糖萜素对小鼠NK细胞活性影响的研究

目的 探讨糖萜素对机体NK细胞活性的影响.方法①体外试验,不同浓度糖萜素体外直接作用小鼠脾细胞和YAC-1细胞,用MTT法测定细胞生长代谢和NK细胞活性;②体内试验,以糖萜素饲料和普通饲料分别喂养正常和免疫抑制(环磷酰胺抑制)小鼠,在不同时间段检测NK细胞活性.结果①体外<5 μg/ml的糖萜素浓度,对小鼠脾细胞生长和NK细胞活性无明显影响(P>0.05);②以糖萜素饲料喂养的正常小鼠和免疫抑制小鼠,各时间段NK细胞活性明显高于喂养普通饲料的对照小鼠(P<0.05).结论口服糖萜素能明显增强小鼠NK细胞活性,且使其稳定维持在高水平.     

抗黄疸出血群70091株钧端螺旋体外膜抗原单克隆抗体的研制

本实验采用NSI骨髓瘤细胞与黄疸出血群70091株钩体外膜免疫的小鼠脾细胞融合,建立了一株分泌抗黄疸出血群钩体外膜抗原的单克隆杂交瘤细胞株ZMA_3。经MAT与ELISA检测.证明ZMA_3单克隆抗体具有较高的群特异性。ZMA_3杂交瘤细胞株经体外持续培养七月余,分泌抗体性能稳定。经鉴定ZM A_3单克隆抗体属IgG_2a亚类。     

尖锐湿疣病损组织粗提蛋白对混合淋巴细胞反应的影响

目的 通过观察尖锐湿疣病损组织粗提蛋白刺激后的树突状细胞(DC)对混合淋巴细胞反应的影响，探讨尖锐湿疣病损粗提蛋白对DC免疫功能的影响。方法 用聚合酶联反应(PCR)鉴定尖锐湿疣病损组织中人乳头瘤病毒(HPV)6DNA和HPV11 DNA。人脐带血和外周血分离培养10d的DC分别用尖锐湿疣病损组织和健康儿童包皮组织粗提蛋白刺激2次。另设空白对照组磷酸盐缓冲液(PBS)刺激。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测DC刺激同种异体和自体混合淋巴细胞反应的能力。同种异体淋巴细胞来源于脐带血和外周血，同种自体淋巴细胞来源于外周血。结果 PCR结果显示尖锐湿疣病损组织中HPV6b DNA阳性。尖锐湿疣病损粗提蛋白刺激后的DC刺激来源于脐血的T淋巴细胞，其增殖指数(5．514)高于包皮对照组(2．645)和空白对照组(1．698，DC：T均为1：11)。尖锐湿疣病损粗提蛋白刺激后的DC刺激来源于外周血的T淋巴细胞的增殖指数(2．352)高于包皮对照组(1．083)和空白对照组(0．644，DC：T均为1：3)。结论 尖锐湿疣病损粗提蛋白可能因存在的HPV病毒抗原对DC的刺激和功能活化，进一步促进了T淋巴细胞的增殖活化，并进而推测可以提高机体抗病毒特异性细胞免疫。     

嗜肺军团菌环介导等温扩增检测法的建立

目的:建立一种快速简便的嗜肺军团菌分子检测方法.方法:运用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),设计一套引物特异性识别嗜肺军团菌毒力基因--mip基因的6个特殊区域,在恒温条件下,对8株嗜肺军团菌和5株其它细菌进行检测,并与普通PCR方法进行比对,验证该方法的特异性和灵敏度.结果:所有嗜肺军团菌扩增产物均产生肉眼可见的白色沉淀,而其它不同菌株均不产生沉淀;加入荧光染料smart green后,嗜肺军团菌扩增产物均产生强绿色荧光,其它菌株呈弱荧光.与普通PCR(检出限约为57.6 pg,)比,LAMP扩增反应的灵敏度大100倍左右,基因组DNA检出限为576 fg,阳性水样检出限为8 cfu/ml.结论:LAMP技术可在简易的实验环境中快速、特异、灵敏地检测嗜肺军团菌.     

桑叶总黄酮对体外蛋白糖基化的抑制作用

目的 研究桑叶总黄酮对非酶糖基化的抑制作用.方法 从桑叶中提取不同浓度(0.001,0.01,0.1g/L)总黄酮加入体外白蛋白糖基化体系中,分别孵育1,4,7,14,21,28天,测定早期糖化白蛋白产物的浓度.结果 糖化蛋白产量与孵育时间呈正相关,桑叶总黄酮(01g/L)在各时间点均使糖化蛋白生成较对照组少.结论 蛋白质非酶糖化与葡萄糖孵育时间正相关,桑叶总黄酮有可能阻断蛋白非酶糖化.