穿心莲内酯对白念珠菌群感效应及相关毒力基因的影响

目的: 研究穿心莲内酯(andrographolide,AG)对白念珠菌群感效应(quorum sensing,QS)及相关毒力基因的影响. 方法: 气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)检测AG干预白念珠菌不同时间后法尼醇和酪醇的含量变化;qRT-PCR检测QS调节的相关毒力基因CHK1,PBS2,HOG1的表达. 结果: 白念珠菌生长2 h时法尼醇和酪醇分泌量较少,AG作用后变化不明显;12 h后分泌量最高,24 h回落.不同浓度AG干预后,法尼醇含量降低,酪醇升高,呈现剂量依赖性,其中1 000 mg·L^-1 AG效果均最明显.qRT-PCR结果显示,1 000 mg·L^-1 AG在2,12,24 h时分别使CHK1下调2.375,3.330,4.043倍;PBS2下调2.010,4.210,4.760倍;HOG1变化不明显. 结论: AG可抑制法尼醇的分泌及促进酪醇的分泌,下调QS相关的毒力基因CHK1,PBS2的表达.     

百肤青抗铜绿假单胞菌生物膜的作用

目的:观察百肤青体外抗铜绿假单胞菌生物膜的作用.方法:通过琼脂稀释法测定铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC),用改良平板法建立体外铜绿假单胞菌生物膜并检定不同MIC浓度的抗铜绿假单胞菌生物膜的作用,扫描电镜确认. 结果:4种不同MIC的百肤青都有抗铜绿假单胞菌生物膜的作用.结论:中药复方百肤青由于其有抗铜绿假单胞菌生物膜的作用,不仅可用于治疗细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV),还有预防BV的作用.     

黄芩苷体外对白念珠菌凋亡的影响

目的探讨中药有效成分黄芩苷对白念珠菌凋亡的影响。方法采用Hoechst33258染色荧光显微镜检测白念珠菌细胞凋亡的形态;Rh123染色流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)变化;DHR染色流式细胞仪检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果 1 000,100μmol/L的黄芩苷能诱导白念珠菌细胞核固缩与碎裂,并降低白念珠菌MMP;1 000,100,10μmol/L的黄芩苷均能提高细胞内ROS水平。结论黄芩苷可通过线粒体途径诱导白念珠菌凋亡。     

穿心莲内酯诱导白念珠菌生物膜分散细胞凋亡的研究

目的:探讨中药有效成分穿心莲内酯对白念珠菌生物膜分散细胞凋亡的影响。方法:Hoechst33258染色荧光显微镜检测白念珠菌生物膜细胞凋亡的形态;Rh123染色流式细胞仪检测白念珠菌生物膜细胞线粒体膜电位(MMP)变化;DHR染色流式细胞仪检测白念珠菌生物膜细胞内活性氧(ROS)水平。结果:1 000,100μmol.L-1的穿心莲内酯能诱导白念珠菌生物膜细胞核固缩、浓染致密,1 000,100,10μmol.L-1的穿心莲内酯能降低白念珠菌生物膜线粒体膜电位,提高细胞内ROS水平。结论:一定浓度的穿心莲内酯可诱导白念珠菌生物膜分散细胞凋亡。     

复方百肤青对大鼠细菌性阴道病生物膜产生和治愈后复发率的影响

目的：以细菌生物膜（bacterial biofilm ，BF）致病菌造大鼠细菌性阴道病模型，用复方百肤青治疗，观察细菌生物膜的产生以及治愈后复发率，探讨中药体内的抗生物膜作用，为预防细菌性阴道病（bacterial vaginosis，BV）的复发，解决BV复发率高的问题提供依据。方法：用从BV患者阴道分泌物分离得到的加特纳氏菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄珠菌制成混合菌液，经体外培养证实能产生BF。用混合菌液造大鼠细菌性阴道病模型经不同浓度百肤青治疗，观察生物膜的形成及治愈后复发率。结果：最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration，MIC）浓度的百肤青能控制BF的形成和BV的复发。结论：中药复方百肤青由于其有抗BF的作用，不仅可用于治疗BV，还有预防BV复发的作用。     

