氧化甾醇抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及诱导其凋亡的作用

目的 :研究 3β ,5α ,6 β 胆甾烷三醇 (Triol)和2 5 羟胆固醇 (2 5OH)对VSMC增殖的影响 ,探讨氧化甾醇在动脉粥样硬化 (AS)发病中的作用和意义。方法 :培养和鉴定新西兰白兔主动脉VSMC ;以含不同浓度的Triol和 2 5OH的培养液作用于VSMC为实验组 ,不含氧化甾醇或含胆固醇的培养液作为对照组。VSMC增殖及其代谢活性以WST 1测定 ,细胞凋亡以光镜、透射电镜、脱氧核苷酸末端转移酶介导脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记 (TUNEL)判断。结果 :在1× 10 - 9～ 1× 10 - 7mol·L- 1范围的Triol和 2 5OH对VSMC的WST 1代谢活性无明显变化 (P >0 .0 5 ) ,而≥ 1× 10 - 6 mol·L- 1的氧化甾醇则使其代谢活性显著下降 (P <0 .0 1) ;≥ 2 0× 10 - 6 mol·L- 1的Triol和2 5OH诱导VSMC胞体皱缩变小、染色质在核周边浓集、核碎裂、空泡和凋亡小体形成等超微结构变化 ;TUNEL呈阳性反应。结论 :小剂量氧化甾醇无促进VSMC增殖而较大剂量氧化甾醇可诱导VSMC凋亡。     

原发性高血压病人的甘油三酯水平与空腹胰岛素、自由基代谢及凝血/纤溶活性关系的研究

目的 研究高血压病人甘油三酯(TG)和空腹胰岛素(INS)、自由基代谢及凝血/纤溶活性的关系。方法 以未治疗的高血压病人空腹血清TG大于1.8mmol/L为Ⅰ组,TG小于或等于1.8mmol/L为Ⅱ组,比较两组的INS、胰岛素敏感指数(ISI)及其丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、血小板α-颗粒膜蛋白(GMP-140)、组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)及其抑制剂(PAI)等指标的差异。结果 Ⅰ组的 TG、INS、ET、MDA、PAI、GMP-140均高于Ⅱ组,而ISI、NO、SOD、GSH-Px、t-PA均较之为低,均P<0.05或P<0.01。结论 高血压病人伴高甘油三酯血症存在着较明显的胰岛素抵抗、脂质过氧化反应增强、抗氧化酶活性降低、血管内皮细胞功能障碍、血小板活化、纤溶活性降低等现象,重视高血压病人伴高甘油三酯血症的治疗有助于减少其他心血管疾病及其并发症的发生。     

胰岛素对心脏细胞增殖的影响及其在心肌肥厚中的作用

目的　研究胰岛素对心肌细胞和心肌成纤维细胞增殖的影响 ,探讨其在心肌肥厚中的作用。方法　①乳鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞的培养及光镜、电镜和免疫细胞化学染色的鉴定。②两种细胞在不同浓度胰岛素作用下细胞数量、代谢活性与DNA合成 (WST 1、BrdUELISA法 )的测定及细胞周期分析 (流式细胞仪 )。结果　①培养的心脏细胞分别为心肌细胞和成纤维细胞。②胰岛素作用下 ,心肌细胞的数量、WST 1与BrdU的OD值及S +G2 +M期细胞百分比无变化 (P >0 0 5 ) ;而心肌成纤维细胞的数量、WST 1与BrdU的OD值及S +G2 +M期细胞百分比均升高 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。结论　胰岛素可促进培养的心肌成纤维细胞增殖 ,可能在心肌肥厚中起重要作用     

关节镜下交叉韧带重建术后患者的早期康复护理观察

目的：加强关节镜下交叉韧带重建术后患者的早期康复护理，促进患者早日康复。方法：对我科2008年1月至2012年1月之间的21例关节镜下交叉韧带重建术后患者加强早期康复护理，观察效果。结果：加强早期护理后，手术后患者抽屉实验显示：术前21例阳性，术后有3例弱阳性，Lachman实验：术前21例阳性，术后有2例弱阳性。结论：加强关节镜下交叉韧带重建术后患者早期康复护理，可促进膝关节功能恢复。     

SD大鼠左心室利钠肽三型受体的表达

目的：研究利钠肽三种亚型受体（NPR—A,NPR—B和NPR—C）是否在正常SD大鼠左心室心肌细胞有表达。方法：应用免疫组织化学和Western免疫印迹检测SD大鼠左室心肌NPR—A、NPR—B和NPR—C的表达。结果：两种方法显示SD大鼠左室心肌有NPR—A、NPR—B和NPR—C三种亚型受体的表达,以NPR—A表达最强,NPR-C表达最弱。结论：正常SD大鼠左室心肌有A、B、C三种利钠肽受体表达。     

