白细胞清除术联合化疗治疗高白细胞白血病疗效观察

目的 观察白细胞清除术联合化疗治疗高白细胞白血病的疗效。方法 使用CS3000 Plus血细胞分离机对23例高白细胞白血病患者进行白细胞清除术,术后进行化疗,同时选择14例同期高白细胞白血病患者单纯化疗作为对照,比较2者疗效。结果 经白细胞清除术后,患者外周血白细胞数较治疗前明显下降(P<0.001);所有患者的自觉症状显著改善,治疗组完全缓解率达47.8%,明显高于对照组(28.6%,P<0.01);治疗组早期病死率为17.4%,明显低于对照组(P<0.01)。结论白细胞清除术能迅速降低白细胞数,减轻高白细胞白血病患者化疗时引起的不良反应,提高化疗完全缓解率,是治疗高白细胞白血病的重要辅助方法。     

小干扰RNA对Jurkat细胞CXCR4基因表达的影响

目的 研究小干扰PNA(siRNA)对Iurkat细胞趋化因子受体4(CXCR4)基因表达的影响.方法 用针对CXCR4基因的siRNA转染人急性T细胞性白血病细胞系Iurkat细胞,用RT-PcR方法 检测其CXCR4基因表达水平的变化.结果 CXCK 4siPNA转染Iurkat细胞48 h后,其表达水平下降,能明显抑制CXCR4基因的表达.与空白对照组和阴性对照组比较,其差异有统计学意义(P＜0.01).结论 利用RNA干扰技术能有效抑制靶基因的表达,为下一步有关Iurkat细胞CXCR4基因的研究奠定一定的基础.     

黄芪甲甙对大鼠骨髓间充质干细胞多种造血相关因子表达的影响

背景：黄芪甲甙是中药黄芪的主要有效成分,能促进骨髓间充质干细胞的增殖及诱导分化,但涉及具体作用机制的报道较少。 目的：探讨中药黄芪甲甙对大鼠骨髓间充质干细胞造血相关因子表达的影响。 方法：全骨髓贴壁法和单克隆培养法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,接种于96孔板中,加药组分别用25,50,100,200 g/L黄芪甲甙100 μL孵育72 h,对照组仅加等量DMEM-LG培养液。间接免疫荧光法鉴定其生物学特性,MTT法检测黄芪甲甙对骨髓间充质干细胞增殖的影响,RT-PCR法检测黄芪甲甙干预后骨髓间充质干细胞造血相关因子的表达。 结果与结论：第3代骨髓间充质干细胞高表达CD44,低表达造血细胞表面标志CD45。与对照组比较,黄芪甲甙呈时间及剂量依赖性促进骨髓间充质干细胞的增殖,以200 g/L黄芪甲甙干预72 h促增殖作用最强(P < 0.05)。与对照组比较,加药组骨髓间充质干细胞SCF的表达显著增加(P < 0.01),TPO,GM-CSF,TGF-β1等细胞因子的表达无明显变化(P > 0.05),不表达白细胞介素3。黄芪甲甙可促进骨髓间充质干细胞的体外增殖,可能与其诱导骨髓间充质干细胞分泌SCF有关。     

二烯丙基二硫诱导K562细胞凋亡及与G2 / M期阻滞关系研究

目的探讨二烯丙基二硫（DADS）对体外培养的人白血病细胞系K562细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法采用细胞计数法、形态学观察、MTT分析法、AO／EB染色、流式细胞术探讨DADS对K562细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。结果1．DADS在10-80mg-L。范围内,对K562细胞的抑制作用呈剂量一时间依赖效应。2．DADS浓度在10-80mg．L-1。时作用K562细胞24h后,凋亡率逐渐升高,差异有统计学意义（p〈0．05或P〈0．01）。3．不同浓度DADS作用于K562细胞24h后,K562细胞阻滞于G2／M期。结论DADS有抑制K562细胞增殖和促进K562细胞凋亡的作用,其作用的可能机制与k562细胞阻滞于G2／M期有关。     

二烯丙基二硫对K562细胞增殖和细胞周期的影响

目的 探讨二烯丙基二硫( DADS)对人白血病K562细胞增殖和细胞周期的影响.方法 采用台盼蓝计数法、形态学观察、MTT分析法、流式细胞术、免疫组化法探讨DADS对K562细胞的作用及机制.结果 DADS能抑制K562细胞增殖;DADS处理后的K562细胞主要停滞在G2/M期;DADS处理后的K562细胞P21表达增加.结论 DADS有抑制K562细胞增殖作用,并使K562细胞生长阻滞在G2/M期.其作用机制可能与细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂P21参与其中有关.     

microRNA-21对肺成纤维细胞增殖和分化的影响

摘要： 目的 探讨小鼠肺成纤维化细胞模型中 microRNA（miR） -21 对肺成纤维细胞增殖和分化的影响。方法 24 只 SPF 级 C57BL/6 小鼠随机分为假手术组和肺纤维化模型组, 各 12 只。经气管内注入博莱霉素建立小鼠肺纤维 化模型, 采用荧光定量 PCR 检测各组肺组织 miR-21 的表达。提取小鼠成纤维细胞, 胰酶消化, 接种于 6 孔板, 使细 胞浓度达到 30%~50%。设随机对照组、 空白对照组和 miR-21 mimic 组。各组分别在 50 μL Opti-MEM 加入 2.5 μL PBS、 阴性对照储存液和 miR-21 mimic 储存液（20 μmol/L）。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖活性, 蛋白质印迹法检测成纤维细胞含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)和转化生长因子 （TGF） -β1的表达。结果 与假手术组比较, 肺纤维化模型组小鼠肺组织中 miR-21 的表达量明显上调。与随机对 照组和空白对照组比较, miR-21 mimic 组成纤维细胞 miR-21 基因表达显著上调, 成纤维细胞增殖率增加, ADAMTS-1 蛋白表达明显下降, 而 TGF-β1表达显著上调; 空白对照组与随机对照组 ADAMTS-1 及 TGF-β1蛋白表达无明显差 异。结论 在小鼠肺成纤维化细胞模型中上调的 miR-21 可通过ADAMTS-1/TGF-β1信号通路促进肺纤维化。     

