联合应用DAPKI、RARβ甲基化和高危型HPV检测筛查宫颈癌及癌前病变的研究

目的：探讨患者宫颈脱落细胞中DAPK Ⅰ和RARβ甲基化和高危型HPV感染对宫颈癌及癌前病变的筛查意义。方法：选择2008年9月至2009年7月在南通大学附属医院就诊的宫颈炎患者48例、宫颈轻度鳞状上皮内瘤变(CIN Ⅰ)患者11例,宫颈中度鳞状上皮内瘤变(CINⅡ)患者16例,重度鳞状上皮内瘤变患者患者(CINⅢ)14例,宫颈浸润性鳞癌(ICC)患者30例,采集患者的宫颈脱落细胞,用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测DAPK Ⅰ、RARβ甲基化情况,用HPV分型检测法检测高危型HPV感染情况。结合TCT筛查结果,统计单方法和多方法联合检测宫颈癌及癌前病变的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果：单基因甲基化检测的敏感度低,特异性高。DAPK Ⅰ、RARβ两基因联合HPV检测浸润性宫颈癌的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为93.33％、97.92％、96.55％和95.92％。检测Ⅱ级以上宫颈上皮样瘤变的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为66.67％、97.92％、95.24％和82.46％。结论：单方法检测的优越性不及联合检测法。DAPK Ⅰ、RARβ两基因甲基化联合HPV检测具有较高的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。     

联合应用DAPKⅠ、RARβ甲基化和高危型HPV检测筛查宫颈癌及癌前病变的研究

目的:探讨患者宫颈脱落细胞中DAPKⅠ和RARβ甲基化和高危型HPV感染对宫颈癌及癌前病变的筛查意义。方法:选择2008年9月至2009年7月在南通大学附属医院就诊的宫颈炎患者48例、宫颈轻度鳞状上皮内瘤变(CINⅠ)患者11例,宫颈中度鳞状上皮内瘤变(CINⅡ)患者16例,重度鳞状上皮内瘤变患者患者(CINⅢ)14例,宫颈浸润性鳞癌(ICC)患者30例,采集患者的宫颈脱落细胞,用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测DAPKⅠ、RARβ甲基化情况,用HPV分型检测法检测高危型HPV感染情况。结合TCT筛查结果,统计单方法和多方法联合检测宫颈癌及癌前病变的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果:单基因甲基化检测的敏感度低,特异性高。DAPKⅠ、RARβ两基因联合HPV检测浸润性宫颈癌的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为93.33%、97.92%、96.55%和95.92%。检测Ⅱ级以上宫颈上皮样瘤变的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为66.67%、97.92%、95.24%和82.46%。结论:单方法检测的优越性不及联合检测法。DAPKⅠ、RARβ两基因甲基化联合HPV检测具有较高的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。     

Galβ-1,4-GlcNAc在钳夹伤后大鼠坐骨神经中的表达变化

目的:分析Galβ-1,4-GlcNAc在正常和钳夹伤后大鼠坐骨神经中的表达变化.方法:采用免疫荧光和凝集素组织化学的方法检测Galβ-1,4-GlcNAc在正常和夹伤的大鼠坐骨神经中的表达定位.然后用图像分析的方法分析Galβ-1,4-GlcNAc在正常和夹伤的大鼠坐骨神经中的表达变化.结果:运用免疫荧光、凝集素组织化学方法和图像分析的方法检测Galβ-1,4-GlcNAc在夹伤后的坐骨神经中的表达定位及变化,发现其表达在外周神经中的雪旺细胞中并于夹伤后的一周达到高峰,于夹伤后两周恢复至正常水平.结论:提示Galβ-1,4-GlcNAc在坐骨神经夹伤后发生表达变化,并且主要表达在坐骨神经的雪旺细胞中,说明Galβ-1,4-GlcNAc在周围神经再生的早期发挥着重要的作用.     

