维生素C对TNF-α及血清剥夺诱导的人髓核细胞凋亡的作用

目的探讨维生素C(Vitamin C,Vit C)在TNF-α及血清剥夺诱导人椎间盘髓核细胞凋亡中的作用及机制。方法取脊柱矫形手术患者的髓核组织,消化法获得正常髓核细胞,取第3代细胞按不同处理因素分为Vit C作用组(A组)、TNF-α诱导组(B组)和血清剥夺组(C组),每组再分为以下亚组:A组分为A1组(基础培养液)、A2组(100μg/m L Vit C)、A3组(200μg/m L Vit C);B组分为B0组(对照组)、B1组(100 ng/m L TNF-α)、B2组(100μg/m L Vit C+100 ng/m L TNF-α)、B3组(200μg/m L Vit C+100 ng/m L TNF-α);C组分为C0组(对照组)、C1组(FBS浓度由8%降低为2%)、C2组(2%FBS+100μg/m L Vit C)、C3组(2%FBS+200μg/m L Vit C)。各组作用24 h后,采用流式细胞术检测各组膜联蛋白V、碘化丙啶双染后髓核细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测p53(基因编码相对分子质量为53×103的蛋白质)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)、Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、Sox9和糖胺多糖(Aggrecan)m RNA表达。结果 A组:与A1组比较,A2、A3组的Vit C均能降低髓核细胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达(P0.05),但A2、A3组间比较差异无统计学意义(P0.05);A2、A3组的Vit C可促进髓核细胞Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、Aggrecan、Sox9 m RNA表达,且A3组促进作用显著大于A2组(P0.05)。B组:与B0组比较,B1组TNF-α促进了髓核细胞凋亡,增加了髓核细胞p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达(P0.05);与B1组比较,B3组的Vit C能降低髓核细胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达,而B2组的Vit C则增加其凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达,差异均有统计学意义(P0.05)。C组:与C0组比较,C1组2%FBS能诱导髓核细胞凋亡,但降低了髓核细胞p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达(P0.05);与C1组比较,C3组的Vit C能降低髓核细胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达,而C2组的Vit C则增加其凋亡及p53、FAS m RNA表达,差异有统计学意义(P0.05)。结论 Vit C能延缓或降低髓核细胞凋亡、促进细胞外基质合成与分泌,200μg/m L Vit C可延缓或降低100 ng/m L TNF-α和2%FBS诱导的凋亡,而100μg/m L Vit C则促进其诱导的凋亡。     

金丝桃素纳米制剂的设计与发展

金丝桃素是从金丝桃属植物中分离得到的一种高效的天然光敏剂和靶向抗肿瘤药,但由于本身的疏水性使其应用受到限制。本文对金丝桃素的性质及在纳米制剂中的抗肿瘤应用进行了概述,结合当前的研究现状,为金丝桃素纳米制剂的设计和发展提供了科学依据。     

体外培养人正常椎间盘髓核细胞与退变髓核细胞的生物学性状比较：可以为干预退变髓核细胞提供最佳时机吗？

背景：人体椎间盘是一个承受载荷却又缺乏血管的结构,因而容易发生退行性变,但椎间盘退变的机制尚不明确。 目的：通过体外培养人正常椎间盘髓核细胞与退变髓核细胞生物学性状比较,认识退变髓核细胞的细胞学退变时机。 方法：分离、培养人正常及退变椎间盘髓核细胞,对两种细胞采用光镜、电镜等形态学方法进行大体形态和超微结构观察,采用生长曲线和XTT实验研究两种细胞的生长动力学差异,测定髓核细胞的活力和细胞Ⅱ型胶原及糖胺多糖的mRNA表达。 结果与结论：退变椎间盘细胞至少要比正常椎间盘细胞提前2代出现形态学老化表现。退变髓核细胞表现为G1期阻滞,使细胞不能进入S期,细胞有丝分裂受到抑制。退变髓核细胞总体来说,生长要比正常髓核细胞快,但老化也较快。退变髓核细胞自第1代开始,Ⅱ型胶原和糖胺多糖的mRNA表达比同期正常髓核细胞低得多。说明在体外培养条件下,退变髓核细胞持续增殖能力低,更容易衰老、凋亡。提示退变髓核细胞体外培养衰老较快,进行干预试验逆转椎间盘退变的最佳时机为传2代之前的细胞。     

