miR-301a调节小鼠巨噬细胞中炎症因子的表达

目的探讨miR-301a对巨噬细胞炎症因子表达水平的影响,从microRNA角度阐明动脉粥样硬化的发病机制,为动脉粥样硬化的防治提供新的思路。方法高脂喂养Apo E-/-小鼠建立动脉粥样硬化模型,收集小鼠主动脉血管,利用real-time PCR检测组织中miR-301a的表达水平;利用脂质体在RAW264.7细胞中转染miR-301a mimic和miR-301a inhibitor,用real-time PCR检测细胞中miR-301a水平,并检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达水平,用Western blot检测NF-κB抑制因子(NKRF)蛋白水平,用免疫荧光染色检测p65细胞定位。结果在高脂喂养的Apo E-/-小鼠主动脉血管壁组织中miR-301a的表达水平升高;在RAW264.7细胞中过表达miR-301a可抑制NKRF蛋白水平,促进p65细胞核定位,升高细胞中TNF-α、IL-6和MCP-1的mRNA表达;在RAW264.7细胞中低表达miR-301a可升高NKRF蛋白水平,促进p65细胞质定位,减少细胞中TNF-α、IL-6和MCP-1的mRNA表达。结论在高脂喂养的Apo E-/-小鼠主动脉血管壁组织中miR-301a表达水平升高;在RAW264.7细胞中miR-301a通过调节NKRF的表达影响p65活性进而调控TNF-α、IL-6和MCP-1的mRNA表达,提示microRNA在动脉粥样硬化发病的炎症机制中具有重要作用。     

细胞外信号调节激酶1/2在白介素-1β抑制胰岛β细胞葡萄糖刺激下胰岛素分泌中的作用

目的 探讨细胞外信号调节激酶1/2 (ERK1/2)信号转导通路在人IL-1β抑制小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞(βTC-6)葡萄糖刺激下胰岛素分泌反应(GSIS)中的作用. 方法 (1)βTC-6细胞分别于含不同浓度(0、1.38、5.5 mmol/L)葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育60 min,放射免疫法检测细胞上清液中胰岛素浓度;(2)βTC-6细胞分别于含不同浓度(0、1.38、5.5 mmol/L)葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育5min,蛋白质免疫印迹法检测细胞蛋白中磷酸化ERK1/2及β-actin的水平;(3)βTC-6细胞加入IL-1β(0.15、1.5、15 ng/ml)培养24 h后于含1.38 mmol/L葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育60 min,检测上清液中胰岛素浓度;(4)βTG-6细胞加入IL-1β(0.15、1.5、15 ng/ml)培养24 h后于含1.38 mmol/L葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育5 min,检测细胞蛋白中磷酸化ERK1/2及β-actin的水平. 结果 (1)βTC-6细胞在1.38 mmol/L葡萄糖刺激时胰岛素分泌及ERK1/2磷酸化水平均达到高峰;(2)IL-1β可抑制βTC-6细胞葡萄糖刺激下的ERK1/2磷酸化及胰岛素分泌,作用与剂量呈正相关. 结论 ERK1/2信号转导通路可能在IL-1β抑制βTC-6细胞葡萄糖刺激下的胰岛素分泌反应中发挥重要作用.     

基因芯片筛选Bardct-Bicdl综合征患者外周血差异表达基因

目的 采用基因表达谱芯片研究Bardet-Biedl综合征(Bardet-Biedl syndrome,BBS)患者外周血单个核细胞差异基因表达谱.方法 抽取3例BBS先证者及4名年龄、性别匹配的健康对照者静脉血,分离外周血单个核细胞,用Trizol一步法提取总RNA并进行扩增和标记,然后与Affymetrix U133 Plus 2.0芯片进行杂交,扫描芯片并将图像信号转化为数字信号,GCOS1.4软件读取、处理数据.将患者与正常对照基因表达谱进行比较,最后以表达差异≥2倍(P＜0.05)为标准来确定差异表达基因.结果 BBS患者与正常对照相比,有30个基因表达有显著差异,包括15个上调基因及15个下调基因.通过GO分析,有12个基因与信号传导及细胞周期有关.结论 筛选到的差异基因与纤毛的功能或结构相关性及在BBS发生及发展中的作用有待研究.     

脓毒症大鼠血小板生成素水平与脓毒症严重程度的关系

目的 观察二次打击致脓毒症大鼠血清血小板生成素(TPO)水平的改变,并初步探讨脓毒症时血清TPO水平与脓毒症严重程度的关系.方法 将SD大鼠分成健康对照组(A,n=10)、手术对照组(B,n=8)、脓毒症组(C,n=15)、严重脓毒症组(D,n=12)和脓毒性休克组(E,n=8).通过低血容量休克打击后注射不同剂量(1 mg/kg、2 mg/kg、3 mg/kg)大肠杆菌内毒素(LPS)复制脓毒症、严重脓毒症及脓毒性休克模型.24 h后测定大鼠血小板计数和血清TPO、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果 脓毒症组血小板较健康对照组无明显变化,严重脓毒症组和脓毒性休克组血小板计数下降显著(P＜0.01).TPO水平在脓毒症组开始升高,在严重脓毒症组和脓毒性休克组显著升高水平(P＜0.01).IL-6、TNF-α在脓毒症组、严重脓毒症组和脓毒性休克组逐渐升高.多元线性回归分析显示:TPO与IL-6密切相关(r=0.832,P＜0.00).结论 脓毒症大鼠血清TPO水平升高,脓毒症严重程度是TPO水平主要决定因素,TPO水平可作为脓毒症严重程度的生物学标志.     