地高辛标记的小鼠β-1,4-半乳糖基转移酶RNA探针的制备和应用

为了制备小鼠 β-1,4-半乳糖基转移酶 ( β-1,4-galactosyltransferase ,β-1,4-Gal T- )地高辛标记的 RNA探针以探讨β-1,4-Gal T- m RNA在坐骨神经组织的表达定位 ,本研究用提取的小鼠脑总 RNA,采用 RT-PCR方法 ,得到β-1,4-Gal T- 的 DNA片断 ,将其克隆到 p GEM-T载体 ;采用体外转录的方法合成地高辛标记的正、反义β-1,4-Gal T- RNA探针 ;运用点杂交的方法分析标记探针的灵敏度 ;最后应用该探针 ,通过原位杂交的方法 ,分析 β-1,4-Gal T- m RNA在小鼠坐骨神经的表达。结果 :构建了β-1,4-Gal T- /p GEM-T质粒 ,获得了高效价的地高辛标记的正、反义β-1,4-Gal T- RNA探针 ,应用该探针发现 β-1,4-Gal T- 在小鼠坐骨神经髓鞘中有表达。以上结果表明 ,制备的地高辛标记的正、反义 β-1,4-Gal T- RNA原位杂交探针可特异地检测β-1,4-Gal T- m RNA在组织中的表达。本研究为进一步分析β-1,4-Gal T- 在坐骨神经及其它神经组织发育和损伤过程中的表达奠定基础。     

β1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ表达质粒在许旺细胞中的转染与鉴定

目的构建β1,4-半乳糖基转移酶-I(β1,4-galactosyltransferase I, β-1,4-GalT-I)表达质粒,并将其转染到许旺细胞中,为探讨周围神经许旺细胞表达β-1,4-GalT-I的生物学意义提供研究基础.方法构建β-1,4-GalT-I表达质粒,并将其转染到分离培养的许旺细胞中;用特异识别β1,4-半乳糖苷键的蓖麻凝集素-I(Ricinus Communis Agglutinin-I, RCA-I)免疫组织化学方法和Northern Blot鉴定转染情况.结果通过酶切鉴定和测序分析,实验成功构建β-1,4-GalT-I表达质粒.将构建的表达质粒转染到许旺细胞中,经鉴定表明,转染的表达质粒在许旺细胞中能表达β-1,4-GalT-I,并随转染浓度增高而表达增加.结论β-1,4-GalT-I在许旺细胞中的转染和表达,对分析许旺细胞表达β-1,4-GalT-I的意义如对其自身增殖的影响和对神经元生长作用,提供了研究基础.     

P27pl与出核因子CRMl在人淋巴瘤细胞系中的表达及相互关系

目的 研究P27kipl与出核因子CRMl在淋巴瘤细胞中的表达及相互关系.方法 运用血清饥饿同步化处理淋巴瘤细胞株Jurkat和Raji,10%血清刺激细胞增殖.Western blot分别检测生长阻滞及增殖的淋巴瘤细胞中P27kipl与CRMl的表达.用核浆分离方法检测P27kipl与CRM1分别在胞核、胞质的定位.免疫沉淀检测P27与CRMl在淋巴瘤细胞中的结合.结果 在不同状态的淋巴瘤细胞中,P27kipl与CRMl蛋白水平的表达均表现为负相关,并且P27kipl的核内外分布与CRMl的核内外分布一致.免疫沉淀结果验证在淋巴瘤细胞中P27kip1与CRMl相互结合.结论 出核因子CRMl可能通过P27kipl结合而影响P27kip1的核内外分布及表达水平,从而参与调控淋巴瘤细胞的生长.     

