异噻唑啉酮类衍生物抑菌及防腐效果的研究

目的研究异噻唑啉酮类衍生物(KF-88)的抑菌效果，观察其在洗涤剂中的防腐性能。方法采用营养肉汤稀释法，测定该抑菌剂对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌和黑曲霉的最小抑菌浓度(MIC)，并在此基础上进行模拟现场试验。结果KF-88对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的MIC为0．0016‰；对大肠埃希菌和黑曲霉的MIC为0．03‰；KF-88在洗洁剂中浓度为1‰时，可抑制其中的金黄色葡萄球菌生长。结论异噻唑啉酮类衍生物对细菌、霉菌和酵母具有很强的抑菌力。其在洗涤剂工业及其他多种生产领域具有较好的应用前景。     

天然海藻色素糖蛋白诱导Hela细胞凋亡作用

目的研究天然海藻色素蛋白对宫颈癌Hela细胞的凋亡作用,并探讨其作用机制。方法采用MTT法检测天然海藻色素蛋白对Hela细胞存活率的影响;DAPI荧光染色法观察细胞形态;细胞DNA片段试剂盒检测Hela细胞内DNA片段化程度;Western blot检测细胞内的凋亡蛋白Bax,抗凋亡蛋白Bcl-2,半胱天冬氨酸酶Caspase-3、-9,多聚ADP核糖聚合酶PARP。结果天然海藻色素能明显降低Hela细胞的存活率,致使细胞形态发生变化,细胞内形成凋亡小体,DNA片段化程度升高,并呈现剂量依赖性;细胞内Bax表达量增加,Bcl-2表达量下降,Bax/Bcl-2比例随之增加,Caspase-3、-9被活化,表达量增加,Caspase-3活性增强,PARP被切割为剪切型PARP(Cleaved PARP)。结论天然海藻色素蛋白能诱导Hela细胞凋亡,并且呈现剂量依赖性,诱导凋亡的过程可能与上调细胞内Bax/Bcl-2的比例和激活Caspase-3、-9有关。     

结核分枝杆菌Rv3428c重组蛋白表达与纯化及其单克隆抗体的制备

目的 制备并鉴定Rv3428c的单克隆抗体,为结核分枝杆菌快速特异性抗原检测奠定基础。方法 同源重组得到pET28a-Rv3428c表达载体,转入E.coli BL21(DE3)后进行IPTG诱导表达,用Ni-NTA亲和层析纯化目的蛋白。重组蛋白免疫小鼠后进行细胞融合,间接ELISA、Western Blot筛选阳性杂交瘤细胞系,以筛选获得的阳性杂交瘤细胞诱导小鼠产生腹水,蛋白A亲和层析法纯化抗体,BCA法测定浓度,ELISA和SDS-PAGE进行单克隆抗体的鉴定及亚型和效价的测定。结果 成功构建pET28a-Rv3428c表达载体、表达并纯化出目的蛋白。Rv3428c蛋白免疫小鼠使小鼠产生致敏B淋巴细胞,在聚乙二醇作用下,淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合,形成杂交瘤细胞。筛选得到的阳性杂交瘤细胞株,通过体内诱生法制备获得Rv3428c单克隆抗体。该单抗属于IgG2a亚类,κ型轻链,效价约为1∶128 000,浓度为4 mg/ml。结论 本研究制备并纯化了Rv3428c重组蛋白,获得了抗Rv3428c单克隆抗体,为Rv3428c用于结核分枝杆菌快速特异性抗原检测奠定基础。     

β-半乳糖苷酶基因及其在基因学中的应用

β -半乳糖苷酶基因 (ｌａｃＺ基因 )编码 β -半乳糖苷酶 ,由4个亚基组成 ,可催化乳糖分解为一分子的葡萄糖和一分子的半乳糖 ,还可催化Ｘ -ｇａｌ (5 -溴 -4 -氯 -3 -吲哚 -β -Ｄ -半乳糖苷 )水解 ,产物呈蓝色 ,便于检测和观察。基于这个特点 ,ｌａｃＺ基因常作为载体基因 ,被广泛地应用于基因学研究当中。ｌａｃＺ基因来源广泛 ,可来源于大肠杆菌、乳酸菌、链球菌等多种微生物。目前 ,已对多种来源的酶基因进行了深入的分析 ,β -半乳糖苷酶基因库已基本建立并日趋完善 ,但在基因学中应用最广的仍然是大肠杆菌ｌａｃＺ基因 ,它是大肠杆…     