南京地区部分居民碳酸饮料消费情况

目的了解南京市居民碳酸饮料饮用频率和相关影响因素,为开展营养教育和干预工作提供依据。方法采用自填调查问卷的方法,收集南京市部分社区340名常住居民的基本情况和各种饮品饮用情况。结果南京市居民春季、夏季、秋季碳酸饮料饮用情况均有性别差异,差异有统计学意义(P0.05),18～44岁年龄组、中等文化程度人群、低收入家庭碳酸饮料饮用频率最高。结论降低碳酸饮料的饮用频率,促进人们养成健康的生活方式,有利于预防相关慢性病的发生。     

IGF-1对成兔关节软骨细胞体外增殖的影响

目的研究单独应用胰岛素样生长因子1(IGF-1)对成兔的关节软骨细胞体外增殖的促进作用,为成人关节软骨的体外培养扩增的理论提供新思路。方法通过细胞形态学,细胞计数、细胞计量检测成兔关节软骨细胞的存活及增殖。结果成兔关节软骨细胞增殖活跃。结论在IGF-1的单独作用下成兔关节软骨细胞在体外增殖能力明显增强。     

方剂学案例式教学法实施的原则、方法与成效

方剂学是一门具有基础学科和应用学科双重性的学科,因此,案例式教学是培养学生辩证思维能力、临床诊疾治病能力的重要方法。该教学法是以案例为载体,以探究过程为根本,让学生在案例探究中自主构建自己的知识体系的一种教学模式,其本质是理论与实践相结合的互动式教学。我们的研究与实践表明,案例式教学能激发学生潜质,充分发挥教学相长的作用,提高学生辩证立法、遣药用方的能力。我室开展案例教学已有十余年,现将其实施的思路、方法、成效及存在问题总结如下:一、案例式教学法的现状案例教学作为培养学生临证处方能力的载体,深受中医院校各学科、各课程,尤其是内、妇、儿、外等临床课程的重视,是中医药教学中不可缺少的环节。目前方剂学案例教学存在的问题主要有三方面:一是案例的临床表现、体征被教师归纳得井然有序,学生从患者身上获取疾病信息并进行归纳总结的能力没有得到训练[1]。二是案例的临床表现过于简略,四诊资料不全,学生难以把握辨证论治的要点,如“有人因忧愁中伤食,结积在肠胃,欲发吐利,自冬至后夏月积伤发,暴下数日不止。《玉函》云:下痢至隔年月日应期而发者,此为有积,宜下之。止用温脾汤尤佳。”[2]三是案例多为口述和文档为主,其真实性、复杂性较难体...     

儿童过敏性紫癜221例分析

目的探讨儿童过敏性紫癜（HSP）的临床特点。方法对1995年1月-2006年12月在我院住院的221例患儿的发病特点、临床表现、肾损害的临床和病理等方面进行分析。结果①有诱因者70例占31．9％，其中感染最多见。②可累及多种组织器官，本组除皮损外，关节受累134例占60．5％，肾脏受累73例占33．0％，消化道受累93例占42．0％。③紫癜性肾炎是影响预后的关键，对其应行包括病因、临床、病理及转归四个方面系统诊断。结论对紫癜性肾炎患儿广泛开展肾活检对治疗及预后的判断有重要的意义。     

小议“暑无内暑”

暑邪是指产生于夏至之后立秋之前的一种具有升腾、发散等特性的外感病邪。但暑邪为什么产生于夏至至立秋之间呢？到底如何产生的呢？为什么“内生五邪”独缺内暑？笔者从以下四点释疑。     

动脉内重组人血管内皮抑制素联合化疗栓塞术治疗原发性肝癌的疗效及CT灌注参数变化

目的 探讨动脉内重组人血管内皮抑制素（恩度）联合化疗栓塞术（TACE）治疗原发性肝癌（PHC）前后CT灌注参数变化.方法 选取PHC患者40例,随机分为观察组及对照组各20例,对照组给予单纯TACE,观察组给予动脉内恩度联合TACE术,观察术前及术后1个月的CT灌注参数变化.结果 2组间客观缓解率（RR）及不良反应发生率无显著差异（P＞0.05）,但观察组临床受益率（CBR）显著高于对照组（P＜0.05）;术后,观察组患者血流量（BF）、肝动脉灌注值（ALP）、肝脏灌注指数（HPI）参数较术前显著下降（P＜0.05或P＜0.01）,且显著优于对照组（P＜0.05）.结论 动脉内恩度联合TACE术治疗PHC患者能显著提高CBR,不良反应未见显著增加,且CT灌注参数变化显著优于单纯TACE术.