HPLC-UV法测定大鼠血中姜黄素及一种新类似物的浓度

目的 建立大鼠血浆中姜黄素及其一种新类似物T63的HPLC分析方法。方法 含血浆样品以叔丁基甲醚进行液液萃取,取上清,HPLC进样分析。色谱条件：流动相为乙腈-水(60：40),含5％冰醋酸。内标物：另一姜黄素新类似物T315。色谱柱：Hypersil BDS C1s色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）。紫外检测波长：355,415 nm。SD大鼠分别灌胃(28 mg· kg-1)与静注(5.6 mg·kg-1)姜黄素与T63后,以高效液相色谱法测定血药浓度。结果 血浆中姜黄素的标准曲线范围为5.00 ng· mL-1 ～ 500.00 ng· mL-1,T63的标准曲线范围为10.0 ng·mL-l～500.0 ng·mL-1,回归方程分别为：Y=0.0049+0.0231X,r=0.9994;Y=-0.0115+0.0037X,r=0.9979;提取回收率分别为75.09％～83.12％,78.68％～86.70 ％(n=5);批内RSD分别≤10.20％、7.48％,批间RSD分别≤8.81％、7.41％。试验结果显示,T63的口服吸收较姜黄素有所改善。结论 本分析方法灵敏、准确、重复性好,为姜黄素及其类似物在药代动力学研究中样品的检测提供了可靠的方法。     

丹参酮ⅡA 对大鼠细胞色素 P450 酶的诱导作用

目的 研究丹参酮Ⅱ_A对大鼠细胞色素 P450 酶的诱导作用。方法 丹参酮Ⅱ_A 7、20、60、180 mg/(kg·d) 4 个剂量组,雄性 SD 大鼠连续 ig 7 d,取肝脏组织,应用体外“cocktail”方法,反转录-聚合酶链反应,免疫印迹杂交方法分别检测 CYP450 酶活性、基因表达和蛋白表达的变化。结果 丹参酮Ⅱ_A能显著诱导 CYP1A2 及 CYP2E1 的活性以及基因、蛋白表达,且呈剂量依赖性;高剂量组能增强 CYP2C19 的活性,但对基因、蛋白表达没有影响;对包括 CYP3A1 在内的其他亚型没有影响。结论 丹参酮Ⅱ_A对大鼠多种 CYP450 亚型有诱导作用。     

微探针电喷雾串联质谱与液相色谱-电喷雾串联质谱的基质效应对比研究

电喷雾电离(electrospray ionization, ESI)易受基质干扰,影响其定量的准确度、精密度和稳定性。探针电喷雾电离(probe electrospray ionization, PESI)是原位电离的代表之一,无色谱分离,无复杂样品前处理,具有简便、快速、高通量等诸多优点。微探针电喷雾串联质谱(micro pen electrospray ionization tandem mass spectrometry,μPen-ESI-MS/MS)是基于现有的PESI开发的新技术。本文旨在评价μPen-ESI-MS/MS方法用于血浆中药物定量分析的基质效应,并与液相色谱-电喷雾串联质谱(liquid chromatography coupled with electrospray ionization tandem mass spectrometry, LC-ESI-MS/MS)方法的基质效应进行比较。分别建立5种药物血浆样品的μPen-ESI-MS/MS和LC-ESI-MS/MS方法,计算两种方法的基质因子及内标归一化的基质因子。结果表明,他克莫司、氟桂利嗪和地氯雷他定的...     

CYP2C19基因多态性与沙利度胺抗肺癌疗效和不良反应的关系研究

目的探讨在肺癌治疗中CYP2C19基因多态性与沙利的疗效和不良反应的关系。方法通过检测患者的CYP2C19的基因型及沙利度胺稳态血药浓度,将患者分成EM组和PM组,比较2组疗效和不良反应的差异。结果 77例肺癌患者PM 13例(16.9%)。EM组和PM组的有效率分别为39.1%、30.8%,中位生存期分别为9.0月和8.0月,1年生存率分别为62.5%、46.2%,P<0.05。EM组恶心呕吐、腹泻、眩晕的发生率低于PM组,P<0.05。PM的平均血药浓度要高于EM组,P<0.05。结论 CYP2C19基因多态性对沙利度胺抗晚期肺癌生存期无明显影响,EM患者能够降低化疗后恶心呕吐反应发生率,提示PM患者宜从低剂量开始服用沙利度胺。     

