丹参素对缺糖-缺氧损伤神经细胞的保护作用

研究表明脑组织缺血性损伤过程中存在着神经细胞凋亡。且神经细胞凋亡在缺血性脑损伤中起十分重要的作用。药物可通过干预神经细胞凋亡过程阻止缺血性损伤的进一步发展，而发挥对神经细胞损伤的保护作用。细胞内Ca^2 超载是缺血性脑损伤的发病机制之一，在缺血后神经元凋亡发生中也     

氧化低密度脂蛋白对人血管内皮细胞ECV-304促增殖及诱导凋亡的作用

目的:探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对血管内皮细胞损伤作用的多样性。方法: 通过细胞形态学、台盼蓝活细胞计数、细胞毒四唑盐(MTT)比色试验、乳酸脱氢酶(LDH)、流式细胞凋亡和细胞凋亡小分子量DNA片段凝胶电泳测定法, 观察(0.1、1、10、100、150和200)mg/L的ox-LDL的条件培养液对人血管脐静脉内皮细胞ECV-304的影响。结果:(0.1-10)mg/L的ox-LDL对ECV-304细胞具有促增殖作用, 而增加浓度达100mg/L及以上时, 其表现则主要是对ECV-304的细胞毒性;而且, 这种细胞毒性以当ox-LDL的浓度达到150和200mg/L时, 在12h开始诱导ECV-304细胞出现凋亡, 分别达15.86%和21.89%。而当ox-LDL作用ECV-304细胞18h后, 则出现伴随凋亡的细胞坏死。结论:ox-LDL具有很强的细胞毒性, 其对内皮细胞的细胞毒性经历了促细胞增殖、凋亡前期、细胞凋亡和凋亡后的坏死等过程。     

川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导的人α_1(I)胶原基因启动子活性的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人α1(Ⅰ)胶原基因启动子活性的调控作用和川芎嗪干预的影响环节。方法将2.5kb长度的人α1(I)胶原基因启动子片段与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)“报告基因”组成的重组体pCOLH2.5,采用脂质体法转染至培养的大鼠心肌成纤维细胞,分别加入AngⅡ和川芎嗪,ELISA法测定CAT活性。结果AngⅡ可明显促进pCOLH2.5片段的启动活性,川芎嗪能抑制AngⅡ的促pCOLH2.5启动活性(P<0.05)。结论川芎嗪能在转录水平上阻断AngⅡ诱导的人α1(I)胶原基因启动子活性增加,从而抑制I型胶原的合成,阻滞和延缓心肌纤维化的发生发展。     

红景天苷对缺氧 缺糖损伤的神经细胞线粒体膜电位和凋亡的影响

目的：观察红景天苷对神经细胞系SH—SY5Y细胞缺氧／缺糖损伤时线粒体膜电位和凋亡的影响。方法：四唑盐比色实验（MTT）检测线粒体活性，流式细胞术检测细胞凋亡百分率和线粒体膜电位。荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死百分率。结果：缺氧／缺糖损伤2h可诱导SH—SY5Y细胞凋亡和坏死。分别为18．59％（P〈0．01）和4．94％（P〈0．01），形态学观察也发现SH—SY5Y细胞的染色质凝聚。核碎裂，凋亡小体产生，线粒体膜电位和活性分别降低29．17％（P〈0．01），38．80％（P〈0．01），随着缺氧／缺糖时间的延长，细胞凋亡的发生也越来越多，坏死的细胞也增多，线粒体膜电位和活性进一步下降；红景天苷能显著降低SH—SY5y细胞凋亡及坏死的百分率，提高线粒体膜电位和活性，其作用随剂量增加而作用增加。结论：红景天苷可抑制缺氧／缺糖损伤所致的线粒体膜电位和活性的降低，从而具有稳定线粒体膜电位的作用，抑制神经细胞凋亡的发生。     

PTA术后血府逐瘀胶囊药物血清对兔VSMC分泌MIP-1 MCP-1的影响

目的:探讨PTA术后血府逐瘀胶囊药物血清对兔VSMC分泌M1P-1、MCP-1的影响.方法:首先建立颈动脉粥样硬化狭窄模型,运用球囊原位扩张和喂饲高脂饲料致PrA术后再狭窄模型,造模成功后给予含血府逐瘀胶囊和西药组(普伐他汀、巴米尔)的饲料进行治疗4周,获取模型动物和给药动物血清;采用ELISA法观察药物血清作用12h、24h时,对兔VSMC分泌MIP-1、MCP-1的影响.结果:①血府逐瘀胶囊和西药组药物血清作用12h均能显著抑制VSMC分泌MIP-1,与模型血清组比较,P＜0.05;但随作用时间的延长,24h血府逐瘀胶囊未显示出抑制作用,而西药组仍具有显著的抑制作用,两者间比较有显著性差异,P＜0.05.②二组药物血清作用12h、24h均未显示出抑制VSMC分泌MCP-1的作用.结论:①血府逐瘀胶囊具有抑制VSMC分泌MIP-1的作用,但随作用时间的延长作用逐渐减弱,比西药(普伐他汀、巴米尔)的作用差;②验证了普伐他汀、巴米尔具有抑制炎症反应作用,同时也为血清药理学的合理性提供了一个很好的佐证.     