β-1,4半乳糖基转移酶-I在钳夹伤后大鼠坐骨神经中表达的变化

为了观察β-1,4-半乳糖基转移酶-I(β-1,4-galactosyltransferase-I,β-1,4-GalT-I)在正常和钳夹伤后大鼠坐骨神经中表达的变化,本研究采用RT-PCR方法,从小鼠坐骨神经中特异性地扩增β-1,4-GalT-I cDNA片段并将其克隆到pGEM-T载体。采用体外转录的方法合成地高辛标记的正、反义β-1,4-GalT-I RNA探针。通过原位杂交和图像分析的方法,观察β-1,4-GalT-I mRNA在正常和夹伤大鼠坐骨神经中的表达及其变化。结果表明:β-1,4-GalT-I mRNA在大鼠坐骨神经的髓鞘中表达,在夹伤坐骨神经后1~2d,β-1,4-GalT-I mRNA在坐骨神经的表达最高,于夹伤后1周开始下降,在夹伤后1个月恢复至正常水平。上述结果提示坐骨神经夹伤后β-1,4-GalT-I mRNA的表达发生变化,并且主要表达在坐骨神经的Schwann细胞。本研究结果为进一步分析β-1,4-GalT-I在周围神经再生中的调控机制奠定了基础。     

河北省医疗机构核医学科现状调查与分析

目的 掌握全省医疗机构核医学科基本情况、放射性同位素使用、核医学安全防护及放射性废物管理等现状并做出评价,为优化核医学资源配置、提高核医学诊疗管理水平及进行有效监管提供参考依据。方法 设计调查表,采取医疗机构自查、卫生监督机构对辖区内的医疗机构进行现场调查访谈及随机抽查等方法。结果 截至2018年底,全省有37家医疗机构开展临床核医学科,主要分布在经济较为发达的城市和三级医疗机构中;从事核医学相关工作人员362人,影像诊断设备49台,使用的放射性核素主要为氟-18（¹⁸ F）、锝-99m（⁹⁹Tc^m）、碘-125（¹²⁵I）等;开展有放射性影像项目（如PET-CT、SPECT等）、放射性粒籽插植以及其他放射治疗项目等;全省核医学应用频度值为2.13人次/千人口。结论 河北省核医学科分布不均衡,为促进核医学健康有序地发展,应给予相应的引导和政策支持;规范核医学诊疗工作,增强核医学工作人员防护意识和能力,贯彻落实医疗机构核医学防护的主体责任;提高强化专业性培训,加强卫生健康监管队伍建设,提高执法能力和水平。     

37家医疗机构核医学放射性废物处置现状分析

目的 掌握河北省医疗机构核医学科放射性废物管理现状,以期为提升监管效能提供有效数据和理论基础。方法 设计核医学放射性废物处置调查表,采取医疗机构自查、卫生监督机构对辖区内的医疗机构进行现场调查相结合的方法对核医学科放射性废物处理情况等进行了相关调查。结果 截止到2018年底,河北省开展核医学的医疗机构有37家,其中设有放射性废物储存室的37家、面积329 m²;设有放射性废液衰变池35家,体积2449 m³,以三级衰变为主,控制方式主要为自溢。结论 河北省医疗机构核医学放射性废物管理模式有待完善,今后应提高对放射性废物管理的重视程度,有效确保放射性废物的处理质量。     

细胞周期依赖激酶11p58基因过表达促进施万细胞凋亡

目的:研究细胞周期依赖激酶11p58(cyclin dependent kinase 11 p58,CDK11p58)基因对大鼠施万细胞(Schwann cells,SCs)株RSC96凋亡的影响。方法:SCs分为4组:转染HA-p58质粒;转染pcDNA3.0空载体;HA-p58质粒和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理组;pcDNA3.0空载体和LPS处理组。24 h后,Western Blot检测细胞中CDK11p58基因表达水平;转染不同剂量的HA-p58质粒到LPS处理和未处理的SCs,Western Blot检测凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达水平。结果:转染24 h后,与空载体组相比,实验组CDK11p58基因的表达水平显著升高(P<0.01);CDK11p58能够抑制Bcl-2的表达,并呈现剂量依赖性。结论:CDK11p58基因与SCs凋亡相关,其高表达能够促进细胞凋亡。