保心包贴膜体外抗菌作用观察

目的：研究保心包贴膜对引起化脓性感染细菌的抗菌作用。方法：用琼脂平板稀释法检测保心包贴膜对从患伤口分离得到的11种142株临床常见创伤感染致病菌最低抑菌浓度（MIC）、最低杀菌浓度（MBC）。结果：该药物对受试的11种病原菌都有不同程度的杀菌、抑菌作用。结论：保心包贴膜对局部皮肤化脓性感染具有良好的疗效。     

中枢VIP参与电针对大鼠胃黏膜的保护作用

目的：探讨中枢迷走背核复合体（DVC）血管活性肠肽（VIP）参与电针对大鼠胃黏膜保护作用的机制。方法：采用束缚－冷应激法复制胃黏膜损伤大鼠模型，通过中枢DVC微量注射VIP，观察电针对胃黏膜血流量（GMBF）、损伤模型（LI）和跨壁电位差（PD）的影响。结果：中枢DVC微量注射VIP后，模型组GMBF、PD明显增加（P＜0．05或P＜0．01），LI下降（P＜0．01），电针对中枢DVC微量注射VIP后的GMBF增加有协同作用。结论：VIP参与电针对损伤的胃黏膜的保护作用；DVC是VIP作用的中枢特异性部位之一。     

抗霉菌性阴道炎中药复方的体外抗菌实验研究

霉菌性阴道炎是常见的妇科病之一，大约80％～90％的霉菌性阴道炎是由白色念珠菌感染引起的：10％～20％为其他念珠菌及球拟酵母属感染。霉菌性阴道炎是常见的妇科病之一，大约80％～90％的霉菌性阴道炎是由白色念珠苗感染引起的；10％～20％为其他念珠菌及球拟酵母属感染。     

白头翁汤正丁醇提取物对酸性条件下白念珠菌pH突变株黏附的影响

目的 基于pH信号通路探讨白头翁汤正丁醇提取物（butyl alcohol extract of Baitouweng Decoction,BAEB）对白念珠菌黏附的影响。方法 Spot assay检测酸性条件下pH突变株的活性;XTT法检测酸性条件下pH突变株黏附时的代谢活力;荧光显微镜观察酸性条件下pH突变株细胞黏附活力;正辛烷容纳法测定酸性条件下pH突变株疏水性;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测酸性条件下pH突变株黏附相关基因的表达。结果 512 μg/mL BAEB对共培养24、48 h的pH突变株的活性影响不大;phr2/phr2在酸性条件下代谢活性低,512 μg/mL BAEB可明显抑制白念珠菌野生株（WT）、PHR2回补菌株、rim101/rim101、RIM101回补菌株的代谢活性,对phr2/phr2代谢活性影响不大;512 μg/mL BAEB可明显抑制WT、PHR2回补菌株、rim101/rim101、RIM101回补菌株的细胞黏附活力,phr2/phr2加药前后细胞黏附活性无明显变化;512 μg/mL BAEB对WT、phr2/phr2、PHR2回补、rim101/rim101及RIM101回补菌株的细胞表面疏水性影响不明显;qRT-PCR法检测512 μg/mL BAEB对pH突变株在酸性条件下黏附相关基因作用不明显,但1 024 μg/mL BAEB则对大多数黏附相关基因有明显抑制作用。结论 BAEB在酸性条件下能一定程度抑制白念珠菌的黏附。     

鱼腥草素钠诱导临床耐药白假丝酵母菌生物膜细胞凋亡

目的 观察鱼腥草素钠对临床耐药白假丝酵母菌生物膜细胞凋亡的影响。方法 利用DAPI染色观察耐药白假丝酵母菌生物膜细胞核的形态;利用FITC-VAD-FMK染色观察耐药白假丝酵母菌生物膜细胞metacaspase活性;分别在JC-1染色和DCFH-DA染色下,采用流式细胞仪检测耐药白假丝酵母菌生物膜细胞内线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;利用Annexin Ⅴ-FITC/PI染色和流式细胞仪检测耐药白假丝酵母菌生物膜细胞的凋亡率。结果 一定浓度的鱼腥草素钠作用下,临床耐药白假丝酵母菌生物膜细胞内ROS水平、生物膜细胞凋亡率、metacaspase酶活性明显升高,MMP水平明显降低,生物膜细胞核出现碎裂和皱缩。结论 鱼腥草素钠能够诱导耐药白假丝酵母菌生物膜细胞凋亡。