Toll样受体4在大鼠胰腺组织的特异性分布表达

目的 探索Toll样受体4(TLR4)在大鼠胰腺组织的特异性分布表达。方法 采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫组化SP方法，检测Wistar大鼠胰腺组织中TLR4 mRNA及TLR4蛋白的分布表达。结果通过RT-PC R方法(31个循环)，从正常大鼠胰腺组织检测到549bp目的基因片段。免疫组化方法检测到大鼠胰腺内有TLR4表达，主要位于胰管上皮、血管、微血管内皮及胰岛组织，胰腺外分泌腺泡细胞未见TLR4表达。结论 TLR4在大鼠正常胰腺组织内有分布表达，主要定位于上皮组织(胰管上皮)和内皮组织(动脉、静脉及微血管内皮)，提示大鼠胰腺内、外分泌部均具有天然免疫TLR4参与胰腺病理生理的相关受体基础。     

直肠癌大组织切片系膜九分区法病理学研究

目的　探索直肠癌全直肠系膜切除术 (TME)的必要性和选择性全直肠系膜切除术(STME)的最佳切除范围。方法　以 31例直肠癌TME手术标本为对象 ,纵向由远及近以 5mm的间距连续取材 ,常规固定包埋 ,大组织切片机以 2 .5cm的间隔连续切片 ,HE染色 ,光学显微镜观察结果。将直肠系膜等分为内、中、外三个带 ,每带按左、右、后三个方向分为三个区 ,直肠癌在直肠系膜内的转移灶分别定位于上述九个区。结果　直肠系膜外带内癌转移 1 4例 (4 5 .2 % ) ,全部为低位直肠癌 ;远端直肠系膜 (DMR)内癌转移 2例 (6 .5 % ) ,均在原发灶下缘以远 3.0cm以内 ;环周切缘癌浸润 2例 (6 .5 % )。结论　低位直肠癌根治手术时 ,完整地切除直肠系膜非常必要 ;远端直肠系膜的切除应达到肿瘤下缘以远 4cm。     

大肠癌中Caspase-8和Caspase-10的表达及其与细胞凋亡的关系

目的 探讨大肠肿瘤中Caspase-8和Caspase-10的表达及其与细胞凋亡的关系.方法 采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测121例大肠癌、52例腺瘤和121例癌旁组织中Caspase-8和Caspase-10 mRNA表达,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡.结果 与癌旁组织比较,腺瘤中Caspase-8 mRNA表达上调,Caspase-10 mRNA表达下调(P<0.05);大肠癌中Caspase-10 mRNA表达下调(P<0.01),下调程度与肿瘤的分化程度有关(P<0.05).大肠癌、腺瘤和癌旁组织中的凋亡指数分别为1.63%、2.42%和2.98%,各组间差异有统计学意义(P<0.05).大肠癌中凋亡指数与Caspase-10 mRNA表达呈正相关(r=0.408,P<0.01),与Caspase-8mRNA表达无明显相关.结论 Caspase-8 mRNA在腺瘤中表达上调,与肿瘤细胞凋亡无明显相关.Caspase-10与大肠癌的凋亡相关,并与肿瘤恶性程度关系密切.     

化合物N-2035对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察异黄酮类化合物N-2035对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:利用大脑中动脉栓线阻断法(MCAO)制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,观察化合物N-2035对缺血再灌注大鼠的脑水肿、细胞内钙及凋亡抑制基因bcl-2表达的影响。结果:化合物N-2035能改善局灶性脑缺血再灌注损伤脑水肿,降低细胞内钙,增加bcl-2的表达。结论:化合物N-2035对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与化合物N-2035抗细胞凋亡有关。     

医原性输尿管损伤18例临床分析

目的探讨医原性输尿管损伤的早期诊断和最佳治疗方案,提高手术成功率,减少合并症的发生。方法对1990至2005年18例19侧医原性输尿管损伤病例进行回顾性研究。分析治疗方法和预后及并发症之间的关系。结果15例早期发现患者中13例一期修复输尿管损伤;2例先行尿流改道,3个月后行修复手术成功。3例发现晚患者,3~10个月后手术,1例行肾切除,2例行一期修复手术。12例获得随访6~24个月,10例肾积水缓解。结论医原性输尿管损伤患者一般情况较好时,无论确诊时间早晚,均可考虑一期手术修复。     

多指离断再植的临床研究

目的：探讨多指离断再植的临床方法,观察治疗效果。方法：选取我院自2008年5月至2012年3月收治的83例196指多断指离断患者作为研究对象,采取多指离断再植术进行断指再植,观察治疗效果。结果：所有患者均实施多指同步再植,结果本组83例196指多断指离断患者手术成功80例184指,就诊时间过长断指失活导致再植失败3例12指,再植成功率为93．9％（184／196）。术后3—5周平均4．2周进行手指部功能锻炼,随访6—18个月,所有患者断指愈合良好,皮肤感觉恢复正常,无屈伸功能异常者。结论：多指离断再植时就诊时间十分重要,采取多指同步再植可以提高再植成活率,但要求技术水平较高,可根据实际情况选择使用。     

2型糖尿病合并便秘临床调查

目的探讨2型糖尿病患者便秘的患病率及相关影响因素,指导临床治疗.方法对237例2型糖尿病患者进行调查评定,并且对相关因素进行分析,统计糖尿病患者便秘的患病率及相关影响因素.结果糖尿病合并便秘的患病率为67.5%,引起便秘的高危因素主要有高龄、糖尿病病史较长、糖尿病并发症多、饮食结构不合理、缺乏锻炼等.结论糖尿病合并便秘的患病率较高,临床应重视对便秘的治疗.     

