体外嗜碱性粒细胞激活试验法的建立

目的 建立基于流式细胞仪检测的体外嗜碱性粒细胞激活试验（human basophil activation test,h-BAT）方法,并探索该方法用于Ⅰ型变态反应检查的可行性。方法 利用人源白血病嗜碱性粒细胞KU812在Ⅰ型变态反应过程中经阳性剂激活后,细胞特异性表面抗原CD63和CD203表达特异性增强的原理建立体外Ⅰ型变态反应模型,并同步用人组胺酶联免疫法进行验证。结果 确定以终浓度为2μg·mL^-1的N-甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸为阳性剂,孵育2 h作为流式方法检测嗜碱性粒细胞激活的阳性成立条件,细胞相对组胺释放百分比增高结果进一步确认了阳性成立条件。结论 h-BAT法有测试简便、评价客观等优点,是一种较好的过敏反应细胞模型,可以用于现有豚鼠试验的替代。     

HPLC测定盐酸洛美利嗪胶囊的含量及有关物质

目的建立盐酸洛美利嗪胶囊的含量测定及有关物质检查方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Diamonsil-ODS柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.001 mol·L-1十二烷基硫酸钠溶液(60∶40)为流动相,流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,波长225 nm。结果盐酸洛美利嗪与各主要杂质及强制破坏产生的降解产物的杂质峰均分离良好,盐酸洛美利嗪在17.04～153.40μg·mL-1内与峰面积呈良好线性关系,r=1.000,回收率为99.8%(RSD=1.12%,n=9),供试品溶液在24 h内稳定。结论本法专属性强,结果准确,方法灵敏可靠,可用于盐酸洛美利嗪的含量测定和有关物质检查。     

毛细管气相色谱法测定盐酸头孢他美酯中残留溶剂

目的 建立顶空进样和直接进样毛细管气相色谱法测定盐酸头孢他美酯中的残留溶剂. 方法 异丙醇、乙酸乙酯、丙酮测定采用顶空进样法, 色谱柱：HP INNOWAX PEG 20M毛细管柱(30.0 m×320μm, 0.25 μm), 柱温为50 ℃, 维持5 min, 以每分钟30 ℃速率升至200 ℃, 维持3 min , 二甲亚砜为溶剂; 二甲基甲酰胺测定采用直接进样法, 色谱柱为DB 624(6%氰丙基苯基 94%二甲基聚硅氧烷固定液)石英毛细管柱(30.0 m×0.53 mm,3.0 μm), 柱温为100 ℃, 维持6 min, 以每分钟30 ℃速率升至200 ℃, 维持5 min, 二甲亚砜为溶剂. 结果 被测物均能得到很好的分离, 峰面积与浓度呈良好的线性关系, 精密度和回收率良好. 结论 该法可用于盐酸头孢他美酯原料药中残留溶剂的检测.     

HPLC-ELSD法测定妥布霉素的含量

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)检测法分析妥布霉素含量。方法采用A g ilen t ZorbaxSB-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为0.2m o l/L三氟乙酸溶液∶甲醇(95∶5),流速1.0m l/m in,漂移管温度40℃,雾化气体压力3.5bar。结果妥布霉素在199.45~1748.99μg/m l浓度范围内,其峰面积对数与浓度对数呈较好的线性关系(r=0.9989),检测限和定量限分别为2μg/m l和6μg/m l。结论方法准确可靠,可用于产品质量控制。     

高效液相色谱法测定来氟米特片剂的含量

目的建立来氟米特片剂含量测定的高效液相色谱法。方法DiamonsilTM C18色谱柱( 250 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为甲醇-水-醋酸 ( 75∶ 25∶0.1)，检测波长260 nm。 结果在0.1～10.0 mg·L^-1浓度范围内，浓度与样品峰面积呈良好线性关系 (r＝0.999 8)，平均加样回收率100.5 %，RSD 0.6%(n＝5)。结论该方法简便、可靠，能够满足来氟米特片剂的含量测定要求。     

HPLC法测定盐酸头孢他美酯中的有关物质和聚合物

目的:建立HPLC梯度洗脱法同时测定盐酸头孢他美酯中的有关物质和聚合物。方法:采用Thermo AcclaimTM120 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为乙腈-甲醇-水-磷酸盐缓冲液(180︰47.5︰750︰67.5),流动相B为乙腈-甲醇-水-磷酸盐缓冲液(540︰142.5︰250︰22.5),梯度洗脱(0 min,0%B;2 min,0%B;30 min,100%B;45 min,100%B;46min,0%B;55 min,0%B),流速为1.0 m L·min-1,检测波长为233 nm。结果:盐酸头孢他美酯与中间体、分解产物完全分离。杂质头孢他美酸、AE活性酯和7-氨基-3-去乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA)的回收率分别为97.8%、98.3%和104.4%,重复性RSD为2.8%,定量限为0.04~0.21μg·m L-1。各有关物质测定结果,头孢他美酸为1.0%~1.6%,异构体1为0.2%~0.9%、异构体2为0.1%~0.2%、二聚物1为0.1%~0.3%、二聚物2为0.2%~0.8%。结论:建立的方法经方法学验证可用于本品的质量控制。     

电感耦合等离子体-质谱法测定硫酸氢氯吡格雷(Ⅰ型)中元素杂质的残留量

目的:建立基于四极杆碰撞/反应池(DRC)技术的电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定硫酸氢氯吡格雷中镉(Cd)、铅(Pb)、砷(As)、汞(Hg)、钴(Co)、钒(V)和镍(Ni) 7种元素杂质的分析方法。方法:采用5%硝酸溶液超声溶解样品后,用密闭超高压微波消解技术对样品进行了物质消解,同时应用四极杆碰撞/反应池(DRC)技术消除多原子离子对待测元素的干扰,并选用铟(In)、锗(Ge)、铋(Bi)、钪(Sc)元素为内标混合液校正基体干扰和漂移。结果:7种元素杂质的检测下限为0.001～0.013μg·L^-1,7种元素杂质的RSD均小于4.0%,通过添加标准回收试验,7种元素杂质的回收率在92%～110%范围内。3批样品中7种元素杂质检测结果均符合要求。结论:该法简便、快速、灵敏,可准确测定硫酸氢氯吡格雷(Ⅰ型)中7种元素杂质的残留量。     

原子吸收分光光度法测定辅料无水亚硫酸钠中的锌残留量

目的：建立无水亚硫酸钠中锌含量的检查方法。方法：采用乙炔-空气火焰原子吸收分光光度法测定。结果：锌的检测限为0．01gμg·mL-1，锌在0．25-1．10gμg·mL-1范围内呈良好的线性关系（r=0．9978），加样回收率在95．4％-102．0％。结论：本法专属性强，准确、快速、灵敏，方法可靠，适用于无水亚硫酸钠中锌含量的测定。