黄芪甲甙对大鼠骨髓间充质干细胞多种造血相关因子表达的影响

背景:黄芪甲甙是中药黄芪的主要有效成分,能促进骨髓间充质干细胞的增殖及诱导分化,但涉及具体作用机制的报道较少.目的:探讨中药黄芪甲甙对大鼠骨髓间充质干细胞造血相关因子表达的影响.方法:全骨髓贴壁法和单克隆培养法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,接种于96孔板中,加药组分别用25,50,100,200 g/L黄芪甲甙100 μL孵育72 h,对照组仅加等量DMEM-LG培养液.间接免疫荧光法鉴定其生物学特性,MTT法检测黄芪甲甙对骨髓间充质干细胞增殖的影响,RT-PCR法检测黄芪甲甙干预后骨髓间充质干细胞造血相关因子的表达.结果与结论:第3代骨髓间充质于细胞高表达CD44,低表达造血细胞表面标志CD45.与对照组比较,黄芪甲甙呈时间及剂量依赖性促进骨髓间充质干细胞的增殖,以200g/L黄芪甲甙干预72 h促增殖作用最强(P＜0.05).与对照组比较,加药组骨髓间充质干细胞SCF的表达显著增加(P＜0.01),TPO,GM-CSF,TGF-β1等细胞因子的表达无明显变化(P＞0.05),不表达自细胞介索3.黄芪甲甙可促进骨髓间充质干细胞的体外增殖,可能与其诱导骨髓间充质干细胞分泌SCF有关.     

MEK-ERK通路在二烯丙基二硫诱导人白血病K562细胞自噬中的作用

目的 研究MEK-ERK信号通路在二烯丙基二硫(DADS)诱导人白血病K562细胞自噬中的作用.方法设置实验组(DADS浓度分别为10、20、40、80 mg/L)、空白对照组和溶媒对照组,各组K562细胞培养48 h后,采用倒置显微镜观察细胞形态学变化;单丹磺酰尸胺(MDC)染色荧光显微镜观察自噬泡,流式细胞术检测自噬率;蛋白印迹法检测ERK、磷酸化ERK(p-ERK)、LC3-Ⅱ蛋白的表达情况.结果DADS作用K562细胞48 h后,随DADS浓度增加,K562细胞数目明显减少,细胞形态出现不规则、胞膜变形,细胞染色增多、细胞内绿色点状小粒增多,提示自噬增强,浓度为40 mg/L DADS组最明显.DADS作用48 h后,K562细胞自噬率逐渐升高,40 mg/L DADS组自噬率最高,20、40、80 mg/L DADS组自噬率均高于空白对照组(均P<0.05).各组的ERK蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),但随着DADS浓度增加p-ERK、LC3-Ⅱ蛋白表达升高,40 mg/L DADS组蛋白表达升高最为显著.结论DADS可能通过上调p-ERK激活MEK-ERK信号通路诱导K562细胞发生自噬.     

骨髓间充质干细胞在异基因骨髓移植中的研究进展

骨髓间充质干细胞(MSCs)是骨髓基质细胞的前体细胞,分泌多种造血相关因子,表达多种黏附因子,同时具有免疫调节功能,在造血微环境发挥重要作用.因此,利用MSCs做滋养层,体外扩增造血干细胞(HSC),临床联合移植MSCs和HSC,提高造血重建的能力,减少或减轻移植物抗宿主病(GVHD)的发生,具有很广阔的研究前景.     

新生儿缺氧缺血性脑病血清铁和血清铁蛋白的动态变化及意义

目的探讨铁代谢紊乱在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)再灌注损伤中的作用。方法 分别测定60例HIE足月新生儿(其中轻度30例,中度20例,重度10例)入院时(日龄48h内)、日龄3～5天时血清铁(SI)及血清铁蛋白(SF)含量,并与20名健康新生儿(对照组)进行比较。结果 轻、中、重度HIE组入院时SI分别为(9.8±3.6)μmol/L、(9.7±4.3)μmol/L和(7.8±2.7)μmol/L,均低于对照组(14.5±5.0)μmol/L(P均<0.05);入院时轻、中、重度HIE组SF分别为(145.2±59.9)μg/L、(141.7±30.8)μg/L和(110.6±29.0)μg/L,均低于对照组(216.0±90.0)μg/L(P均<0.05);轻、中、重度HIE组日龄3～5天时SI分别为(18.7±4.2)μmol/L、(19.2±5.5)μmol/L和(26.1±5.6)μmol/L,均高于对照组(14.8±4.8)μmol/L(P均<0.05);SF分别为(314.3±93.0)μg/L、(397.1±95.3)μg/L和(546.6±98.9)μg/L,均高于对照组(218.6±75.4)μg/L(P均<0.05)。结论 HIE患儿出生48h内循环铁降低,日龄3～5天时升高,提示铁代谢紊乱可能在HIE再灌注损伤中起一定作用。