德氏乳杆菌保加利亚亚种β-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的非融合表达

目的在大肠杆菌中非融合表达德氏乳杆菌保加利亚亚种β-半乳糖苷酶,为构建能高效表达β-半乳糖苷酶的食品级益生菌株奠定基础。方法选择德氏乳杆菌保加利亚亚种(1.1480和wch9901)β-半乳糖苷酶基因(lacZ)起始密码ATG上游-18bp到ATG下游1bp的一段包含SD位点和ATGA位点的序列为上游引物,PCR扩增lacZ,插入表达质粒pMG36e构建重组表达质粒。转化大肠杆菌,筛选阳性克隆,提取重组质粒进行酶切鉴定和测序,并测定转化菌β-半乳糖苷酶活性。结果重组质粒酶切鉴定合格;其中插入的外源片段序列与德氏乳杆菌保加利亚亚种lacZ标准序列符合率达99%以上;携带重组质粒pMG36e-lacZ1.1480的大肠杆菌DH5α酶活性为3.074U/mL,酶比活性为6.939U/mgpro;携带重组质粒pMG36e-lacZwch9901的大肠杆菌DH5α酶活性为4.755U/mL,酶比活性为8.537U/mgpro。结论成功在大肠杆菌中非融合表达了德氏乳杆菌保加利亚亚种β-半乳糖苷酶;本研究选择的SD位点和ATGA位点能在大肠杆菌中有效地引导蛋白的非融合表达。     

长期服用华法林致脑出血1例

病人,男,59岁。无明显诱因出现头痛伴呕吐1 d,自服感冒药物板蓝根颗粒治疗,效果不佳而入院。病人10年前因风湿性心脏病和二尖瓣狭窄行二尖瓣置换术。术后长期服用华法林3.125 mg/d抗凝。入院查体:体温36.8℃,脉搏82 min-1,呼吸17 min-1,血压19/9 kPa;神清语利,双眼动各向充分,无视物模糊,未见眼震;双侧瞳孔直径3.0 mm,光反射存在,伸舌居中,四肢肌力Ⅴ级,肌张力可,腱反射(),病理症未引出,颈项板紧;克氏征(-),布氏征(-),     

保加利亚乳杆菌β-半乳糖苷酶基因的扩增及其影响因素

目的 通过扩增得到保加利亚乳杆菌编码高效β-半乳糖苷酶的基因,并探讨影响扩增的因素。方法 采用溶菌酶加冻融法提取细菌DNA;选取不同的模板浓度、退火温度分别进行扩增。结果 模板浓度60ng／μl、退火温度66℃是保加利亚乳杆菌β-乳糖苷酶基因的较优扩增条件。结论 优化了扩增保加利亚乳杆菌β-半乳糖苷酶所需的退火温度、模板浓度等条件,提高了扩增产物的产量。     

HPV 18型E6蛋白抗原表位预测与分析

目的 用生物信息学方法分析预测HPV 18型E6蛋白的B细胞和T细胞表位,为宫颈癌免疫治疗的疫苗及药物开发提供参考靶点。方法 基于NCBI中HPV18型E6蛋白的氨基酸序列,利用DNA star软件预测其二级结构、亲水性、表面可及性及柔韧性;利用ABCpred软件预测出其B细胞表位;综合使用CTLPred和NetMHC 4.0软件分析其CTL表位;ProPred和NetMHCIIpan 3.1软件预测其Th表位。结果 HPV 18型E6蛋白二级结构中α螺旋和β转角较多且分布较为均匀;预测出了4个B细胞表位,它们大多与亲水性强、表面可及性好、柔韧性好的蛋白区域重叠,易于结合抗体;E6蛋白具有丰富的细胞毒性和辅助性T细胞表位。结论 HPV 18型E6蛋白作为宫颈癌免疫治疗的理想靶点具有同时诱导特异性体液免疫和细胞免疫的潜能,通过对其B/T细胞抗原表位的预测为免疫治疗相关疫苗及药物抗原肽的选择提供了理论依据。     

临床药师对霍奇金淋巴瘤患者的药学监护

目的:探讨临床药师对霍奇金淋巴瘤患者实施药学监护的过程、方法及其作用。方法:临床药师在查房过程中发现临床实际治疗过程中潜在的问题,从药物应用的细节入手,总结问题并及时反馈给护士和患者,为患者提供个体化用药。结果:经过与护士的有效沟通,避免了药物治疗中可能出现的不良反应;通过药患教育,消除了患者对药物治疗的疑虑,提高了患者用药依从性。结论:临床药师可以护士和患者的有效沟通为切入点,积极开展药学监护。     

四川省某院矽肺住院患者流行病学特征及结核潜伏感染率分析

目的 了解近年矽肺患者流行病学特征及结核潜伏感染的情况.方法 收集2017年1月至2020年5月华西第四医院的矽肺住院病人的病案资料,对其回顾性调查并采用描述性流行病学方法进行分析.结果 本次纳入病例共计1427人,入院诊断为矽肺壹期、贰期、叁期病人分别为243、185、485人;矽肺患者99.86％为男性;病人平均年...