三拗汤及其组方药材挥发性成分比较分析

目的:探讨三拗汤各组方药材组成复方后挥发油的组成成分变化。方法:采用水蒸汽蒸馏法提取三拗汤及其富含挥发油的组方药材麻黄、苦杏仁的挥发油,并通过GC-MS联用技术对其进行分析鉴定和比较研究。结果:三拗汤挥发油的GC-MS TIC化学信号主要来源于组方药材麻黄和苦杏仁,但是单味药材麻黄和苦杏仁中一些化学信号于复方三拗汤中未检测到。结论:利用GC-MS比较分析方法研究三拗汤各组方药材组成复方后挥发性成分的变化,为揭示其效应物质基础和配伍机理奠定基础。     

基于nano LC-LTQ-Orbitrap-MS/MS的香附四物汤干预原发性痛经模型小鼠卵巢组织差异表达蛋白筛选

采用nano LC-LTQ-Orbitrap-MS/MS蛋白质组学方法筛选鉴定香附四物汤干预原发性痛经模型小鼠卵巢组织中的差异表达蛋白,推测香附四物汤治疗原发性痛经的机制。采用雌激素和缩宫素联合造成原发性痛经模型,给药组连续灌胃给予香附四物汤3 d,于末次给药后1 h,取卵巢,经蛋白提取、变性、还原、烷基化、脱盐、酶解后,进行nano LC分离并在线连接电喷雾串联Orbitrap质谱分析,利用Thermo Proteome discoverer 1.4进行数据处理,筛选并鉴定差异表达蛋白,对差异表达蛋白进行生物信息学分析。随后采用Western blot法,将重要差异蛋白进行验证。正常组、模型组、给药组3组共有的差异蛋白106个,参与细胞过程的蛋白所占比例较大,其所参与的黏着连接、黏着斑等信号通路对细胞内各种信号通路均有调节作用。验证的ADRM1蛋白在模型组中,较正常组表达上调;给药后,较模型组表达下调。通过有效的比较分析,得到一些香附四物汤干预原发性痛经的差异表达蛋白,其中ADRM1蛋白有可能是香附四物汤作用的靶点。     

酶解等4种方法用于中药废弃物资源化研究初探(Ⅰ)——以脉络宁注射液生产中石斛药渣的多糖资源化研究为例

目的:通过4种不同提取方法用于中药生产中废弃物的多糖资源化的比较研究,优选出脉络宁注射液生产废弃物石斛药渣中提取多糖的方法,实现对中药资源的再循环利用。方法:采用酶解法、湿法超微粉碎法、超声法和加热回流法分别提取石斛药渣中石斛多糖,以苯酚-硫酸法测定其多糖提取率;通过单因素考察和正交试验对提取率最高的提取方法进行工艺优选;考察石斛药渣多糖(DDP)对小鼠脾淋巴细胞的代谢转化和小鼠单核巨噬细胞RAW264.7释放一氧化氮(NO)能力的影响。结果:4种提取方法的多糖提取率分别为0.51%,8.79%,5.34%,3.44%,确定最佳提取方法为酶解;其最佳酶解条件:p H5.3,料液比1∶55,温度50℃,酶活性4 000 U·g-1,提取时间300 min;与对照组比较,质量浓度在62.5~125 mg·L-1,DDP显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖,DDP与脂多糖(LPS)协同促进作用显著(P0.05,P0.01),质量浓度为62.5 mg·L-1时,DDP与Con A协同促进作用显著(P0.05),质量浓度在62.5~500 mg·L-1,DDP对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7产生NO的促进作用极显著(P0.01)。结论:酶解法提取石斛药渣中多糖的工艺简便、得率稳定,具免疫增强作用,具有推广应用价值。     

少腹逐瘀汤对寒凝血瘀大鼠模型血液流变性及卵巢功能的影响

目的:评价少腹逐瘀汤对寒凝血瘀SD大鼠模型血液流变性及卵巢功能的影响。方法:采用冰水浴及注射肾上腺素的方法造成SD大鼠急性血瘀模型,对其血液流变性及卵巢分泌功能进行测定。结果:少腹逐瘀汤能改善寒凝血瘀SD大鼠血液流变性指标;对卵巢功能也显示出一定改善作用。结论:少腹逐瘀汤能改善寒凝血瘀SD大鼠全血黏度、血浆黏度、血沉、红细胞压积及调节E₂和P的水平。     

面向清洁生产的中药制药过程废水资源化循环利用基本思路及其关键技术

水环境的污染和破坏已成为当今世界主要的环境问题之一。中药制药过程所产生的废水具有组成不稳定、有机污染物种类多、不同厂家废水差异较大等特点,属于较难处理的高浓度有机废水之一。因此,中药制药过程废水的资源化循环利用是综合防治水污染、净化水环境的重要研究内容,也是中药行业绿色发展与产业升级的必然选择。在分析中药制药过程所产生废水的组成特征的基础上,提出了基于清洁生产的"一级处理-用于药效组分回收的二级处理-三级处理"的资源化循环利用基本思路。鉴于膜科学技术应用于污水处理的技术优势,特别是近年来用于制水和污水处理市场份额的快速增长,提出膜分离技术是中药制药过程废水资源化循环利用的重要选择之一,也是中药制药行业建立能源节约和环境友好集成技术群的有效途径,为中药制药废水的减排和资源化循环利用提供了新的思路。     