自发性高血压大鼠颈动脉中膜细胞外基质的变化——替米沙坦的干预研究

目的:研究自发性高血压大鼠(SHR)颈动脉中膜细胞外基质(ECM)的变化及替米沙坦对其的影响.方法:将12周龄的SHR随机分为高血压组、替米沙坦高剂量组(Tel-H)、替米沙坦低剂量组(Tel.L),另设同性别、同周龄的WKY大鼠为对照组(n=lo),实验开始及每两周测鼠尾收缩压(SBP),18周后终止实验,麻醉后取颈总动脉,颈动脉切片.颈动脉中膜纤维黏连蛋白(FN)、层黏连蛋白(LN)的表达以sP免疫组化染色评估.结果:两周后Tel-H组的SBP显著低于SHR组(P<0.01),其降血压作用持续至实验结束,而Tel.L组SBP与SHR组比较差异无显著性(P>0.05);SHR组颈动脉中膜的FN、LN积分光密度(IOD)明显高于WKY组(P<0.01);Tel-H、Tel-L组颈动脉中膜FN、LN的IOD分别明显低于SHR组(P<0.05);颈动脉中膜FN、LN的IOD分别与MCSA呈显著正相关(r=0.954,0.859,P<0.01).结论:30周龄SHR颈动脉中膜ECM发生了明显重构,表现为胶原、FN、LN沉积增多,而弹力纤维减少;替米沙坦治疗能减少上述ECM的改变,从而减轻颈动脉的重构.     

兔心脏成肌纤维细胞的培养及其表型

目的 心脏成肌纤维细胞的体外培养及其表型确定。方法 新西兰白兔心脏成肌纤维细胞的原代和传代培养．用光学显微镜、透射电镜观察细胞的形态学特征；用波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、肌动蛋白、结蛋白作为一抗进行免疫细胞化学染色(SP染色)。结果 光学显微镜下培养的细胞为长梭形、多角形或不规则形．细胞质透明；细胞核大，椭圆形．颜色淡．通常含2～3个核。透射电镜下细胞呈长梭形、多角形或不规则形；细胞质内有丰富的粗面型内质网和线粒体；细胞核大．可见2个以上细胞核，核仁明显，有的可见双核仁；细胞表面有许多微绒毛及短小突起。符合成纤维细胞的形态学特征。细胞波形蛋白、α-SMA的SP染色呈阳性反应，而肌动蛋白、结蛋白的SP染色呈阴性反应。结论 传代培养的细胞是呈VA表型的成肌纤维细胞。     

复合刺激试验测定小儿下丘脑—垂体轴功能的观察

应用一种由胰岛素、促甲状腺素释放激素、黄体生成素释放激素和左旋多巴同时刺激下丘脑-垂体的试验方法对32例生长落后儿童和18例性征早现的女孩进行了血清生长激素、促甲状腺激素、泌乳素、促滤泡生成素和促黄体生成激素的测定,结果证实,这种复合刺激试验不仅能在一次90分钟的试验中检测患儿多种激素分泌功能情况,而且亦减轻了患儿的痛苦和简化了操作,明显优于以往传统的各种单一试验,值得推广.     

体外培养心脏成纤维细胞增殖的检测方法

在培养的心脏成纤维细胞模型上建立检测增殖的方法。方法（１）差速贴壁分离法培养乳鼠心脏成纤维细胞,用光镜,电镜及免疫细胞化学染色进行鉴定。（２）同步测定心脏成纤维细胞在不同浓度胎牛血清作用下ＢｒｄＵ掺入和ＷＳＴ－１代谢活性。结果（１）培养的细胞经形态学观察和波形蛋白ＳＰ染色,鉴定成纤维细胞。（２）在０．１％,２．５％,５％和１０％的胎牛血清作用下,心脏成纤维细胞ＢｒｄＵ,ＷＳＴ－１的ＯＤ值分别是０．     

毛冬青甲素对大鼠骨髓间充质干细胞增殖及迁移的影响

目的观察毛冬青甲素(ilexonin A,IA)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖的影响,并探讨IA是否通过上调CXCR4的表达促进大鼠BMSCs迁移。方法采用MTT比色法检测IA(3.125、6.25、12.5、25、50、100、200、400、800 mg·L^-1)预处理BMSCs 24、48、72 h,观察对BMSCs增殖的影响,确定最佳药物浓度和最佳作用时间。用最佳浓度的IA干预第3代BMSCs 48 h,Transwell检测BMSCs迁移能力,Western blot法检测CXCR4的表达水平。结果 MTT结果显示,IA孵育BMSCs 24、48 h,与对照组相比,100~800 mg·L^-1组的细胞增殖明显减少(P<0.05);IA孵育BMSCs 48h,与对照组相比,6.25、3.125 mg·L^-1组细胞增殖明显增加(P<0.05);IA孵育BMSCs 72 h,与对照组相比,12.5~800mg·L^-1组细胞增殖明显减少(P<0.05),提示IA 6.25、3.125 mg·L^-1剂量组于48 h预处理BMSCs是最优选择。Transwell细胞迁移实验表明,IA(6.25、3.125 mg·L^-1)预处理BMSCs 48 h明显增强BMSCs运动迁移能力(P<0.05),且迁移与IA浓度无关,CXCR4拮抗剂AMD3100可完全阻断其促迁移效应。Western blot显示,IA(6.25、3.125 mg·L^-1)预处理BMSCs 48 h,上调CXCR4蛋白表达(P<0.05)。结论 IA可以促进BMSCs的增殖,并通过上调CXCR4的表达,提高BMSCs的迁移能力。