复性速率液相分子杂交法测定枯草芽孢杆菌与短小芽孢杆菌DNA杂交度

目的　研究DNA DNA杂交率和 (G C)mol%测定方法 ,并把获得的数据应用于芽孢杆菌细菌分类、鉴定。方法　以枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌为研究材料 ,采用简便、实用又有很好重复性的热变性温度法 (Tm)测定DNA中 (G C)mol% ,以及复性速率液相分子杂交法测定DNA DNA杂交度。结果　热变性温度法 (Tm)测定枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌的DNA中 (G C)mol%分别为 42 .7和 40 .2 6 ,采用复性速率液相杂交法测定上述两菌DNA DNA杂交度为 9 6 6 %。结论　显示枯草芽孢杆菌与短小芽孢杆菌为同属中相互关系并不十分密切的两个种。     

SHIFT试验预示着伊伐布雷定对心力衰竭治疗的开始

正流行病学研究和临床试验早期证实,心率和多种心脏病患者的风险强烈相关。心力衰竭和急性心肌梗死患者β-阻滞剂的有益效果至少部分与心率降低有关。伊伐布雷定是心脏窦房结起搏细胞的特异性I f离子通道选择性抑制剂。对窦性心律患者降低静息和和运动时心率,而不降低心肌收缩性和房室传导。该药物的开发本质上有助于获得降低心率的效果。SHIFT研究显示,对收缩性心力衰竭、窦性心律以及心率70次/min或以上的患者,在最佳治疗的基础上每     

血管内皮细胞在切应力刺激后Toll基因的表达变化

目的：本室先前的实验观察到原代培养的贴壁融合脐静脉内皮细胞层流刺激后,IL-8mRNA的增强表达和NF-κB的活化。本探讨Toll蛋白在切应力诱导血管内皮细胞表达趋化细胞IL-8基因表达中的可能作用。方法：从正常对照和层流刺激后的原代培养的人脐静脉内皮细胞提取总RNA,根据TLR-2和TLR-4cDNA序列设计特异引物,     

颅脑外伤伴双侧瞳孔散大患者59例救治体会

目的 探讨对颅脑外伤伴双侧瞳孔散大患者的救治经验.方法 对43例具备手术指征的患者行手术治疗,其余16例行非手术治疗.结果 手术治疗者恢复良好9例,中残1例,重残6例,植物生存4例,死亡39例;非手术治疗者16例中重残2例,植物生存1例,死亡13例.结论 颅脑外伤伴双侧瞳孔散大患者病死率高,需明确原发病,开展院前及术前急救.对具备手术指征者,积极、尽早手术治疗,防治并发症,以改善预后.     

基于HIV-1 N,N''-二芳香酰肼类似物的合成

目的:合成N,N'-二芳香酰肼类似物.方法:基于HIV-1整合酶结构进行设计,考虑电子效应和空间效应,以不同取代的芳香羧酸等为起始原料,经酰氯化、酯化、肼解等反应方法,进行化学合成.结果:设计、合成了19个二芳香酰肼类衍生物,除LFA3外,其他18个化合物为首次报道.结论:系列新化合物的合成为进一步药物筛选和构效关系研究提供了基础.     

蛇床子素后处理对大鼠心肌急性缺血/再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响及其可能机制

目的观察蛇床子素后处理对大鼠心肌急性缺血/再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响,并对其可能的作用机制进行探讨。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支30 min后,松开结扎线再灌注120 min制备急性心肌缺血/再灌注损伤模型;将30只Wistar大鼠随机分为以下3组:对照(Sham)组、缺血/再灌注(I/R)组、I/R+蛇床子素后处理(Ost)组。采用TUNEL法原位标记缺血区凋亡心肌细胞并计算凋亡指数,采用Western blot法检测心肌组织中Caspase-3、Bcl-2及Bax三种蛋白的表达。结果与Sham组相比,I/R组心肌细胞凋亡指数、心肌组织Caspase-3蛋白、Bcl-2蛋白和Bax蛋白含量明显增高(均P<0.05);与I/R组相比,Ost组心肌细胞凋亡指数(P<0.05)、心肌组织Caspase-3蛋白(P<0.01)及Bax蛋白表达水平均降低(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达水平明显增高(P<0.05)。结论蛇床子素后处理能抑制急性心肌缺血/再灌注损伤所致的大鼠心肌细胞凋亡,同时上调心肌组织中Bcl-2蛋白的表达及下调心肌组织中Bax蛋白的表达,提示上调Bcl-2蛋白及下调Bax蛋白、进而上调Bcl-2/Bax比值可能是其发挥抗心肌细胞凋亡作用的机制。     