鹿皮胶Ⅰ型胶原赖氨酸位点的羟基化与O-糖基化修饰分析

该文采用纳升液相-串联质谱法对鹿皮胶样品进行分析,以PEAKS Studio蛋白质搜库鉴定软件对鹿皮胶赖氨酸位点的羟基化与O-糖基化修饰进行全面鉴定,明确鹿皮胶Ⅰ型胶原蛋白α1链(COL1A1)与α2链(COL1A2)发生羟基化与O-糖基化的主要位点、类型及数量。结果从4批次鹿皮胶样品中共鉴定了5284个肽段信息,主要来源于COL1A1与COL1A2,其中羟基化赖氨酸(hydroxylysine,Hyl)共449个,半乳糖基化赖氨酸(galactosyl-hydroxylysine,Gal-Hyl)共442个,葡萄糖半乳糖基化赖氨酸(glucosyl-galactosyl-hydroxylysine,Glc-Gal-Hyl)共449个。鹿皮胶的Ⅰ型胶原发生羟基化与O-糖基化的主要位点有:N-末端肽的α1-9N与α2-5N,三螺旋结构域的α1-87,α1-174,α1-930,α2-87,α2-174,α2-933,C-末端肽的α1-16C。这些羟基化与糖基化赖氨酸与Ⅰ型胶原的三螺旋结构及胶原纤维形成密切相关,而鹿皮经高温高压熬制的过程破坏胶原的共价连接有利于胶原蛋白与胶原肽的溶出,形成具有糖基化修饰的胶原肽类成分。该文研究为鹿皮胶的功效物质基础的深入揭示提供了研究思路与方法依据,具有较好的理论意义与应用价值。     

海藻玉壶汤加减甘草-海藻反药药对不同组方中11种活性成分在正常大鼠体内的药动学比较研究

海藻玉壶汤是含有甘草-海藻反药药对的古代名方之一,用于治疗各种甲状腺疾病,其临床应用较为广泛。该文采用UPLC-TQ-MS对大鼠灌胃给药不同组方海藻玉壶汤中血中11种生物活性成分进行测定,同时比较不同组方之间11种活性成分药动学差异,探讨了海藻玉壶汤与甘草-海藻反药药对的相互影响。首次建立了甘草苷、柚皮苷、橙皮苷、贝母素甲、贝母素乙、甘草酸、甘草素、佛手柑内酯、川陈皮素、蛇床子素与甘草次酸同时测定的UPLC-MS/MS含量测定方法。结果发现,海藻可提高甘草酸的峰浓度,海藻玉壶汤中其他组分可能促进甘草中黄酮类成分在正常大鼠体内的吸收,却抑制了皂苷类成分的吸收,加快甘草中某些皂苷类成分的代谢;甘草与海藻反药药对可提高橙皮苷、佛手柑内酯、川陈皮素、蛇床子素与贝母素甲的生物利用度,减慢柚皮苷与贝母素甲的消除。     

β-环糊精包合物对香附四物汤挥发油中主要成分在Caco-2细胞模型中转运的影响

虽然香附四物汤挥发油具有较强的药理活性,但挥发油特殊的物理化学性质制约了其临床应用与药效发挥。该文采用环糊精包合技术对香附四物汤挥发油部位进行制剂处理,同时利用人源结肠腺癌细胞系Caco-2细胞单层模型,研究了香附四物汤挥发油经β-环糊精包合后主要活性成分体外跨膜转运的改变,探讨了β-环糊精包合物对以低溶解性、高渗透性为特征的生物药剂学分类系统中第Ⅱ类药物跨膜转运与吸收的影响。首次建立了UPLC-MS/MS进行香附四物汤挥发油中主要活性成分洋川芎内酯A、正丁基苯酞、藁本内酯、去氢木香内酯、α-香附酮同时测定的含量分析方法。结果表明,将香附四物汤挥发油制成β-环糊精包合物能显著提高其活性成分在体外的透膜转运与吸收,据此推测环糊精包合物对难溶性药物的口服生物利用度有一定改善作用。该文的研究内容为香附四物汤β-环糊精包合物更加深入的体内过程研究提供了一定的实验依据,同时也为其新型口服制剂的研发奠定了基础。     

基于改进关联规则算法的中药药对药味间性味归经功效属性关系的发现研究

中药药对是联系方剂和中药的重要环节。虽然传统中医理论对药对中药味的组成方式有多角度的论述,但相比论著丰富的方剂理论还不够系统。本文分别采用标准关联规则发现Apriori算法以及改进多数据库计算方法,对从历代药对文献中收集整理得到的625个药对347味药中包括性味、归经、功效等共49个属性形成的数据库进行挖掘研究,并对两种方法得到的结果进行比较。结果表明,本文提出的新方法更适用于分析药物间的关联规则,集中度更好,更易于发现有价值的关联规则。     

羟丙基甲基纤维素对左金胃漂浮缓释片的漂浮性能和药物释放特征的影响

目的：探讨不同品种的羟丙基甲基纤维素（HPMC）对左金胃漂浮缓释片的漂浮和释药特征的影响,并优选最佳品种。方法：以不同厂家生产的7个HPMC品种为主要辅料制备7种左金胃漂浮缓释片,以起漂时间和持续漂浮时间评价制剂的漂浮性能,以小檗碱和巴马汀体外释放度评价制剂的释放特征。结果：HPMCMK-100000和MK-15000制备的片子快速崩解,不具有漂浮和缓释特征;K-100M和MK-4000所制备的片子起漂时间长,药物释放缓慢;60RT-50、K-4M和MK-1500所制备的片子起漂时间短,持续漂浮时间长,药物释放速度适中,均可作为左金胃漂浮缓释片的亲水凝胶骨架材料。结论：HPMC的品种显著影响左金胃漂浮缓释片的漂浮和释药特征,HPMC60RT-50为最佳品种。