基因突变检测方法进展

直接基因突变的研究是近年来国内外生物医学研究领域中最热门的内容之一。本介绍了一些基因突变检测方法，包括筛选未知突变的方法ＲＮａｓｅ，ＳＳＣＰ，ＤＧＧＥ（ＣＤＧＥ、ＴＧＧＥ、ＴＳＧＥ）、ＣＣＭ、ＨＥＴ、ＣＯＩ、ＤＳ法及诊断已知突变的方法如杂交法、扩增法（ＡＲＭＳ、ＲＦＬＰ、ＰＣＲ、ＬＣＲ）及ＭＲＥＣ法。这些方法各有长短，然而数种技术的巧妙组合可能取长补短，形成一个完整的基因突变检测系统。     

蛋白激酶CβⅡ与大肠癌发生发展关系的研究

目的探讨蛋白激酶CβⅡ(PKCβⅡ)在大肠癌发生发展中的可能作用机制。方法选取1996～1999年郑州大学第一附属医院大肠癌根治性手术切除标本69例,手术切除大肠腺瘤21例,另取距肿瘤边缘大于5cm正常大肠黏膜组织标本16例。应用免疫组织化学SP(Streptavidinperoxidase)法检测PKCβⅡ在大肠正常黏膜组织,大肠腺瘤和大肠癌中的表达。结果PKCβⅡ在正常大肠黏膜呈阴性或弱阳性表达;肿瘤组织中PKCβⅡ阳性染色颗粒主要定位于肿瘤细胞胞浆内。正常大肠黏膜、大肠腺瘤和大肠癌组织PKCβⅡ阳性表达率分别为6.25%、28.57%、56.52%,大肠癌组显著高于正常大肠黏膜组和大肠腺瘤组(P<0.05);PKCβⅡ在浸润不超过肌层组和浸润超过肌层至外膜及超过外膜组阳性表达率分别为60%(12/20)和67.57%(25/37),差异有显著性(P<0.05)。有淋巴结转移组阳性率为74.19%(23/31),明显高于无淋巴结转移组42.05%(P<0.05)。Dukes分期C+D期72.72%(24/33)显著高于A+B期41.67%(15/36)。PKCβⅡ表达与大肠癌大体形态、直径大小和分化程度无关(P>0.05)。结论PKCβⅡ与大肠癌的、浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期密切相关,PKCβⅡ可能参与了大肠癌的演进过程,是反映患者预后的敏感指标。     

氯沙坦通过减少细胞凋亡减轻心肌肥大大鼠的骨骼肌萎缩

目的:探讨细胞凋亡在心肌肥大大鼠骨骼肌萎缩中的作用及氯沙坦对心肌肥大大鼠骨骼肌萎缩的影响. 方法:雄性SD大鼠42只随机分成3组(n=14):Ⅰ组(对照组),Ⅱ组(心肌肥大组),Ⅲ组(心肌肥大氯沙坦治疗组). Ⅱ组和Ⅲ组分别一次性腹腔注射野百合碱(30 mg/kg)以诱导心肌肥大. 2 wk后,Ⅲ组大鼠用氯沙坦[10 mg/(kg·d)]灌胃. 再过2 wk后全部处死动物,以腓肠肌(GAS)的质量和体质量比作为骨骼肌萎缩的指标. TUNEL法检测GAS细胞凋亡. 免疫组化和Western Blot法检测GAS Bcl-2,Bax的表达,并把Bax/Bcl-2值作为凋亡的程度. 结果:与Ⅰ组比,Ⅱ组的GAS细胞凋亡率明显增加[(147.6±32.6)‰ vs (4.1±1.8)‰, P<0.05],并且GAS出现了萎缩. 与Ⅱ组比,Ⅲ组的GAS细胞凋亡率明显减少[(46.2±12.3)‰ vs (147.6±32.6)‰, P<0.05],GAS萎缩减轻. Bcl-2的表达Ⅱ组比Ⅰ组明显减少(P<0.05),Bax的表达明显升高(P<0.05). 而Ⅲ组与Ⅱ组相比Bcl-2的表达明显升高(P<0.05),Bax的表达明显减少(P<0.05). Ⅱ组GAS的Bax/Bcl-2值明显升高,而Ⅲ组Bax/Bcl-2值明显下降. 结论:细胞凋亡在心肌肥大大鼠骨骼肌萎缩中发挥着重要的作用,可能是骨骼肌萎缩的原因之一,氯沙坦可能通过改变Bax/Bcl-2值减轻心肌肥大大鼠骨骼肌的凋亡和萎缩.     