Effect of Shugan Jianpi Granule(舒肝健脾颗粒) on Gut Mucosal Serotonin-positive Cells in Patients with Irritable Bowel Syndrome of Stagnated Gan-qi Attacking Pi Syndrome Type

Objective:To evaluate the effect of Shugan Jianpi Granule (舒肝健脾颗粒,SJG) on the number of gut mucosal serotonin-positive cells (5-HT+C) in patients with irritable bowel syndrome (IBS) of stagnated Gan-qi attacking Pi (SGAP) syndrome type.Methods:Twenty-four patients were randomized equally into three groups.All were treated with the basic conventional treatment by cognition-behavior therapy with assistance of lactein 3 tablets thrice a day.Additionally,24 g of SJG was given three times a day to group A,and the same dosage of SJG and Smecta 15 g thrice a day was given to group B,while no additional treatment was given to the control group.The number of 5-HT+C was measured respectively before and two weeks after treatment by immunohistochemical method.Results:The number of 5-HT+C decreased after treatment in all the three groups (P＜0.05),but the decrement was more significant in the two test groups than in the control group (P＜0.05 and P＜0.01,respectively),while comparison of 5-HI+C between the two test groups showed insignificant difference (P＞0.05).Conclusion:SJG can reduce the number of 5-HT+C in IBS patients of SGAP syndrome type,and its effect is enhanced when used in combination with Smecta.     

携带GALV.fus基因的重组单纯疱疹病毒的组装、扩增及鉴定

目的:包装已成功构建的受Ⅰ型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus Ⅰ,HSV-Ⅰ)晚期表达基因-UL38启动子调控的、嗜肿瘤单纯疱疹病毒介导的,长臂猿白血病病毒致融性外膜糖蛋白(Gibbon ape leukemia virus membrance fusion glycopratein,GALV.fus)基因质粒(HSV-UL38P-GALV.fus),无肿瘤特异性巨细胞病毒启动子(Cytomegalovirus promoter,CMVP)GALV.fus质粒(HSV-CMVP-GALV.fus),GALV.fus基因片段被增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因片段所取代的治疗对照质粒(HSV-CMVP-EGFP),分别命名为Synco-2、Synco-1、Baco-1.方法:扩增已成功构建的HSV-UL38P-GALV.fus、HSV-CMVP-GALV.fus、HSV-CMVP-EGFP质粒,然后分别在Vero细胞用脂质体转染、包装成重组嗜肿瘤单纯疱疹病毒.重组单纯疱疹病毒的扩增及纯化采用Vero细胞及氯化铯纯化常规方法,病毒滴度测定采用TCID50法.Synco-1、Synco-2病毒感染肝癌细胞株HepG2,分别提取受染肝癌细胞HepG2的总RNA,以RT-PCR的方法鉴定GALV.fus基因的表达.结果:成功包装了3种重组单纯疱疹病毒Baco-1、Synco-1和Synco-2,按需要在Vero细胞内扩增后以氯化铯密度梯度离心法进行纯化,TCID50法测得病毒滴度分别为3×1010 pfu/ml,1×1011 pfu/ml和4×1010 pfu/ml.受染肝癌细胞株HepG2中以RT-PCR法检测到GALV.fus基因的表达.结论:成功包装、扩增及纯化3种重组单纯疱疹病毒,受染肝癌细胞株HepG2中以RT-PCR法检测到GALV.fus基因的表达.     

槐杞黄颗粒对阿霉素肾病大鼠肾组织nephrin和podocin表达的影响

目的：通过观察槐杞黄颗粒对阿霉素肾病大鼠肾组织中nephrin与podocin基因及蛋白表达的影响,探讨槐杞黄颗粒治疗肾病综合征的作用机制。方法：将Sprague-Dawley大鼠20只随机分为5组（即正常对照组、模型组、激素组、槐杞黄组和槐杞黄＋激素组）,除正常组大鼠外,各组大鼠尾静脉一次性注射阿霉素造模。分别在建模后第7、14、21及28天收集24h尿液,检测大鼠24h尿中的蛋白含量;第29天处死所有大鼠,取肾脏组织,光学显微镜和电子显微镜下观察大鼠肾脏病理改变,实时荧光定量聚合酶链式反应法检测肾组织nephrin与podocin mRNA的表达,蛋白质印迹法检测肾组织nephrin与podocin蛋白的表达。结果：与正常对照组比较,从建模第14天开始模型组大鼠24h尿液中蛋白量增多（P=0.005）,并随造模时间延长逐渐增加（P=0.015,P=0.012）;从第14天开始,槐杞黄组与正常对照组相比,其尿蛋白减少不明显（P〈0.05）;第21天时,激素组与正常对照组相比,其尿蛋白明显增加（P=0.045）。光学显微镜下发现：模型组肾间质有灶性炎症细胞浸润,伴少量纤维组织增生;药物治疗组炎症细胞浸润较少。电子显微镜下发现：模型组肾小球足突大部分融合、消失,或出现部分微绒毛;槐杞黄组基底膜基本光滑均匀,足突融合明显减轻;激素组及槐杞黄＋激素组足突清晰,甚至接近正常对照组。与正常对照组相比,模型组肾组织中nephrin、podocin mRNA及蛋白表达均明显减少（P〈0.05）;与模型组比较,药物治疗组nephrin、podocin mRNA及蛋白表达均明显增加（P〈0.05）。24h尿蛋白量与nephrin mRNA以及nephrin和podocin蛋白的表达呈负相关。结论：槐杞黄颗粒可通过上调裂孔隔膜上的nephrin及podocin的表达维持足细胞裂孔隔膜的完整性,减轻肾小球滤过屏障的损伤,以此降低尿蛋白漏出。