红景天苷对缺氧/缺糖损伤神经细胞的保护作用

目的 :以SH-SY5Y细胞缺氧 /缺糖损伤为模型 ,观察红景天苷对神经细胞保护的作用。方法 :流式细胞术检测细胞凋亡百分率及细胞内 [Ca²⁺ ]i浓度 ,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死百分率 ,用试剂盒显色法测定LDH的含量。结果 :缺氧 /缺糖损伤 2h可诱导神经细胞凋亡和坏死 ,分别为 18.5 9% (P<0.01)和 4 .94 % (P<0.01)。形态学观察也发现大量神经细胞染色质凝聚 ,核碎裂 ,凋亡小体产生 ,并显著增加细胞内 [Ca²⁺ ]i浓度和LDH的释放 ,分别为 8.46nmol·L^-1(PP<0.01)和 16 .5 9% (P<0.01) ,并随缺氧 /缺糖损伤时间的延长而明显增高 ;红景天苷 (1～ 3μmol·L^-1)能显著降低神经细胞凋亡及坏死的百分率 ,降低细胞内 [Ca²⁺ ]i浓度 ,减少LDH的释放 ,其作用随剂量增加而作用增强。结论 :红景天苷具有抑制SH-SY5Y细胞凋亡的作用 ,可对神经细胞起到保护作用 ,这种作用可能与其降低细胞内 [Ca²⁺ ]i浓度有关。     

降脂通脉方药理血清对血管内皮细胞影响的实验研究

目的:研究降脂通脉方药理血清对高脂血清所致内皮细胞(EC)损伤的影响.方法:采用给家兔灌服降脂通脉方后取其血清加至细胞培养基中进行实验(血清药理学方法),观察EC形态及功能变化.结果:中药降脂通脉方血清组,细胞形态大致正常,降脂通脉方药物血清可减少乳酸脱氢酶(LDH)释放,使6酮-前列环素F1α(6-keto-PGF1α)含量增加,降低ET的含量.结论:降脂通脉方药理血清对高脂血清所致内皮细胞损伤具有保护作用,保护EC可能是本方抗AS的作用机制之一.     

血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞凋亡与增殖的时相特征及益气活血药对其影响

目的 动态观察心肌细胞在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）作用后细胞凋亡与增殖的变化情况及益气、活血中药对其的影响.方法 用AngⅡ作用于培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞,利用图像分析系统、流式细胞仪、生化测定等,观察作用不同时间心肌细胞的搏动幅度、节律、频率、蛋白质含量、细胞面积大小、细胞凋亡情况以及益气、活血药对其的影响.结果 模型组于实验24～48 h细胞搏动频率加快,以24 h搏动幅度最大;24 h心肌细胞面积增大,48 h明显增大;蛋白质含量于实验24 h增加,48 h达到最高含量;细胞数量12～48 h有增多趋势,而从24 h有细胞凋亡,48～72 h凋亡率逐渐增高,72 h达到最高（P＜0.05或P＜0.01）,说明心肌细胞在肥大增生为主期（24～48 h）进入凋亡为主期（48～96 h）,益气、活血药均有良好的防治作用,尤以益气加活血药作用明显（P＜0.05,P＜0.01）.结论 AngⅡ作用于心肌细胞后存在肥大增生时间窗与细胞凋亡时间窗的特征.细胞肥大增生为主时,可能出现心肌肥大,细胞凋亡可能是由心肌肥大向心力衰竭转变的机制之一;益气活血药对其有改善作用.     

补气中药党参、黄芪对血小板钙调蛋白活性的影响

中医理论认为气为血帅,气行血行。气病可以导致血病,气虚或气滞皆可以引起血淤。据临床观察冠心病的基本病机是气虚血淤。气虚是本,血淤是标,是因虚致淤。由于血小板功能亢进在冠心病的发生与发展中具有重要的作用。我们以往的研究工作证实,参芪可以抑制冠心病患者血小板聚集,能抑制PDE活性,增加血小板内cAMP含量;本研究在此基础上,进一步探讨党参黄芪对钙调蛋白(CaM)活性的影响。     

丹参素对缺氧/缺糖损伤的神经细胞线粒体膜电位和凋亡的影响

目的:观察丹参素对神经细胞SH-SY5Y缺氧/缺糖损伤时线粒体膜电位(MMP)和凋亡的影响。方法:将SH-SY5Y细胞分为5组:对照组、模型组、尼莫地平组及丹参素15、30mg/L组,给予相应处理后分别培养2、4、6、12h。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色实验检测线粒体活性,流式细胞术检测细胞凋亡百分率和线粒体膜电位,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死百分率。结果:缺氧/缺糖损伤2h,模型组的线粒体活性和MMP水平较对照组显著降低(P<0.01),并随缺氧/缺糖损伤时间的延长而变化越显著。而细胞凋亡和坏死的百分率均较对照组显著升高(P<0.01),形态学观察也发现染色质凝聚,核碎裂,凋亡小体产生,随着缺氧/缺糖时间的延长,细胞凋亡的发生也越来越多,坏死的细胞也增多。丹参素能显著提高SH-SY5Y细胞线粒体膜电位和活性,降低细胞凋亡及坏死的百分率,其作用随剂量增加而作用增加。结论:丹参素可抑制缺氧/缺糖损伤所致的线粒体膜电位和活性的降低,从而具有稳定线粒体膜电位的作用,抑制神经细胞凋亡的发生。