对缺氧缺糖/再灌注损伤的神经细胞有保护作用。     

血府逐瘀胶囊对兔主动脉SMC增殖脂质过氧化的影响

目前,经皮冠状动脉腔内成形术(percutaneous trans.1uminal coronary angioplasty,PTCA)已发展成为一种较成熟的介入性治疗手段,但PTCA术后约有25%～50%患者在PTCA术后3～6个月内发生再狭窄.PTCA术后再狭窄的形成是一复杂机制.血管平滑肌细胞(VSMC)增殖是PTCA术后再狭窄形成的关键环节[1].有资料显示[1],再狭窄的危险因素与自由基和脂质过氧化物有关.血府逐瘀汤源于<医林改错>,作为活血化瘀的经典名方在防治PTCA术后再狭窄的研究中,已经取得了一些成果,但尚未见有用含PTA术后动物血清合并药物血清进行离体定位靶细胞药理研究的实验.本实验主要观察PTA术后血府逐瘀胶囊治疗药物血清对SMC增殖、脂质过氧化的影响.     

三七提取物对MNNG转化后GES-1细胞的促凋亡作用

目的:应用流式细胞测定法研究灌服三七提取物后的犬血清对胃癌前细胞的促凋亡作用.方法:采用被N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitroso-guanidine, MNNG)进一步转化后的永生化人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞(以下简称MC细胞)作为胃癌前病变细胞的体外研究模型;以三七水提物给彼格犬一次性灌胃,取给药前的血清、给药后2 h和6 h的血清作为实验药物血清.以流式细胞测定法分别检测2 h和6 h两个采血时间点上不同浓度的药物血清对MC细胞作用72 h后的促凋亡作用.结果:这两个时间点的含药血清能明显促进MC细胞的凋亡,与同样条件下用空白血清培养的MC细胞相比其凋亡率显著增加(P<0.05).在两个时间点的药物血清作用下的MC细胞,其G0/G1期细胞比例明显下降(P<0.05),而G2/M期细胞比例显著增加(P<0.05),但S期细胞比例并没有一致性的变化.结论:两个时间点的药物血清对MC细胞都有显著的促凋亡作用,且能显著降低G0/G1期的MC细胞比例及显著增加G2/M期的MC细胞比例,这可能是其抑制MC细胞增殖及促凋亡的原因之一.     

清开灵注射液对缺血/再灌注ECV304细胞凋亡及坏死的影响

在缺血性脑损伤中 ,脑神经细胞、胶质细胞、微血管内皮细胞 ( BMEC)作为缺血级链反应的三个位点 ,一直受到研究者的重视。BMEC作为其中一个位点 ,在缺血性脑损伤中发挥多方面的作用 :包括 BMEC自身的凋亡和坏死 ,缺血再灌注引起 BMEC生化特性及功能的改变所导致血脑屏障的破坏和通透性增加 ,BMEC的促血栓作用 ,介导炎症反应等。因此 ,研究清开灵注射液对缺血 /再灌注内皮细胞凋亡的调节作用 ,对于揭示清开灵注射液治疗缺血性脑血管疾病的机制有重要意义。本实验以 ECV30 4细胞作为研究对象。1　材料和方法1.1　试剂及用品 :乳酸脱…     

漏芦对OLDL诱导U937细胞系形成泡沫细胞过程中CD36表达抑制作用的研究

目的：观察漏芦提取液对OLDL诱导U937细胞表面CD36表达的影响。方法：先用OLDL与U937细胞孵育造成泡沫细胞模型，同时用漏芦提取液对泡沫细胞进行干预，采用流式细胞仪检测CD36的表达情况。结果：漏芦提取液1g/L、500mg/L、250mg/L可不同程度地抑制CD36的表达，且三者呈剂量依赖关系。结论：漏芦抗AS作用可能的机理与其抑制CD36的表达有关。     