一过性离体大鼠肝脏灌流模型的建立

目的利用UP-100通用灌流仪建立了一过性离体大鼠肝脏灌流模型。方法用Krebs-Henseleit碳酸氢盐缓冲液进行一过性离体大鼠肝脏灌流,在灌流时长90 min内通过检测AST、ALT和LDH的浓度,观察肝脏外观及胆汁流量,测定肝重变化,进行组织切片观察组织病理变化来评估离体灌流肝脏的损伤程度。结果 90 min灌流时长中,肝脏颜色质地正常,胆汁流量均匀,相应转氨酶释放量少,病理切片结果正常。结论离体大鼠肝脏在UP-100通用灌流仪90 min灌流过程中能保持较好的组织结构和肝脏功能,可用于离体肝脏的药物代谢研究。     

网络环境下结合TBL的临床药理学立体化课程建设

网络技术的发展极大地改变和推动了教学与学习模式的发展。临床药理学是一门多学科交叉的桥梁学科,在医学和药学教学中占有重要地位。为激发学生的主动性和创造性,充分利用现代网络的强大沟通功能,建设网络环境下融入TBL元素的临床药理学立体化课程体系,探索符合该课程特点的新教学与学习模式和方法。     

地塞米松的诱导效应对异烟肼大鼠肝毒性的影响

目的观察大鼠孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)激活剂地塞米松(dexamethasone,DEX)对异烟肼(isoniazid,INH)肝毒性的影响,探讨其发生机制,为临床上抗结核药物所致肝损伤的防治策略提供理论依据。方法 SD♂大鼠随机分成4组(n=6):对照组、INH给药组、DEX给药组和INH-DEX合并给药组,分别给予含DEX 20 mg.kg-1的饲料和含1 000 mg.L-1INH的水喂养28 d后,测定肝脏指数(liver index))和药物代谢酶CYP3A活性,并制备肝组织切片观察各组大鼠肝毒性的程度,同时分析血清中酶学指标ALT、AST、ALP和血脂水平。结果使用DEX组的大鼠肝脏指数与对照组相比明显上升(P<0.01),INH合用DEX后肝细胞CYP3A活性与对照组相比增加了近3.0倍(P<0.01),其肝组织损伤程度加剧,肝细胞脂肪变性并伴有大片梗死,血清中ALT、AST、ALP、血脂水平均较单用INH组明显升高。结论大鼠PXR激活剂DEX能增强INH导致的大鼠肝毒性,其机制可能与DEX上调CYP3A的活性有关。     

肠道菌群与药物代谢

肠道菌群具有强大的代谢能力,被认为是人体后天获得的重要"代谢器官",在宿主消化、营养吸收、代谢、免疫等各方面发挥重要作用。肠道菌群参与外源药物等的体内代谢过程及内源糖类、蛋白质、脂肪等的代谢平衡,从而影响药物的体内处置过程、药效-毒性反应以及机体生理、病理状态。     

五酯片提取物对人CYP3A4及CYP3A5重组酶活性的抑制作用及其机制

五酯片是临床上常用的护肝中药单方制剂,常被用来治疗各种原因引起的肝损伤。前期研究表明五酯片可通过抑制CYP3A从而升高移植患者、大鼠体内他克莫司、环孢素、紫杉醇等药物的血药浓度。CYP3A4和CYP3A5是CYP3A的两种重要亚型,但它们在催化活性及对抑制剂敏感性上表现不同。对CYP3A4和CYP3A5抑制作用的差异可能会导致不同的药物相互作用,这种相互作用的风险在体内可能会被进一步放大。可见,研究五酯片对CYP3A4及CYP3A5活性抑制作用的异同具有较好的临床治疗学及经济学意义。然而,目前尚未见五酯片对CYP3A4及CYP3A5活性的抑制作用及作用机制的相关研究。因此,本研究利用人重组CYP3A4 (recombinant human CYP3A4, rhCYP3A4)、人重组CYP3A5 (recombinant human CYP3A5, rhCYP3A5)考察五酯片提取物对CYP3A4、CYP3A5活性的影响及作用特征、机制。结果表明,五酯片提取物对CYP3A4、CYP3A5活性的抑制作用存在NADPH、预孵育时间及浓度依赖性;其与CYP3A4及CYP3A5的结合比较牢固,不...