加兰他敏和石杉碱甲生物合成的研究进展

植物来源的加兰他敏、石杉碱甲等乙酰胆碱酯酶抑制剂(AChEIs)以其高效低毒的优势成为当前临床治疗阿尔茨海默病的主流药物。由于目前加兰他敏、石杉碱甲等AChEIs尚未实现工业规模化合成,故仍主要依赖植物提取。然而,药源植物培育周期长、难度大,药效物质含量低,随着社会需求的急剧攀升,供求矛盾日益突出。开发新替代资源以及利用现代基因工程技术合成加兰他敏、石杉碱甲等AChEIs是缓解当前矛盾的有效途径。对近年来加兰他敏和石杉碱甲生物合成的相关研究进展进行综述,总结了替代资源的开发研究现状,以期为挖掘加兰他敏、石杉碱甲等AChEIs优势新资源及利用代谢工程合成药效物质研究提供参考。     

机器人、腹腔镜以及开腹肝切除术治疗肝内胆管结石的对比研究

目的：探讨比较机器人、腹腔镜、开腹肝切除术治疗肝内胆管结石的安全性和有效性。方法：回顾性分析2019年5月—2020年4月在南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科接受达芬奇机器人辅助肝段切除手术治疗的肝内胆管结石患者23例,同时纳入腹腔镜手术（20例）、开腹手术（25例）治疗的肝内胆管结石患者作为对照,比较3组患者基本临床信息、手术时间、失血量、输血情况、肝门阻断情况、术后住院时间、术后肛门排气时间、术后进食时间、下床活动时间、视觉模拟评分（visual analogue scale,VAS）、肝功能、并发症等情况。结果：机器人组手术时间与腹腔镜组相近,均长于开腹组;由于机器人装机消耗一定时间,去除装机时间以后,机器人组实际手术操作时间与开腹组相近。术中出血方面,机器人组出血量最少,腹腔镜组次之,开腹组最多。全肝门阻断方面,机器人组和腹腔镜组的肝门阻断比例明显低于开腹组。此外,机器人与腹腔镜在促进术后恢复方面整体优于开腹手术,包括术后住院时间更短、肛门通气更快、术后进食更早、下床活动更快以及VAS更低。3组患者的术后肝功能以及并发症发生率没有统计学差异。结论：机器人手术以及腹腔镜手术能够有效减少肝内胆管结石肝切除手术出血量,降低全肝门阻断率,促进术后恢复。尤其在缩短手术操作时间、降低出血量、加快术后出院方面,机器人手术明显优于腹腔镜手术。     

家兔急性心肌缺血室颤阈的动态变化

麻醉家兔33只,随机分为实验组(20只)与对照组(13只)。在维持自主呼吸、自主心律的条件下,以分频式、R波触发易损期刺激技术,测定室颤阈(VFT),观察左室支结扎后两小时内VFT的演变。结果:左室支结扎后VFT立即由结扎前的31.2±1.44V降低至12.8±0.7V(P《0.001),15分钟降至最低值为5.34±0.4V,30分钟后逐渐回升,120分钟达17.7±3.2V,仍明显低于结扎前水平(P《0.001)。而对照组120分钟内VFT维持稳定(31.2±1.15V P>0.1)。本实验结果为利用家兔进行急性心肌缺血时室颤防治的研究提供了实验依据。     

宣威县肺癌高低发区人尿的致突变性鉴定

宣威县肺癌高、低发区居民尿的Ames试验结果表明接触煤烟尘又吸烟的居民尿中含有移码型致突变物,并且主要是经代谢活化的间接致突变物。其致突变性阳性率高于接触柴烟尘和只接触煤烟尘而不吸烟的居民,回变菌落数高于接触柴烟尘的居民,提示接触煤烟尘和吸烟两因素有协同作用。     

环境内分泌干扰物低剂量效应研究进展

近10年来，环境内分泌干扰物对健康的影响引起了人们的广泛关注。由于环境中有害物质的暴露呈低剂量长期接触的特征，阐明其低剂量效应特征及其对健康的影响，对于其安全性评价极为必要。有资料表明，通过实验动物证实了某些内分泌活性物质的低剂量效应，传统的多代繁殖实验标准方案不能揭示实验动物暴露于接近或低于无作用剂量水平（NOAEL）的分泌活性物质时导致的主要繁殖效应或发育效应，许多低剂量效应的毒理学意义尚未确定。环境中内分泌干扰物低剂量效应的存在对人类人有极在的潜在威胁。本文就近年来对环境内分泌干扰物低剂量效尖的发现及研究进展及发展趋势作一综述。     

等容血液稀释和亚硒酸钠对家兔急性心肌梗塞早期左室功能的影响

观察了右旋糖酐40等容血液稀释和亚硒酸钠对家兔急性心肌梗塞早期左室收缩和舒张功能的影响。结果如下:与对照组相比,等容血液稀释和亚硒酸钠以及两者合用,使LVSP和+dp/dt-max明显回升(P<0.05)、T值和—dp/dt-max无明显变化(P>0.05);单用亚硒酸钠,LVSP和+dp/dt-max的回升随时间延长稍有下降。结果提示:①右旋糖酐40等容血液稀释和亚硒酸钠可改善急性心肌梗塞早期左室收缩功能,前者的作用持续时间较长;②两者对舒张功能作用不明显;③两者对左室功能无协同作用。     

鼻中隔髂骨移植治疗萎缩性鼻炎

萎缩性鼻炎治疗方法很多,各有优缺点,疗效不一。我科自１９８６年起采用鼻中隔髂骨移植术治疗萎缩性鼻炎２６例,疗效满意,报告如下。１资料与方法１．１临床资料２６例（５２侧）患者中,男８例,女１８例;年龄２１～５８岁,平均年龄２５．５岁;病程２～１５年,平...