甲状腺相关眼病患者眼眶前脂肪细胞的培养及分化

【目的】研究甲状腺相关眼病患者(TAO)眼眶组织中是否存在前脂肪细胞，在一定条件下能否分化为成熟脂肪细胞，探讨脂肪细胞在TAO发病中的作用。【方法】选用TAO患者眼眶中的脂肪颗粒，共8例(8只眼)，采用组织块培养法培养细胞，观察细胞形态；细胞免疫组织化学方法检测前脂肪细胞因子-1的表达，初步验证前脂肪细胞的存在；诱导细胞向成熟脂肪细胞分化，油红O染色观察细胞形态及细胞内脂滴形成情况；RT-PCR检测分化过程中转录因子过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)表达的改变。【结果】原代培养细胞为梭形，增殖旺盛；免疫组化显示前脂肪细胞因子-1表达阳性；细胞可分化为成熟脂肪细胞，并伴有PPARγ基因表达的增强。【结论】TAO患者眼眶组织中存在着功能活跃的前脂肪细胞；进一步验证了脂肪细胞数量的增加在TAO发病中的重要作用。     

上海地区妊高征患者人类白细胞抗原DQA1及DQB1基因多态性研究

目的：探讨人类白细胞抗原系统（ＨＬＡ）与妊高征（ＰＩＨ）的关联。方法：采用非同位素标记的聚合酶链反应－顺序特异性寡核苷酸探针（ＰＣＲ－ＳＳＯ）杂交的方法，对３０个ＰＩＨ患者家庭（病例组）及１４个正常对照家庭（对照组）（每个家庭包括夫妇及其新生儿）进行了ＨＬＡ－ＤＱＡ１及ＨＬＡ－ＤＱＢ１位点的ＤＮＡ分型。结果：与对照组相比，ＰＩＨ患者夫妇ＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０５０２等位基因频率增高，ＨＬＡ－ＤＱＡ１等位基因共享增加，而ＨＬＡ－ＤＱＡ１各等位基因频率和ＨＬＡ－ＤＱＢ１等位基因共享无改变。ＰＩＨ患者和新生儿ＨＬＡ－ＤＱＡ１及ＨＬＡ－ＤＱＢ１等位基因频率和共享率均无改变。结论：ＨＬＡ－ＤＱＢ１＊０５０２可作为ＰＩＨ易感性的标志；夫妇ＨＬＡ－ＤＱＡ１共享增高导致ＨＬＡ－Ｄ区相容性增大，封闭抗体产生不足或缺如，妊娠期母儿间免疫平衡失调而诱发ＰＩＨ。     

心下型完全性肺静脉异位连接的超声诊断价值要点及漏误诊分析

目的：探讨超声心动图对心下型完全性肺静脉异位连接（infracardiac total anomalous pulmonary venous connection,ITAPVC）的诊断价值,分析超声心动图漏误诊原因,旨在提高超声对ITAPVC诊断的准确率。方法：回顾性分析53例经手术、多排螺旋CT或心导管造影证实为ITAPVC的临床资料,将术前超声检查的声像图表现与手术、多排螺旋CT或心导管造影结果对比分析,对超声漏、误诊及诊断不明确的声像图进行深入研究与探讨,并总结该病的超声心动图诊断要点。结果：53例病例中,29例在外院初筛,超声心动图正确诊断10例,疑似2例,漏诊15例,误诊2例,2例均误诊为完全性心内型肺静脉异位连接,漏误诊率58.6%;本院超声心动图正确诊断44例,疑似3例,所有正确诊断的病例中均显示左房壁回声完整,4根肺静脉均未与左房连接,可见共同肺静脉干连接垂直静脉,并穿过膈肌同腹主动脉及下腔静脉并行走行进入肝脏,与肝静脉、门静脉或下腔静脉连接。本组检查漏诊5例,误诊1例,漏误诊率11.3%,3例漏诊为房间隔缺损合并重度肺动脉高压,2例因同时合并完全性房室间隔缺损、右房异构而漏诊,1例误诊为完全性心内型肺静脉异位连接。结论：ITAPVC易于漏诊,当出现右房室明显增大、左房室偏小、房水平右向左分流时,应常规探查肺静脉的走行情况。若剑突下扫查发现门静脉、肝静脉或下腔静脉扩张则需高度怀疑ITAPVC,且同时进行心导管或CT血管造影检查,以便早期做出正确诊断,尽早手术,改善患儿的生存率,降低病死率。     

