胚胎和新生大鼠神经干细胞培养与分化的特性比较

目的：比较胚胎和新生大鼠神经干细胞的体外培养与诱导分化特性，为脊髓损伤、神经再生等疾病的治疗提供参考依据。方法：实验于2004-11／2005-05在安徽医科大学微生物学实验室完成。选取清洁级孕12d的SD大鼠和新生1d的SD大鼠各1只。①分别将胚胎鼠和新生鼠的大脑皮质体外分离培养，每3天换液1／2，每7d传代1次。②选取第3代神经干细胞克隆球吹打成单细胞悬液接种于预先涂有多聚赖氨酸的盖玻片的12孔培养板中，补足神经干细胞分化培养基，继续培养7d，进行神经干细胞的诱导分化。③通过形态学观察和Nestin免疫细胞化学鉴定，以及5-溴脱氧尿核苷法检测神经干细胞的增殖能力，并检测分化成熟的神经细胞标志抗原MAP2、胶质纤维酸性蛋白抗原的阳性细胞数及细胞总数。结果：①胚胎鼠与新生鼠原代、传代、分化培养的细胞形态学观察结果：胚胎鼠形成的神经球数量和每个神经球所含细胞数均多于新生鼠。胚胎鼠与新生鼠培养的球形克隆均可连续传代获得大量亚克隆细胞，并诱导分化成3种主要形态的神经细胞。②神经干细胞的鉴定结果：原代和传代的细胞均呈神经干细胞标志性蛋白-Nestin阳性反应，结合悬浮培养有神经球形成的现象，证明所观察细胞为神经干细胞。③胚胎鼠与新生鼠不同时间段单位面积Nestin与5-溴脱氧尿核苷阳性细胞数、细胞总数，阳性率的比较：两组培养1，3，7，11，14，28d后单位面积Nestin与5-溴脱氧尿核苷阳性细胞数、细胞总数及阳性率均有显著差异（t=2．41～92．7l，P〈0．01或0．05）。④胚胎鼠与新生鼠神经干细胞分化指标的测定：胚胎鼠及新生鼠的MAB阳性细胞分别为（32．6&;#177;5．6）％，（30．7&;#177;6．7）％，抗原胶质纤维酸性蛋白阳性细胞分别为（47．5&;#177;9．4）％，（50．3&;#177;8．9）％，P均〉0．05。结论：从胚胎鼠和新生鼠的大脑皮质均能够成功分离培养出神经干细胞，表达神经干细胞特异性标志蛋白Nestin，并具有自我更新及体外扩增传代能力。胚胎鼠神经干细胞数量多且增殖能力强，更适合用于神经再生与修复的临床治疗。     

双龙接骨丸对SD大鼠骨折愈合影响的实验研究

目的研究双龙接骨丸对SD大鼠骨折愈合过程中骨痂生长量及骨痂中微量元素(Zn、Cu)含量的影响。方法将36只SD大鼠造成桡骨中下段实验性骨折,随机分为空白对照组、伤科接骨片组、双龙接骨丸组,每天分别以生理盐水、伤科接骨片悬液、双龙接骨丸生药液灌胃。术后第7、14、21天每组以断颈法处死4只大鼠,取其双侧桡骨,摄X片后以电光天平称量桡骨重量差异,再以原子吸收光谱分析法检测骨痂中锌、铜含量。结果双龙接骨丸组大鼠骨痂量及微量元素含量均高于其余两组(P<0.05或P<0.01),X摄片也显示双龙接骨丸组骨痂形成及骨折愈合程度好于其余两组。结论双龙接骨丸可明显促进SD大鼠在实验性骨折愈合过程中骨痂的形成,并有提高骨痂中微量元素含量的作用。     

分期综合治疗骨化性肌炎4例

将骨化性肌炎(Myositis ossificans)分为早、中、后三期，分别用局部敷药、局部薰洗、内服药物、手法按摩等方法进行综合治疗。共治疗4例，均获良效。     

髋臼骨折治疗方法探讨

目的 探讨髋臼骨折的治疗方法及效果.方法 对2001年3月～2005年10月收治的31例髋臼骨折患者的临床资料进行回顾性分析.9例无明显移位的骨折予牵引等保守治疗,22例行切开复位、内固定术.结果 31例均获得随访,随访时间为6个月至5年,平均2年9个月.保守治疗9例,优3例,良5例,可1例,差0例,优良率88.9%.手术治疗22例,优11例,良8例,可3例,差0例,优良率86.4%.结论 对单纯无移位的骨折采用牵引治疗效果较好,但绝大部分髋臼骨折需手术治疗,术前影像学检查、明确手术指征、确定手术方案、把握手术时机,术中解剖复位、可靠的内固定及术后早期功能锻炼,对髋臼骨折患者术后的功能恢复极为重要.     

新生和成年大鼠雪旺细胞培养、纯化的实验研究

目的：比较新生和成年大鼠雪旺细胞（Schwann cells，SCs）的体外培养和纯化方法。方法：分别取新生和成年SD大鼠的坐骨神经，用混合酶消化法、差速贴壁法和低浓度胰酶快速消化法进行培养和纯化，通过形态学观察和S-100免疫细胞化学鉴定，并行MTF法检测细胞增殖能力。结果：两组细胞生长状态良好，均呈S-100免疫细胞化学反应阳性，纯度均达95％以上；由生长曲线显示新生鼠SCs生长更快，第2代SCs倍增时间：新生鼠3d、成年鼠4d。结论：从新生和成年大鼠坐骨神经能成功分离培养出大量高纯度的SCs，新生鼠SCs增殖能力更强。     

上胸椎骨折脱位的后路手术方法探讨

目的总结分析上胸椎骨折脱位的临床特点及手术治疗的效果。方法回顾性分析18例上胸椎骨折脱位的临床资料。3例单纯压缩性骨折予保守治疗,其余15例行后路切开复位、椎管减压、钉棒内固定、植骨融合术。结果18例均获得随访,平均时间2年1个月。A级10例术后无恢复;B级3例术后进到D级1例、C级2例;C级2例术后进到D级1例、E级1例;D级1例恢复正常;E级2例无恶化,无内固定失败。结论上胸椎骨折脱位的临床特点为损伤外力强大,脊柱、脊髓损伤严重,多发伤合并率高。对不稳定骨折即使是合并完全性脊髓损伤者,应尽量考虑早期手术减压并稳定脊柱,以利患者的早期康复治疗。     

椎弓根钉复位固定结合注射型硫酸钙椎体成形术治疗胸腰椎骨折

目的 总结椎弓根钉复位固定结合注射型硫酸钙(CSC) 椎体成形术治疗胸腰椎骨折的方法与疗效.方法 对23 例(25椎)胸腰椎骨折采用切开复位椎弓根钉固定,用特定注射器经伤椎椎弓根穿刺注入CSC进行椎体成形术治疗,影像学评估术前、术后及取钉12个月后矢状位指数(SI)及椎体前、后缘高度压缩率变化.结果 平均每个椎体注入C...