人正常椎间盘髓核细胞体外不同培养代次的生物学性状分析：适应于组织工程椎间盘种子细胞的选择**

背景：目前用作组织工程椎间盘研究的种子细胞主要来源于体外培养的髓核细胞,而体外培养的髓核细胞传至一定代次后即出现老化现象,老化的细胞失去生长能力不适于组织工程研究。 目的：比较不同代次正常髓核细胞的形态学、增殖特性以及细胞的主要细胞外基质成分基因表达情况。 方法：以酶消化法分离、培养人正常椎间盘髓核细胞,对不同代次髓核细胞采用光镜、电镜等形态学方法进行大体形态和超微结构观察,采用XTT实验检测不同代次细胞间的生长动力学差异,测定髓核细胞的活力和细胞Ⅱ型胶原及糖胺多糖mRNA表达。 结果与结论：传3代之前细胞形态饱满,胞浆丰富,细胞呈多角形、短梭形,细胞内细胞器丰富,形态正常,线粒体含量少,核糖体含量多,说明细胞代谢旺盛,增殖能力强,生长曲线和XTT实验也提示传3代之前髓核细胞活性高,增殖能力强,细胞活力高,细胞外基质分泌旺盛。从传4代起,部分细胞形态逐渐向长梭形演化,逐渐表现为成纤维细胞的形态,说明细胞开始出现“返祖”现象,也称为老化现象,细胞的生长趋缓,传六七代后细胞均表现为长梭形,粗面内质网扩张,线粒体增多,细胞活力降低,细胞外基质明显减少,生长处于停滞状态。实验结果提示,体外培养条件下,人髓核细胞前3代细胞形态良好,增殖能力强,适合作为组织工程椎间盘的种子细胞,而细胞传4代后增殖能力逐渐减弱,不宜作为组织工程椎间盘的种子细胞。     

北京市朝阳区社区卫生服务管理现状的调查

采用问卷调查和小组访谈分别调查147名和13名职工,了解目前北京市朝阳区社区卫生服务的运行状况。结果显示,66．7％的人认为“任务重,专业人员少”是工作中的主要问题。实行收支两条线的社区卫生机构职工中约50．0％对本单位的工资分配制度不满意,收入与劳动付出不成正比。建议统筹朝阳区城乡社区卫生及四种运行模式的发展;完善绩效考核方案和质量控制方案;适度增加社区卫生服务机构的编制或提高外聘人员的待遇。     

经肛门治疗新生儿巨结肠术中护理

目的 结合新生儿巨结肠特点,探讨对术中护理的要求.方法 对50例新生儿巨结肠进行经肛门巨结肠根治术,积极完善术前准备,肠道准备和纠正营养不良,水电解质紊乱和酸碱失衡.术中按新生儿手术要求进行术中配合,严格控制手术间温度,密切观察术中生命体征改变.结果 50例新生儿全部成活,35例痊愈,15例有不同并发症.结论 新生儿巨结肠发病早,病情重,新生儿期手术风险大,积极完善术中护理是提高手术成功率的关键.     

肝阳上亢证的发病特点调查研究

目的 :探讨肝阳上亢证的发病与性别、年龄、职业及季节的关系。方法 :要求病人严格按调查表填写有关内容 ,再用 χ2 检验分析。结果 :肝阳上亢证的发病男性多于女性 ,但无统计学意义 ;45岁前发病率较低 ,脑力劳动者多于体力劳动者 ,与季节关系不大。结论 :肝阳上亢证的发病与年龄、职业关系密切 ,临床辨证值得关注     

肝阳上亢证发病特点调查研究

目的：探讨肝阳上亢证的发病与性别、年龄，职业及季节的关系。方法：选择辨证属肝阳上亢者252例，按调查表填写有关内容，用χ^2检验 进行统计分析，结果：肝阳上亢证的发病男性多于女性，45岁前发病率较低，脑力劳动者多于体力劳动者，与季节无明显关系，结论：肝阳上亢证的发病与年龄，职业关系密切，临床辨证值得关注。     

温心胶囊对慢性心功能不全大鼠心功能和心肌基质金属蛋白酶组织抑制物-1表达的研究

研究温心胶囊对慢性心功能不全(CCI)大鼠心功能和心肌基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP—1)表达的影响,探讨TIMP—1在CCI发病中的作用及该胶囊防治CCI心肌重塑的作用机理。采用皮下注射异丙肾上腺素(ISO)法制备CCI模型,随机分为模型组、阳性药对照组、温心胶囊低、高剂量组,每组12只;另设空白组12只。各组相应处理6周后,检测血流动力学、胶原表达、心肌TIMP-1表达变化。结果：温心胶囊能提高CCI大鼠dp／dtmin、dp／dtmax和LVSP水平。降低LVEDP水平;减低心脏重量指数,改善胶原改建;提高下调的TIMP-1表达。结论：温心胶囊能明显改善CCI大鼠心肌收缩和舒张功能,抑制细胞外基质重塑,可能与其上调TIMP-1蛋白表达有关。     

组织工程心脏瓣叶皮下包埋实验

目的 探讨体外生成的组织工程心脏瓣叶在体内可能存在的组织活性。方法 裸小鼠12只,将体外培养的种植有平滑肌／成纤维及内皮细胞的瓣叶（实验组）和未种植细胞的支架片（对照组）包埋于裸小鼠背部皮下,观察支架片局部皮肤变化。分12、14、21、28d4个时间段各处死3只小鼠,大体观察、组织学检查。结果 包埋12、14d,活体显示实验组局部皮肤色泽红润,大体标本呈自体组织色泽。对照组活体局部皮肤及大体标本均苍白。HE染色结果显示,包埋12d。实验组细胞数量比对照组多,材料中部有肌纤维形成。对照组细胞数少,无肌纤维形成。至第28天．两组细胞数量均明显增加,对照组细胞仍较少。实验组显示纤维包膜内有肌纤维形成,对照组无。VG染色结果显示,种植后第12天．实验组有红染胶原纤维形成。对照组无明显的阳性染色胶原纤维。结论 组织工程心脏瓣叶在体内具有组织活性,如进行自体瓣叶原位移植可能具备生长能力。