胰腺癌PC-3细胞株外源性p14ARF抑癌基因表达与内源性p53表达水平的关系

目的　探讨外源性 p1 4ARF基因表达于胰腺癌PC 3细胞后与另一重要细胞周期调控蛋白 p53表达水平的相互关系。 方法　将含人 p1 4ARFcDNA的重组质粒通过脂质体介导转染入胰腺癌PC 3细胞中 ,并筛选出阳性克隆 ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)、Westernblot法检测PC 3细胞转染前后p1 4ARF的mRNA及蛋白的表达 ,同时用Westernblot分析其内源性 p53蛋白表达水平的变化。噻唑蓝 (MTT)比色法测定PC 3细胞在转染前、后的生长曲线变化。结果　胰腺癌PC 3细胞中p1 4ARF基因缺失。外源性 p1 4ARF基因成功转染入PC 3细胞并获得 1 4× 1 0 3大小的p1 4蛋白表达 ,且内源性 p53蛋白表达水平在转染后明显增高。PC 3细胞在导入 p1 4ARF基因后第 1天及第 5天的生长抑制率分别为 2 2 %及 2 6 % ,两者差异有显著性 (P <0 .0 5)。结论　p1 4ARF基因可上调胰腺癌PC 3细胞的内源性p53蛋白表达水平 ,从而发挥其细胞周期阻滞功能。     

大肠恶性肿瘤VEGF和CD44基因mRNA表达及其临床意义

目的：研究大肠恶性肿瘤的转移相关基因血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）和ＣＤ４４粘附分子的表达及其临床意义。方法：应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测１９９７年１２月－１９９８年５月间收治的２１例大肠恶性肿瘤。其中１９例为大肠癌，１例为平滑肌肉瘤，１例为转移性腺样腺样囊腺癌。大肠癌Ｄｕｋｅｓ分期为Ｂ期６例，Ｃ期９例及Ｄ期４例。上述标本采用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测各类基因的ｍＲＮＡ表达。结果：     

人体肠癌中基因丢失的初步研究

人体17p等位基因探针PYNZ22对28例肠癌病人DNA作RFLPs分析,24例出现信息量(85％),其中18例有等位基因丢失。结果提示,采用PYNZ探针结合RFLPs方法,可能对肠癌的基因诊断具有潜在性临床应用价值。     

逆转录病毒介导人肿瘤坏死因子基因治疗胶质瘤的实验研究

运用小鼠白血病病毒MoMLV为载体,将TNFa基因转导致人胶质瘤细胞SHG-44,14dG418筛选出细胞克隆.检测TNFa的表达.观察细胞生长.结果:转基因细胞培养上清液中有高浓度TNFa表达分别为(5 198.7±3 757.4)pg/ml和(3 217.4±1 180.6)pg/ml(P<0.05),生物活性达320.0U/ml.“RT-PCR”检测转基因细胞有特异mRNA表达,转基因细胞生长减慢.转染TNFa基因可诱导胶质瘤细胞的生长抑制.     

健脾理气合剂对CCl_4引起大鼠肝细胞色素混合功能氧化酶活性的调节

多年来,临床上已观察了健脾理气法对肝癌、肝炎及肝硬化的治疗作用,但对其肝脏作用的机理仍了解甚少。因此需要进一步从实验基础上予以证实。四氯化碳(CCl_4)进入动物体内可引起肝细胞急性中毒,随之血清中谷氨酰转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOP)、及甲种胎儿蛋白(AFP)异常升高,并伴有肝细胞内质网细胞色素混合功能氧化酶浓度的显著降     

大肠癌患者P53基因的突变研究

本研究应用聚合酶链反应－－单链构象多态ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术对２８例大肠癌患者的癌组织Ｐ５３基因第５，６，７和８外显子进行检测，发现有１５例存在基因突变，突变率为５４％。这一结果表明Ｐ５３基因突变在大肠癌中的普遍存在，并在大肠癌的发生过程中起着重要作用；同时表明本研究所采用的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术具有简便，快速，灵敏和安全的特点，可应用于肿瘤的临床基因诊断。     

转染TNFα基因诱导恶性胶质瘤细胞凋亡的研究

目的:运用MoMLV载体转导TNFα基因至SHG-44人胶质瘤细胞,检测生长抑制和凋亡。结果:转基因细胞培养上清液中TNFα蛋白分别为(5198.7±3757.4)pg·ml~(-1)和(3217.4±1180.6)pg·ml~(-1)(P＜0.05),其活性达320.0u·ml~(-1),表达特异的mRNA。转基因细胞G_2~M期缩短而G_0~G_1期延长。凋亡率8%~9%。流式细胞检测到亚G_1期峰。电镜中出现染色质固缩成块状和新月小体。DNA电泳现“梯状”条带。结论:转染TNFα基因造成的细胞生长抑制可能与凋亡有关。     

家鸭甲胎蛋白分子变异体研究

近年来,随着甲胎蛋白分子变异体在肝癌癌变过程中的意义逐渐为人们所了解,对甲胎蛋白分子变异体的研究范围也趋扩大。资料表明,在大鼠、小鼠、人、猴、牛、豚鼠等动物中,相继有人发现存在甲胎蛋白分子变异体,但在绵羊、猪、兔及鸡的AFP中却未发现变异体。因此AFP分子变异体有着动物种类上的差异。本文首次报道在家鸭AFP中存在变异体,并对其在家鸭不同肝脏病理状态下的特点作一初步探讨。     

原发性脑内淋巴瘤临床病理、免疫组化、基因重排分析

目的：研究脑内原发性恶性淋巴瘤临床病理、免疫且化及免疫性基因重排特征。方法：对６例脑原发性恶性淋巴瘤作了临床病理形态观察和免疫组化分析（Ｓ－Ｐ法）,并用ＰＣＲ技术单轮及半巢式扩增法进行了ＩｇＨ及ＴＣＲ－β基因重排检测。结果：６例皆为非霍奇金Ｂ细胞淋巴瘤。瘤细胞大部分是中心或中心母细胞型,常伴浆样分化,往往围绕血管排列。ＰＣＲ克隆性基因重排,ＩｇＨ单轮法（２／６例）阳性,半巢式（６／６例）阳性,ＴＣ     

阿司匹林对结肠癌细胞凋亡及Fas/FasL表达的影响

目的：探讨阿司匹林对结直肠癌化学预防的机理。方法：培养结肠癌细胞株Caco-2，用不同浓度阿司匹林进行干预，对细胞生长、增殖、凋亡及Fas／FasL表达进行观察、检测。结果：高浓度阿司匹林组细胞大量死亡。低浓度组促进细胞凋亡；25mmol／L阿司匹林组可见Fas表达，而对照组不表达；25mmol／L阿司匹林组FasL表达与对照组相比明显降低。结论：低浓度阿司匹林促进结肠癌细胞凋亡，其机理与诱导Fas表达、下调FasL表达有关。