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目的:构建3*Flag-hPlk4真核表达载体,并证实重组表达载体在骨肉瘤细胞内的表达及定位.方法:以pGEX-4T-2-hPlk4为模板,利用聚合酶链反应扩增hPlk4基因cDNA全长,并将其克隆至含有3*Flag标签的真核表达载体中.进一步将构建的重组载体进行双酶切和测序鉴定,并转染到U2OS骨肉瘤细胞中,Western blot检测重组蛋白的表达.同时利用共聚焦激光显微镜观察3*Flag-hPlk4表达载体在U2OS细胞中的定位,进一步利用免疫沉淀的方法纯化人源Plk4蛋白.结果:hPlk4基因cDNA全长成功构建到3*Flag真核表达载体中,Western blot检测到含有3*Flag的人源Plk4融合蛋白表达,进一步在U2OS骨肉瘤细胞中主要定位于细胞质和细胞核周,并成功纯化hPlk4蛋白.结论:成功构建了3*Flag-hPlk4真核表达质粒,同时鉴定了融合蛋白的表达,并成功纯化人源Plk4蛋白.3*Flag-hPlk4蛋白主要定位在细胞质和细胞核周. 相似文献
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中药次生代谢产物积累和产地密切相关,产地鉴别以及多指标评价对保证药材质量具有重要意义。该实验采用高效液相色谱(HPLC)与傅里叶变换红外光谱(FTIR)数据融合结合偏最小二乘判别分析对滇龙胆进行产地鉴别,辅以多指标成分含量分析,以期为滇龙胆药材建立一种全面准确的鉴别和质量评价方法,为滇龙胆最佳产区筛选提供参考。采集云南、四川、广西、贵州共169份样品的FTIR和HPLC指纹图谱,并对FTIR进行多元散射校正、标准正态变量(SNV)、Savitzky-Golay(SG)卷积求导等预处理;比较FTIR,HPLC及低级、中级数据融合鉴别效果;利用HPLC分析样品中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、马钱苷酸与当药苷含量。结果发现,不同产地滇龙胆FTIR图谱存在差异,最佳预处理为SNV+SG求导(二阶求导,窗口参数为15,多项式次数为2次)。低级、中级数据融合预测集正确率为96.43%,高于FTIR,HPLC预测集正确率94.64%;低级数据融合训练集正确率为100%,优于中级数据融合99.12%。云南滇龙胆4种环烯醚萜苷含量均高于其他省份,其中药典指标性成分龙胆苦苷平均质量分数为47.40 mg·g~(-1),最大值达到79.83 mg·g~(-1),且龙胆苦苷、马钱苷酸与当药苷含量同其他省份含量差异显著(P0.05)。云南省不同地区滇龙胆4种环烯醚萜苷总含量比较发现,大理洱源、丽江玉龙较高,分别为68.59,66.68mg·g~(-1),同楚雄武定、玉溪澄江、昆明寻甸(52.99,52.29,46.71 mg·g~(-1))差异显著(P0.05),可作为滇龙胆栽培和优良种质资源筛选的参考地。FTIR-HPLC数据融合定性分析结合HPLC定量分析方法为不同产地滇龙胆鉴别和质量评价提供一种全面准确的新思路,为滇龙胆资源开发与利用提供科学依据。 相似文献
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目的:分析血府逐瘀汤联合消心痛、阿司匹林在冠心病心绞痛患者中的临床疗效。方法:选取2015年1月~2016年12月100例医院收治的冠心病心绞痛患者,随机分为观察组与对照组。对照组给予消心痛联合阿司匹林,观察组在对照组的基础上加入血府逐瘀汤。比较两组患者的临床疗效、心功能指标变化以及不良反应发生率。结果:观察组临床疗效明显高于对照组;观察组心功能改善幅度要明显高于对照组;两组患者治疗期间均无严重不良反应发生。结论:血府逐瘀汤联合西药治疗有着良好的疗效,能够提高患者的心功能,从而改善其预后情况,值得在临床中推广使用。 相似文献
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CO2胆道造影的初步临床应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨T管CO2胆道造影的临床价值。方法外科胆道术后留置T管患者40例。拔管前先行经T管CO2胆道造影,同时行T管泛影葡胺胆道造影对照。结果40例中36例造影示肝内外胆管无扩张,造影剂顺利进入十二指肠,拔除T管。其中2例发生胆漏,予介入7F猪尾巴导管留置2周。1例发现残余结石,予以胆道碎石,保留T管2周。1例胆总管下段炎性狭窄,保留T管1周。CO2胆道造影摄片甲级片率67.5%(27/40)。未发生与CO2及泛影葡胺造影有关的并发症。结论CO2胆道造影是一种安全、有效的诊断方法,可以作为常规T管造影的补充。 相似文献
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目的 分析体外受精-胚胎移植患者妊娠早期阴道出血的风险因素,构建预警评估体系。方法 采用查阅文献法和德尔菲专家咨询法,确定风险因素,同时进行重要性赋值及数据分析,构建预警评估体系。结果 二轮专家问卷函询的有效问卷回收率均为100%、专家权威系数均为0.87、肯德尔和谐系数分别为0.33和0.48。最终形成的体外受精-胚胎移植患者妊娠早期出血预警评估体系包括9项验孕前危险因素、6项验孕后危险因素。结论 通过专家函询,构建预警评估指标体系,对妊娠早期孕妇进行连续性评估,可提高临床医务人员对体外受精-胚胎移植妊娠早期阴道出血患者的识别预测能力。 相似文献
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目的了解南京市白下区中学生人群中主要健康危险行为的发生率及其与抑郁障碍的关系。方法采用横断面调查,研究对象来自南京白下区9个学校的27个班级1102名在校的初一至高三的中学生,其中初中生占63.6%,高中生占36.4%;男生为45.0%,女生为55.0%。调查的有效应答率为94.2%。结果该样本人群中5种健康危险行为:吸烟、饮酒、网吧上网、逃学、离家出走的发生率分别为4.3%、33.6%、8.0%、6.5%和4.5%,男生均高于女生,高三学生的发生率为最高,高中学生的健康危险行为的发生率高于初中学生,18岁以上年龄组的学生中,各种健康危险行为的发生率均为最高。罹患抑郁障碍的学生发生健康危险行为的可能性均大于非抑郁障碍患者,针对上述5种健康危险行为的OR值分别为3.30(95%CI=1.67~6.55),1.86(95%CI=1.27~2.73),2.78(95%CI=1.57~4.93),3.82(95%CI=2.15~6.81)和5.53(95%CI=2.95~10.40)。发生健康危险行为者(网吧上网者、逃学者和离家出走者)寻求心理医生进行疏导的比例显著高于未发生健康危险行为者,但两类学生与老师交流沟通的比例则无差异。结论健康危险行为的发生、抑郁障碍已成为中学生人群中一个越来越重要的公共卫生问题,有关职责部门应制定有针对性的预防控制措施。 相似文献
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