黄芪、三七对下肢缺血患者骨髓干细胞体外分化作用的影响

目的探讨黄芪、三七对骨髓干细胞体外分化作用的影响。方法常规采集下肢缺血患者骨髓血,密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞,在黄芪、三七不同浓度条件下贴壁扩增细胞。3周后行镜下细胞的形态学观察,流式细胞仪检测CD34 细胞的百分比。结果细胞呈梭形,束状排列,间杂有少量圆形细胞。与对照组比较,黄芪中剂量和低剂量组、三七中剂量组和高剂量组CD34 细胞的百分比均显著增加,差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。结论黄芪、三七有促进骨髓干细胞向血管内皮前体细胞(EPC)转化和增殖的作用。     

红景天苷对缺氧缺糖损伤的神经细胞线粒体膜电位和凋亡的影响

目的:观察红景天苷对神经细胞系SH-SY5Y细胞缺氧/缺糖损伤时线粒体膜电位和凋亡的影响.方法:四唑盐比色实验(MTT)检测线粒体活性,流式细胞术检测细胞凋亡百分率和线粒体膜电位,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死百分率.结果:缺氧/缺糖损伤2h可诱导SH-SY5Y细胞凋亡和坏死,分别为18.59%(P＜0.01)和4.94%(P＜0.01),形态学观察也发现SH-SY5Y细胞的染色质凝聚,核碎裂,凋亡小体产生,线粒体膜电位和活性分别降低29.17%(P＜0.01),38.80%(P＜0.01),随着缺氧/缺糖时间的延长,细胞凋亡的发生也越来越多,坏死的细胞也增多,线粒体膜电位和活性进一步下降;红景天苷能显著降低SH-SY5Y细胞凋亡及坏死的百分率,提高线粒体膜电位和活性,其作用随剂量增加而作用增加.结论:红景天苷可抑制缺氧/缺糖损伤所致的线粒体膜电位和活性的降低,从而具有稳定线粒体膜电位的作用,抑制神经细胞凋亡的发生.     

益气、活血药对血管紧张素Ⅱ建立的心肌细胞模型的影响

目的 研究益气、活血药对心肌细胞模型的影响。方法 血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用心肌细胞建立模型,用不同剂量的益气、活血药及其配伍复方进行干预。结果 益气、活血、益气活血药物均有保护心肌细胞的作用,益气活血复方疗效优于益气药和活血药,且较小剂量益气药与较大剂量的活血药配伍后作用明显(P<0.05)。结论在一定条件下,益气药与活血药配伍应用可增强疗效,且存在量效关系。     

川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导的人α1(Ⅰ)胶原基因启动子活性的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人α1(Ⅰ)胶原基因启动子活性的调控作用和川芎嗪干预的影响环节.方法将2.5 kb长度的人α1(Ⅰ)胶原基因启动子片段与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)"报告基因"组成的重组体pC0LH 2.5,采用脂质体法转染至培养的大鼠心肌成纤维细胞,分别加入AngⅡ和川芎嗪,ELISA法测定CAT活性.结果 AngⅡ可明显促进pCOLH 2.5片段的启动活性,川芎嗪能抑制AngⅡ的促pC0LH 2.5启动活性(P＜0.05).结论川芎嗪能在转录水平上阻断AngⅡ诱导的人α1(Ⅰ)胶原基因启动子活性增加,从而抑制Ⅰ型胶原的合成,阻滞和延缓心肌纤维化的发生发展.     

心气虚证与血浆核酸含量关系的研究

菲啶溴红具有与核酸特异性结合生成较强荧光的特性,因此以菲啶溴红为探针测定核酸的荧光方法可检测组织匀浆及血浆中的核酸含量。利用此方法测定了36例正常人和41例心气虚患者的血浆核酸含量。结果显示心气虚患者的血浆核酸含量明显低于正常人,两者之间差异显著(P<0.01),提示心气虚证可影响脾胃的运化功能,增加全血及血浆粘度,从而使血流速度减慢,而造成体内核酸合成及代谢障碍,从而使患者血浆核酸含量下降。