偶联剂CGE(N)-R型处理前后牙本质的表面状态及其荧光光谱

作者采用光镜、透射电镜及固体荧光测定考查了用自制偶联剂CGE(N)-R型处理前、后的牙本质面状态。光镜下显示,牙本质小管及其小孔,以脱钙后更为清晰。电镜下能直接观察到偶联剂晶体被牙本质吸附的状态。荧光光谱测定结果表明:偶联剂处理后的牙本质的荧光峰位红移达11～31nm,由此给出了偶联剂与牙本质之间化学结合的明确信息。为牙本质与偶联剂结合机理模式的建立提供了有力的实验依据。     

HLA-B27抗原检测对眼部炎症合并强直性脊柱炎的诊断意义

目的：探讨HLA-B27抗原检测对眼部炎症患者合并强直性脊柱炎(AS)的诊断意义。方法连续收集2012年1月至2015年10月北京同仁医院初发非感染性眼部炎症患者776例,依据发病部位将患者分为葡萄膜炎、巩膜炎、角膜炎和结膜炎四组。检测患者外周血淋巴细胞HLA-B27抗原表达,结合临床资料明确患者是否合并AS。结果776例患者中149例确诊合并AS,其中葡萄膜炎组130例,巩膜炎组6例,角膜炎组6例,结膜炎组7例。葡萄膜炎组患者的HLA-B27阳性率为25.80%,明显高于巩膜炎组的4.27%、角膜炎组的6.45%和结膜炎组的12.12%,差异均有统计学意义(P<0.05);HLA-B27抗原检测对眼部炎症患者合并AS诊断的灵敏度为94.63%,特异度为98.67%,阳性预测值为95.27%,阴性预测值为98.48%,正确指数为0.93。结论合并AS的眼部炎症患者主要表现为葡萄膜炎,也可表现为结膜炎、角膜炎和巩膜炎等。临床上对初发非感染性眼部炎症患者进行HLA-B27抗原检测,可以辅助诊断其是否合并AS。     

靶向LETMD1的miR-494对宫颈癌发病的作用

 目的 探讨靶向作用于LETMD1的miR-494对宫颈癌发病的作用。方法 选取2017-09至2018-03诊断为原发性宫颈癌、接受根治性子宫切除及盆腔淋巴结清扫术30例的病理标本,另选取同期因妇科良性疾病行全子宫切除30例的正常宫颈组织病理标本。检测癌组织及正常组织中 miR-494和 LETMD1的表达。结果 miR-494在宫颈癌组织中含量明显降低,与LETMD1表达呈明显负相关,且miR-494与肿瘤患者FIGO分期明显相关(P<0.05)。双荧光素酶报告实验证实miR-494直接作用于LETMD1 mRNA的3′UTR。集落形成试验证实miR-494通过靶向作用LETMD1抑制宫颈癌细胞的增殖。结论 宫颈癌患者miR-494与FIGO分期明显相关,miR-494可通过靶向作用于LETMD1 抑制宫颈癌细胞的增殖。     

HBeAg结合蛋白4基因剪切体HBeBP4A的克隆化

目的:克隆HBeAg结合蛋白未知功能新基因 HBeBP4的剪切体基因HBeBP4A,构建其真核表达载体,并应用生物信息学初步探讨其结构及功能．方法:应用PCR技术从HepG2细胞提取的cDNA扩增HBeBP4基因的剪切体基因 HBeBP4A,选用pGEM-Teasy载体进行TA 克隆,通过PCR,限制性酶切分析及测序进行鉴定,再将其亚克隆到真核表达载体 pcDNATM3．1/myc-HisA,通过PCR,限制酶切分析进行鉴定,并应用生物信息学初步分析其物理化学性质,蛋白质结构和功能．结果:成功扩增出HBeBP4剪切体基因,命名为HBeBP4A．利用生物信息学分析推定其 ORF为1104个核苷酸(nt),编码产物为367个氨基酸残基(aa)．结论:发现了HBeAg结合蛋白4(HBeBP4)基因的剪切体HBeBP4A,构建了pcDNATM3．1／ myc-HisA真核表达载体．     