GST-hPlk2融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达

目的 构建GST-hPlk2融合蛋白表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达.方法 从人HEK293细胞中提取mRNA,反转录为cDNA.用PCR方法扩增出hPlk2基因全长,通过BamH Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点将其定向插入pGEX-4T-2载体中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-hPlk2,并转化E.coli DH5α,筛选阳性重组子,通过限制性内切酶酶切电泳鉴定和DNA序列测定正确后,转入Ecoli BL21中,经异丙基硫代β-D半乳糖苷大量诱导表达,SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定.结果 酶切电泳及测序结果证明,成功构建了原核表达质粒GST-hPlk2,并用Western blot方法证实了GST-hPlk2融合蛋白的表达.结论 成功构建了GST-hPlk2原核表达载体,并证实了其在原核细胞E coli中的表达,为进一步纯化Plk2及研究其结构与功能提供了前提基础.     

血清中AngⅡ水平升高与机械创伤后迟发性心功能障碍的相关性实验研究

目的 观察创伤后应激反应情况、炎症活动性等指标,筛选出一种可能的指标,帮助降低创伤后发生迟发性心脏功能减退患者的临床漏诊率.方法 利用Noble-Collip机械创伤仪制备机械创伤模型,通过离体心脏灌流技术检测大鼠离体心脏功能,ELISA方法检测机械创伤后0 h、6 h、12 h、24 h血清肾上腺素(NE)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)浓度的动态变化.结果与伪创伤组相比,机械创伤后24 h大鼠离体心功能降低;创伤组创伤后24 h内各时间点血清NE、hs-CRP和Ang Ⅱ浓度均逐步增高;机械创伤后24 h大鼠血清中AngⅡ浓度与+dp/dtmax呈负相关(r=-0.574,P<0.05),肾上腺素浓度与左室+dp/dtmax呈正相关(r=0.402,P<0.05),而hs-CRP浓度与+dp/dtmax相关性不显著(P>0.05).结论 循环AngⅡ的过度激活与机械性创伤导致心肌损伤或心功能下降密切相关,提示临床可以通过检测出血液中AngⅡ浓度来作为机械创伤发生心功能障碍的筛选指标.     

急性心肌梗死患者替奈普酶溶栓疗效和安全性评价

目的 本研究观察替奈普酶(TNK-tPA)对中国急性ST段抬高心肌梗死(STEMI)患者的疗效和安全性.方法 2002年10月至2004年3月,在北京市的宣武医院、同仁医院、人民医院、友谊医院和安贞医院,入组急性STEMI发病6h患者,随机给予TNK-tPA或重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA),给药后90 min行冠状动脉造影.主要疗效指标为溶栓治疗90min时,梗死相关动脉TIMI 3级血流的患者百分数.其他指标包括90 min梗死相关动脉TIMI 2/3级血流率、30 d的病死率、中重度出血及脑出血发生率.共110例STEMI患者进行统计分析,其中TNK-tPA组58例,rt-PA组52例.结果 两组患者溶栓后90 min冠状动脉造影TIMI 3级血流率分别为68.4%(39/57)和66.7%(34/51,P=1.00);TIMI 2/3级血流分别为89.5%(51/57)和80.4%(41/51,P=0.278);30 d的病死率分别为13.8%(8/58)和9.6%(5/52,P=0.565);中重度出血及脑出血的发生率分别为8.6%(5/58)和5.8%(3/52,P=0.72)及3.5%(2/58)和1.9%(1/52,P=1.00).结论 TNK-tPA溶栓治疗90 min TIMI 3级血流率、TIMI 2/3级血流率、30 d病死率、中重度出血发生率与rt-PA相似;TNK-tPA30 d病死率及脑出血发生率虽与rt-PA无统计学差异,但似乎较高,有关TNK-tPA在中国的临床使用,需进一步研究.     

轻型地中海贫血简易筛查方法研究

目的 探讨平均红细胞体积(MCV)测定法,红细胞渗透脆性试验(一管法)在筛查轻型地中海贫血中的价值。方法 用血红蛋白分析和聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测ζ珠蛋白肽链诊断轻型β地贫和α地贫1,用Sysmex F-800型血细胞分析仪进行测定分析[包括HGB、MCV(<80 fl)、MCH等项目]及用红细胞渗透脆性试验(一管法)检测红细胞的渗透脆性进行筛查。结果 631例受检者中检出轻型β地贫314例,α地贫1型237例,非地贫80例。551例地贫患者中MCV筛查阳性537例,敏感度为97.5％,特异度为85％;红细胞渗透脆性试验(一管法)阳性者453例,敏感度为82.2％,特异度为75％。结论 MCV法及红细胞渗透脆性试验(一管法)均是筛查地贫较好的方法,在没有血细胞分析仪的基层医疗单位,红细胞渗透脆性试验(一管法)可作为地贫筛查的一种较好的方法。