乙型肝炎病毒前-S1蛋白反式激活蛋白5基因的克隆化研究

目的克隆乙型肝炎病毒（HBV）前-S1蛋白反式激活新基因PS1TP5的cDNA,并应用生物信息学技术初步探讨其结构及功能。方法应用聚合酶链反应（PCR）技术以HepG2细胞的cDNA为模板扩增PSlTP5,以pGEM-T载体进行TA克隆,通过PCR、限制性酶切分析及测序进行鉴定,再将其亚克隆到真核表达载体pcDNA^TM 3．1／myc-His A,通过PCR、限制性酶切分析进行鉴定,并应用生物信息学技术初步分析其物理化学性质、蛋白质结构和功能。结果PCR成功扩增出PS1TP5基因,并将其分别克隆进pGEM-T和pcDNA^TM3．1／myc-HisA载体,经PCR、限制性酶切鉴定后测序证实。因其可以被前-S1蛋白反式激活,故命名为前-S1反式激活蛋白5（PS1TP5）,已在GenBank中注册,注册号：AY427953。生物信息学分析确定其ORF为438个核苷酸（nt）,编码产物为145个氨基酸残基（aa）。结论发现了HBV前-S1蛋白反式激活新基因PS1TP5,构建了pcDNA^TM 3．1／myc-His A真核表达载体,为进一步研究其生物学功能及慢性乙型肝炎发病机制创造了条件。     

内镜下单点注射组织胶治疗GEV1胃底静脉曲张

目的:评估内镜下单点注射组织胶治疗胃底静脉曲张的近期疗效,并印证内镜下GEV1型胃底曲张静脉血流方向的理论.方法:GEV1型胃底静脉曲张进行组织胶注射治疗,注射点选在贲门旁小弯侧曲张静脉,进行单点注射.静脉内注射后观察1-10 min,2wk内进行内镜复查.结果:胃底静脉曲张组织胶治疗后静脉均固化,部分静脉明显消失.胃底曲张静脉栓塞率100%(32/32).注射点黏膜糜烂发生率6.2%(2/32).结论:内镜下GEV1型胃底静脉曲张血流方向确实是从贲门旁小弯侧流向大弯侧.由静脉起始部位单点注射组织胶治疗,疗效显著.     

128例手足口病合并中枢神经系统感染的中医证治研究

目的 探讨手足口病合并中枢神经系统感染的中医证候特点,观察中西医结合治疗疗效.方法 对128例手足口病合并中枢神经系统感染患儿进行中西医临床特征观察,并开展了临床对照研究.根据患儿及其家长的治疗意愿,将128例分为中西医结合治疗组(治疗组)93例和西医治疗组(对照组)35例.两组患儿均进行对症支持治疗,治疗组同时服用中药风引汤加减治疗.中药疗程为14天.结果 手足口病合并中枢神经系统感染以无菌性脑膜炎、病毒性脑炎、急性弛缓性麻痹为主要临床表现,症状较轻,呈自限性经过,肌肉抖动及易惊发生率高,急性弛缓性瘫痪发生率较高.中医证候以"热""瘫""风痫"为主要特点,热人心包、热陷厥阴等昏谵闭证和营血分证候少见.以风引汤加减治疗町减少糖皮质激素用量,有一定的缩短发热时间.缩短脑膜炎、脑炎病程的作用.结论 手足口病合并中枢神经系统感染的病邪性质为热毒夹湿,主要以气分证候为主,病位在心、脾、肝,以专病专方"风引汤"为主加减治疗有一定的疗效.